2018年估计妇女中约有210万名新诊断的乳腺癌病例。三重阴性乳腺癌(TNBC),其特征是缺乏激素受体(雌激素和孕激素),缺乏表皮生长因子受体2和预后不良的表达,代表所有乳腺癌的10-20%。因此,这种类型的乳腺癌的新生物标志物的鉴定与早期诊断高度相关。此外,TNBC肽配体可用于设计专门针对这种乳腺癌的强大药物输送系统。因此,以下研究旨在选择和表征新型肽的新肽,用于乳腺癌鼠类乳腺癌细胞系-4T1。使用噬菌体显示,将7和12个氨基酸随机肽库筛选在4T1细胞系上。进行了四轮,加上使用3T3鼠成纤维细胞系的反选择。表征了富集的选择性肽,并通过免疫荧光和流式细胞仪分析证实了其与4T1组织样品的结合能力。所选肽(4T1PEP1 - CPTASNTSC和4T1PEP2 -EVQSSKFPAHVS)在几轮选择中富集,并表现出特定的与4T1细胞系的结合。
图2。合成,表征和DBCO修饰脂质体的体外靶向效应。(a)DBCO修饰的脂质体合成DSPE-PEG 2000 -DBCO,DOPC和胆固醇的示意图。使用DSPE-PEG 2000合成未修饰的脂质体。(b)DBCO-LIPO的大小和Zeta电位。(c)DOX和R837混合物的HPLC痕迹或dox/r837的提取物的提取物。将检测波长设置为254 nm。(d)在(c)中〜6.5分钟时检测到的DBCO脂质的UV吸收光谱。(E)用AC 4 Mannaz或PBS预处理的4T1细胞的共聚焦图像48小时,然后与DID封闭的DBCO-LIPO孵育30分钟。比例尺:10μm。(f)用AC 4 Mannaz或PBS预处理的4T1细胞的平均CY5荧光强度48小时,然后与DID封闭的DBCO-LIPO(2 mg/ml)孵育30分钟。(g)用AC 4 Mannaz预处理的4T1细胞的平均CY5荧光强度,然后与不同浓度的DID封闭DBCO-LIPO孵育30分钟。所有数值数据均表示为平均值±SD(0.01 < *p≤0.05; **p≤0.01; ***p≤0.001)。
在4T1肿瘤细胞中,CF和RF的溶血跟踪器绿色FM(蓝色)和DIL(红色)共定位。(b)使用ImageJ软件确定的(a)的DIL荧光强度。(c)JC-1(JC-1单体绿色,在不同处理下用于JC-1的荧光图像红色。(d)使用DAPI和-H2AX染色在所示的细胞中使用DAPI和-H2AX染色可视化核凝结和DNA碎片,并显示了代表性的图片。(e)基于每个处理组100个细胞(γ-H2AX焦点/100μm2,n = 3)的分析,确定了γ-H2AX灶的密度。(f)使用用2或6 Gy辐射处理的4T1细胞(n = 3)进行了菌落形成测定。(g)PMSI对细胞内的影响
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材料和方法:在这项实验研究中,将MDA-MB-231和4T1 TNBC细胞与骨髓衍生的MSC共同培养,并收集了TA-MSC条件培养基(CM)。TA-MSC CM处理的TNBC细胞进行迁移和侵袭测定。上皮 - 间质转变(EMT)标记。使用锥虫蓝色排除技术测量细胞增殖,而细胞周期分布和凋亡通过流式细胞仪评估。通过皮下在BALB/c小鼠的右侧与4T1细胞对MSC的地下共注射MSC对TA-MSC对肿瘤体积,存活率和肺转移的影响(每组n = 5)。使用慢病毒颗粒作为救援实验进行肿瘤内白细胞介素12(IL-12)免疫疗法。分析了TA-MSCS RNA-SEQ数据集(PRJEB27694),以检测从欧洲核苷酸档案数据库下载的转移相关的肿瘤基因。用于验证RNA-seq数据分析,使用RT-PCR在TA-MSC,TNBC细胞和肿瘤组织中评估候选癌基因的表达水平。
目的:将叶酸和环状精氨酰甘氨酰天冬氨酸肽引入带负电荷的脂质包被的混合聚多巴胺-半胱氨酸核心表面,用于递送表柔比星 (EPI) (E/PCF-NPs)。评估了使用 E/PCF-NPs 对三阴性乳腺癌进行化学-光热联合治疗的效果。材料和方法:研究了纳米粒子的升温效应和热毒性。通过透射电子显微镜、扫描电子显微镜和原子力显微镜表征了 E/PCF-NPs 的形态和性质。测定了物理化学性质,包括粒径、zeta 电位、载药量、包封率 (EE%)、稳定性和体外释放。在 4T1 细胞上测定了 E/PCF-NPs 的细胞活力、活性氧 (ROS) 水平、氧化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸与其还原形式 (NAD + /NADH) 的比率、细胞凋亡测定和细胞摄取。通过超高效液相色谱/质谱系统进行药代动力学研究和组织分布检测。还评估了近红外 (NIR) 激光辐照下 E/PCF-NPs 的抗肿瘤作用。结果:与单独的光热处理相比,E/PCF-NPs 的球形形态显示出高 EE%,均匀尺寸为 106.7 nm,显着的稳定性,并且在 NIR 激光下大大改善的细胞毒性。