注:除非另有说明,本报告所用的参考期为日历年(1 月至 12 月)。印度财政年度 (IFY) 为 4 月至 3 月,乙醇供应年度 (ESY) 为 12 月至 11 月。 第一部分 执行摘要 2023 年,印度全国乙醇混合率预计将维持在 11.5% 的年均水平,创下新高,比去年增长 13%。2023 年 4 月,印度月均混合率首次超过 11%,预计今年剩余时间将保持在 12% 左右。随着印度试图在 2025 年前实现 E-20 国家目标,乙醇混合汽油 (EBP) 计划的原料供应范围和数量预计将在乙醇供应年 (ESY)(12 月至 11 月)增加。此外,由于甘蔗和糖浆、B 重糖蜜、受损粮食、印度食品公司 (FCI) 提供的剩余大米的转移增加,新德里 FAS (Post) 已将其 2022 年乙醇与石油的混合率估计上调至 10.2%。连续第九年,国内消费量将超过国内产量。2023 年,进口乙醇将继续供应工业、酒精饮料和医疗行业。在过去五年中,印度已发展成为一个重要的甘蔗剩余生产国,在 EBP 计划下实施稳定的定价体系,并确保适当的原料流动。政府的政策试图增加国内生产,同时继续禁止进口乙醇用于燃料混合。印度将更加注重乙醇生产,希望到 2025 年达到 E-20 目标,这也将限制糖的出口,因为去年甘蔗产量低于预期。尽管如此,Post 估计,由于政府大力支持去年迅速扩张的多原料和谷物蒸馏厂,2023 年燃料混合用乙醇产量将增加。尽管蒸馏能力有所提高,但 Post 确定,由于政府继续禁止进口用于汽油混合的乙醇,以及缺乏足够的 1G 和 2G 原料,印度将很难在 2025 年 ESY 之前实现 20% 的全国混合率。印度维持其生物柴油混合率目标,即到 2030 年,公路用生物柴油混合率达到 5%。2023 年,全国平均混合率保持不变,仍为 0.1%。由于棕榈硬脂进口限制、废弃食用油 (UCO) 和动物脂肪供应链混乱、原料成本高以及棕榈油供应短缺,印度的生物柴油使用量仍然极低。Post 预测,印度将在预测年生产约 2 亿升生物柴油,高于 2022 年的 1.85 亿升。由于政府的激励和干预,Post 估计 2023 年的消费量将略微上升至 1.9 亿升。据印度政府称,2021/2022 年度 ESY 的 EBP 计划节省了约 2.89 亿美元或 23 亿印度卢比 (INR) 的外汇,并且在整个计划实施过程中减少了超过 270 万公吨 (MMT) 的温室气体排放量 (GHG)。1 为了使印度实现乙醇和生物柴油的长期生物燃料混合目标,Post 继续确定需要进口生物燃料和生物燃料原料来补充国内生产。随着印度根据修订后的国家生物燃料计划扩大生产能力,将需要进口原料来增加国内供应,促进国内生产,并与政府的“印度制造”运动保持一致。
转基因株系采用第二代 CRISPRa 系统,该系统携带与异源三聚体 VPR 反式激活因子融合的核酸酶缺陷型 dCas9,该异源三聚体 VPR 反式激活因子由 VP64、p65 和 RTA 结构域组成。该系统可用于解释任何所需细胞类型的内源性调控机制。使用基于 CRISPR/Cas9 的基因组编辑方法,我们以 AAVS1 人类基因组位点为目标,分别引入先前描述的 dCas9VPR-tdTomato(Schoger 等人,2020 年)和嘌呤霉素盒,这些盒受 CAG 和 EF1a 启动子的控制(图 1 A)。采用优化的核转染方案转染 LhiPSC-GR1.1 细胞。转染后,选择具有 tdTomato 表达的细胞并通过 PCR 进行基因分型(图 1B,引物结合如图 1A 所示,黑色引物仅扩增野生型 (WT) 片段;绿色引物扩增插入的构建体)。随后,扩增、分析和冷冻保存两个阳性克隆(#2 和 #3)。DNA 测序数据证实了 AAVS1 基因座中的正确和纯合敲入转基因整合(图 1C,显示为克隆#2)。PCR 结果显示,在筛选的 15 个克隆中,11 个克隆含有纯合插入(命名为 CRISPRa 细胞),1 个克隆是杂合的,3 个克隆不含有插入而是含有 WT 完整基因座(用作对照细胞)(数据未显示)。通过分析 PCR 和测序预测的前五个脱靶位点进行脱靶分析;在这些位点中均未发现任何编辑事件。对照电穿孔和非电穿孔 (参考) 系用于比较 (补充图 1A)。所有系的支原体检测均为阴性。通过基于 SNP 的核型分析和标准 G 带证明了 CRISPRa 克隆 #2 和 #3 以及对照细胞的基因组完整性。未检测到数值或结构异常的证据 (图 1D)。与核转染 (图 1Ei) 和非核转染对照相比,细胞生长和形态正常。与对照 hiPSC 相比,CRISPRa 中的 dCas9 和 tdTomato 表达证实了转基因表达,如 Western blot (补充图 1B,显示克隆 #2 和 #3) 和共聚焦显微镜 (图 1Eii,显示克隆 #2,n = 3 个不同传代) 所示。