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非洲绿猴（African Green Monkey）全基因组CRISPR sgRNA ...
目的基因 sgRNA 数目： 64853 ；阴性对照 sgRNA 数目： 2000 ； sgRNA 大小： 20bp
股权依赖17Jan25 ru
O2C/天然气占归因于PAT的61％。 O2C EBITDA +16％QOQ（ +2％YOY） +15％QOQ上升柴油，有利的原料采购， +9％的产量和1-9％的聚合物三角洲增长1-9％； 11–12％的同比聚合物/聚酯需求增长，乙烷投入价格的3％降低了利润率。 O＆g EBITDA +5％QOQ（-4％YOY），尽管7％同比/2％QOQ在KG GAS的产生中下降至28mmscmd，但较高的气体实现（ +2％QOQ）较高的气体实现（ +2％QOQ）。 数字（PAT的23％） +17％同比/3％QOQ以12％同比/4％QOQ在ARPU中升至INR203。 潜艇涨幅为2％同比/1％QOQ，占无线流量的5G约40％。 Jio增加了2MN的Home宽带连接（总计17MN；目标：100m）。 零售业（PAT的16％） +9％同比/ +17％QOQ在强烈的节日，婚礼季节；脚步降至5％（平坦的QOQ）。 B2C杂货店增长了30％。 保证金 +20bp yoy/-20bp qoq。 可能会转向更大的格式，因为地区同比增长6％，而1.7％的净商店添加。O2C/天然气占归因于PAT的61％。O2C EBITDA +16％QOQ（ +2％YOY） +15％QOQ上升柴油，有利的原料采购， +9％的产量和1-9％的聚合物三角洲增长1-9％； 11–12％的同比聚合物/聚酯需求增长，乙烷投入价格的3％降低了利润率。O＆g EBITDA +5％QOQ（-4％YOY），尽管7％同比/2％QOQ在KG GAS的产生中下降至28mmscmd，但较高的气体实现（ +2％QOQ）较高的气体实现（ +2％QOQ）。数字（PAT的23％） +17％同比/3％QOQ以12％同比/4％QOQ在ARPU中升至INR203。潜艇涨幅为2％同比/1％QOQ，占无线流量的5G约40％。Jio增加了2MN的Home宽带连接（总计17MN；目标：100m）。 零售业（PAT的16％） +9％同比/ +17％QOQ在强烈的节日，婚礼季节；脚步降至5％（平坦的QOQ）。 B2C杂货店增长了30％。 保证金 +20bp yoy/-20bp qoq。 可能会转向更大的格式，因为地区同比增长6％，而1.7％的净商店添加。Jio增加了2MN的Home宽带连接（总计17MN；目标：100m）。零售业（PAT的16％） +9％同比/ +17％QOQ在强烈的节日，婚礼季节；脚步降至5％（平坦的QOQ）。B2C杂货店增长了30％。保证金 +20bp yoy/-20bp qoq。可能会转向更大的格式，因为地区同比增长6％，而1.7％的净商店添加。
通过体外转录实现 DNA 条形码的原位读取和单碱基编辑
唯一识别单个细胞的分子条形码技术受到条形码测量限制的阻碍。通过测序读取不会保留组织中细胞的空间组织，而成像方法保留了空间结构，但对条形码序列不太敏感。在这里，我们介绍了一种基于图像读取短（20bp）DNA条形码的系统。在这个称为Zombie的系统中，噬菌体RNA聚合酶在固定细胞中转录工程条形码。随后通过荧光原位杂交检测所得RNA。使用竞争匹配和错配探针，Zombie可以准确区分条形码中的单核苷酸差异。该方法允许原位读取密集的组合条形码库和由CRISPR碱基编辑器产生的单碱基突变，而无需在活细胞中表达条形码。Zombie可在多种环境中发挥作用，包括细胞培养、鸡胚和成年小鼠脑组织。通过成像灵敏地读取紧凑和多样化的DNA条形码的能力将促进广泛的条形码和基因组记录策略。
没有证据表明T1190中意外的转基因插入 - 用于快速周期育种的转基因苹果 - 遵循整个基因组测序
快速循环繁殖使用转基因早期流动植物，作为杂种父母，促进了多年生作物的繁殖繁殖计划的缩短。使用表达银桦树的BPMADS4基因的转基因基因型T1190建立了苹果的快速周期育种。在这项研究中，T1190及其非转基因的野生型引脚（F1-Offspring'pinova'和'iDared'的F1-OffSpring通过Illumina短阅读测序在两个单独的实验中进行了测序，导致T1190和167×PIS的平均测序深度为182×。测序显示8,450次读取，其中包含≥20bp的序列与植物转化载体相同。这些读数被组装成125个重叠群，检查了它们是否包含转基因插入或不使用五步程序。一个重叠群的序列表示T1190染色体4上已知的T-DNA插入。其余重叠群的序列在T1190和销钉中同样存在，它们具有与载体序列身份的部分同样存在于Apple参考基因组中，或者它们似乎是由内生污染而不是其他转基因插入的。因此，我们得出的结论是，转基因苹果植物T1190仅包含一个位于4号染色体上的转基因插入，并且没有进一步的部分插入转换载体。
CRISPR/Cas 技术及其在大肠杆菌中的应用
大肠杆菌是生产生物燃料和大宗化学品（如乙醇、高级醇、脂肪酸、氨基酸、莽草酸衍生物、萜类化合物、聚酮化合物和聚合物前体（如 1,4-丁二醇））的最广泛使用的细胞工厂之一（Yang 等人，2021 年）。生产这些生化物质的代谢工程需要对细胞代谢进行大量调节以提高生产率。基因组编辑需要高效的工具来执行节省时间的顺序或多重操作。大肠杆菌有许多基因编辑工具，但它们都有特定的优点和缺点。使用双链 DNA（dsDNA）进行基因工程重组通常需要选择标记，这些标记应在下一步中被消除，以便进行后续修改（Datsenko 和 Wanner，2000 年；Sharan 等人，2009 年）。与双链DNA相比，单链DNA（ssDNA）介导的重组效率更高，并已进一步发展为可进行多重编辑的基因编辑工具，如多重自动基因组工程（MAGE）（Wang et al.，2009）和可追踪多重重组（TRMR）（Warner et al.，2010）。但这些方法不适用于没有选择标记的20bp以上的多个靶基因插入，通常需要强大的高通量筛选方法（Li et al.，2015）。近来发展的成簇的规律间隔的短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）系统被广泛应用于大肠杆菌的基因工程，极大地促进了其应用。成熟的 CRISPR RNA (crRNA) 和反式激活 crRNA (tracrRNA) 双链（或单个合成向导 RNA，sgRNA）或仅 crRNA 引导 Cas 核酸酶切割具有所需原型间隔区相邻基序 (PAM) 的靶 DNA 序列 (Jiang et al., 2013)。我们之前的文章 (Liu et al., 2020) 总结了不同类型的 CRISPR 系统的机制。CRISPR/Cas 系统持续切割靶位点，直到成功编辑或未编辑的细胞死亡，从而无需使用选择标记。