通过免疫荧光分析干性标记 OCT4 的表达(图 1 Eiii)和流式细胞术分析(显示 94.2% OCT4 和 99.9% TRA1-60 阳性细胞(图 1 Eiv)(显示克隆 #2))来评估多能性。通过在 CRISPRa 和对照系中形成胚状体 (EB) 和定向分化来测试向所有三个胚层的自发分化能力。免疫荧光分析证实了 AFP、β-III-Tu bulin 和 α-平滑肌肌动蛋白 (ACTA2) 的表达,进一步支持内胚层、外胚层和中胚层的命运(图 1 F,显示克隆 #2 和 #3)。转录水平分析表明配对盒 3 ( PAX3 ) 和微管相关蛋白 2 ( MAP2 ) 的表达表明外胚层分化;T-box 转录因子 T ( TBXT ) 表明中胚层命运,而 α-Feto-Protein ( AFP ) 表明内胚层分化(补充图 1 C,显示克隆 #2 和 #3)。我们研究了 CRISPRa 系用于研究通过定向 2D 分化产生的心肌细胞的适用性,这种分化产生了自发跳动的细胞(视频作为补充材料提供),具有强大的 α-辅肌动蛋白 2 (ACTN2) 和心脏肌钙蛋白 T (TNNT2) 心脏标志物表达((补充图 1D,显示为克隆#2)。最后,我们通过确定与心脏肥大和代谢稳态有关的 KLF15 表达的诱导来测试 CRISPRa 系的功能。我们发现,与转染了非靶向 gRNA 的各自亲本系相比,设计用于结合 KLF15 转录起始位点 (TSS) 的 44 bp 5'-上游序列的单个指导 RNA 能够显着增强 CRISPRa 系(克隆#2 和#3)中 KLF15 的转录。对照细胞没有显示独立于转染的 gRNA 的活化(图 1G)。总之,使用完全表征的 hiPSC 系,我们生成了具有纯合靶向插入、正常核型和多能性的人类 CRISPRa 系,并显示出其激活
Sigma Gamma Tau 国家航空航天荣誉协会,1988 年 Tau Beta Pi 国家工程荣誉协会,1987 年 金钥匙国家荣誉协会,1986 年 美国杰出大学生国家荣誉协会,1986 年 Alpha Lambda Delta 国家新生荣誉协会,1986 年 工程经验 Dynacs Engineering(德克萨斯州休斯顿) 1997 年 2 月 - 2000 年 6 月 职位:结构动力学工程师 国际空间站兼职工程支持,侧重于结构建模和环境预测。编程包括 C、FORTRAN、NASTRAN 和 Matlab。平均每周投入时间 10 小时。 诺斯罗普·格鲁曼公司(德克萨斯州休斯顿) 1994 年 9 月 - 1996 年 6 月 职位:结构动力学工程师 负责 NASTRAN 分析以支持空间站微重力 AIT,包括使用 NASTRAN 进行特征解、瞬态时间模拟为实验室和散热器流体回路的新型流体动力学模拟做出了贡献,以评估它们对微重力要求的影响。 麻省理工学院(马萨诸塞州剑桥)1992 年 9 月 - 1992 年 11 月 职位:工程顾问 负责设计和计算机分析将在 NASA 兰利亚音速风洞中测试的可变几何机翼的组件。使用 ADINA 在 MIT 的 Cray 上执行结构建模。 美国空间服务公司(德克萨斯州休斯顿)1988 年、1989 年夏季 职位:工程实习生、员工工程师 职责包括小型运载火箭的结构分析和车辆开发。由于该公司规模较小,职责多种多样,从推进分析到结构设计。 出版物 Patrick CW、Xheng B、Wu X、Gurtner G、Barlow M、Kountz C、Chang D、Schmidt M、Evans GRD。 “Muristerone A 诱导神经生长因子从基因工程人类真皮成纤维细胞释放用于外周神经组织工程。”Tissue Eng 2001 年 6 月;7(3):303-311。Orgill DP、Butler C、Regan JF、Barlow MS、Yannas IV、Compton CC。“血管化胶原-糖胺聚糖基质提供真皮基质并改善培养上皮自体移植的吸收。”Plast Reconstr Surg 1998 年 8 月;102(2):423-9。Orgill DP、Solari MG、Barlow MS、O'Connor NE。“有限元模型预测皮肤接触烧伤的热损伤。”J Burn Car Rehabil 1998 年 5 月-6 月;19(3):203-9。 Crawley EF、Barlow MS、van Schoor MC、Masters B、Bicos AS。“零重力条件下空间结构模态参数的测量。”AIAA 制导、控制与动力学杂志,1995 年 5 月至 6 月,第 385-394 页。Crawley EF、Barlow MS、van Schoor MC。“空间结构模态参数的变化。”AIAA 航天器与火箭杂志,1994 年。Doebling SW、Hemez FM、Barlow MS、Peterson LD、Farhat C。“通过模型更新选择用于损伤检测的实验模态数据集。”第 34 届 AIAA/ASME/ASCE/AHS 结构会议论文集,结构动力学与材料会议,加州拉霍亚,1993 年 4 月。 Bicos AS、Crawley EF、Barlow MS、van Schoor MC、Masters B。“1g 和 0g 下空间结构的模态参数。”航空航天设计会议论文集,AIAA 93-1115,1993 年 2 月。 Doebling SW、Hemez FM、Barlow MS、Peterson LD、Farhat C。“通过模型更新检测悬挂比例模型桁架中的损伤。”第 11 届国际模态分析会议论文集,佛罗里达州基西米,1993 年 2 月。 Crawley EF、Barlow MS、van Schoor MC。“空间结构模态参数的变化。” AIAA 论文编号 92-2209,发表于第 33 届 AIAA/ASME/ASCE/AHS 结构、结构动力学和材料会议,德克萨斯州达拉斯,1992 年 4 月。Barlow MS、Crawley EF。“零重力下可展开桁架结构的动力学:MODE STA 结果。”空间工程研究中心报告编号 1-92,1992 年 1 月。提交摘要 Barlow MS、Patel K、Snyder N、Zhao J、Heggers JP、Gould LJ、Phillips LG。“冲洗量对污染伤口细菌数量减少的影响。”发表于整形外科研究委员会第 49 届年会,2004 年 6 月。
经总统批准,1918 年 7 月 12 日国会通过的《荣誉勋章》(经 1918 年 3 月 3 日法案、1918 年 7 月 9 日法案和 1919 年 7 月 22 日法案修订),授予在生命危险之上表现出勇敢和英勇的荣誉勋章,由部门或个人以国会的名义授予:Speciakt Four Raymond R. I. T., I. G., 'C11i1ell Statrs Anny, "lio, on '2 }Iay l!, d1ik 5,ervi11g tt.sa步枪手和连队,第 3n1 营,1977 年。在越南共和国区,他亲自在一次战斗巡逻中杀死了敌人。这里早些时候曾发生过伏击。:::;专家 lVN'。它很小,只是从敌方掩体中发出了更激烈的攻击性武器射击。ldier Jc,ape,1 到 th.,. :np of n c1ikࠌ, 到 as 0 ;anlt positio11。 _\nne<1 ,_.ith : 1 , 步枪 :uHl ,c,n,1·,ll .ࠍTe11:1c1es, k: :1:"l Lis eornrade expo:oe,l tlw111ieht•,; :c i1:t,:be tit·e from the lnn1kers a:: t'.1'·ࠎ- c·11:u·g'-'cl 最近的。专家 1Vl'ig ht 冲向掩体,投掷手榴弹,杀死了里面的人。然后,枪手跑向掩体。\·o ,ol(liers)u;.d1 ah:1il oi: ffre :o th,, S('C'J,lll 。\同时他的敌人用手与他搏斗:ࠏ madiine /:Hi:. 专家 lVri ui,c' 负责杀死 l'll<'li'Y rii!c•rn,t,1 ,,-itli a grrwH1e。Tlw t ,1·,, .ࠑ:llch,1· workl'c1 thvil' iYay thr,rn;.d1 lc'm::inin'.!.· b11nkers,敲门 nnt furn·(Jf ti1en1。Tln·ou1 .. d101;t 他们愤怒的 a,,s:rnl,, ࠒppࠓ·i:11ist 1r1·ir;ht aml hi,: emtll',lllP !t:1'1 Leen :tlnio"t cm1ti11u,:1dy expo"l'd to tii,c•rbf:' 狙击轮胎从 tlw trerlirn:作为 t1ic' 敌人 1lrs1w1·,11,,]y songh! 10 点,他们开始进攻。在防御系统的支持下,士兵们进入树林,迫使狙击手撤退,立即给予攻击,并将敌人从友军部队中驱逐出去,这样他们就可以在没有进一步伤亡的情况下穿过开阔地。当弹药耗尽时,Pxlinuste,1 专家立即返回他的部队协助撤离敌人的部队。这次单人进攻将敌军的一个排从 n 赶出。保持阵地,对抗敌人的大量伤亡,避免更多的冲突。专家们的“外在英雄主义,共同战斗精神”令人难忘。