E/PCF-NPs 中 EPI 的体外释放对 pH 敏感,在 NIR 激光照射下可获得更大的响应。与单独化疗或光热治疗相比,体外联合治疗显著抑制了4T1细胞的存活率至17.7%,诱导了ROS的产生,并显著降低了NAD + / NADH。在辐射下用E / PCF-NPs治疗可诱导约93.6%的4T1细胞凋亡。体外细胞对E / PCF-NPs的摄取具有时间依赖性。E / PCF-NPs的长期循环和更高的肿瘤蓄积通过NIR激光照射介导的细胞凋亡增强的光热效应导致乳腺肿瘤组织完全消融。结论:E / PCF-NPs由于化疗与光热疗法的协同作用而显示出增强的抗癌作用,可能是癌症治疗的潜在治疗剂。关键词:聚多巴胺纳米粒子,L-半胱氨酸,表柔比星,药代动力学,三阴性乳腺癌
摘要:肿瘤微环境中的炎症环境会导致乳腺癌患者的免疫逃避、抵抗细胞死亡、转移和预后不良。TNF-α 是一种促炎性细胞因子,可调节肿瘤生物学从起始到进展的多个方面。TNF-α 诱导的 NF- κ B 激活可启动炎症途径,从而决定细胞存活、死亡和肿瘤进展。一种候选途径涉及自分泌运动因子的增加,自分泌运动因子会产生溶血磷脂,通过六种 G 蛋白偶联受体发出信号。值得注意的是,自分泌运动因子是转移性肿瘤中 40-50 个上调最多的基因之一。在本研究中,我们通过使用单克隆抗体英夫利昔单抗阻断 TNF-α 的作用来研究其作用,并研究其对自分泌运动因子和肿瘤进展的影响。英夫利昔单抗对肿瘤生长影响不大,但在使用 4T1 乳腺癌细胞的同源 BALB/c 小鼠模型中,它使肺转移减少了 60%。接受英夫利昔单抗治疗的小鼠的肿瘤增殖和转移标志物(如 Ki-67 和波形蛋白)也减少。同时,NF- κ B 活化、自分泌运动因子表达以及与转移有关的血浆和肿瘤细胞因子/趋化因子浓度也降低。我们还使用癌症数据库证明了乳腺癌患者中 TNF- α -NF- κ B 和 ATX 表达呈正相关。体外研究表明,TNF- α 诱导的 NF- κ B 活化会增加自分泌运动因子的表达和 4T1 乳腺癌细胞的克隆形成能力。本报告强调了英夫利昔单抗作为减弱自分泌运动因子-溶血磷脂-炎症循环信号传导和降低转移性癌症死亡率的另一种方法的潜在作用。
在G1期有效地施用CP和Vincristine可有效杀死胰腺癌细胞(29)。环磷酰胺增加4T1细胞中的p53,p16和γ -H2AX水平,并诱导ROS产生(30)。在MDA-MB-231细胞中,与CH和DOX共同处理从G2/M停滞转变为较高的G1种群。我们的发现与Sabzichi等人的报告保持一致,这表明CH通过抑制NRF2途径来改变MCF-7细胞中的细胞周期分布来提高DOX的功效(23)。我们发现CH抑制MDA-MB-231细胞迁移并增强5-FU,DOX和CP的功效。Yang等。 报道了TNBC细胞中的CH预处理促进Yang等。报道了TNBC细胞中的CH预处理促进
使用植物提取物(例如Ocimum Basilicum L.(OBL)种子)的绿色合成,由于其可持续和环保的性质引起了人们的关注。在这项研究中,使用OBL种子提取物在500°C和600°C的两个不同的钙化温度下使用OBL种子提取物合成Zno-MGO-MN 2 O 3纳米复合材料,并根据光催化施用和细胞毒性进行评估。植物化学物质充当生产路线中的减少和掩盖剂,从而导致具有独特特性的纳米材料形成。表征技术,包括XRD,FE-SEM和DRS,用于分析纳米复合材料的结构,形态和光学特征。XRD结果证实,晶体尺寸从〜32 nm(500°C)增加到〜84 nm(600°C)。另外,Fe-Sem图像显示出不规则形状的纳米复合材料的形成,样品的EDX光谱证实了锌,镁,锰和氧元素的存在。研究了不同有机污染物的纳米复合材料的光催化行为。eriiochrome黑色T染料的去除百分比为97%(pH = 10持续90分钟),甲基蓝色染料的99%(pH = 10,为60分钟),甲基橙色染料的89%(pH = 105分钟),Rhodamine b Dye(pH = 3 = 3 = 3 = 3 = 3 = 3 = 3.0分钟)。 此外,在4T1细胞系上评估了在500°C下合成纳米复合材料的细胞毒性,以投资其对生物系统的影响,并获得了IC 50值在323 µg/mL左右。eriiochrome黑色T染料的去除百分比为97%(pH = 10持续90分钟),甲基蓝色染料的99%(pH = 10,为60分钟),甲基橙色染料的89%(pH = 105分钟),Rhodamine b Dye(pH = 3 = 3 = 3 = 3 = 3 = 3 = 3.0分钟)。此外,在4T1细胞系上评估了在500°C下合成纳米复合材料的细胞毒性,以投资其对生物系统的影响,并获得了IC 50值在323 µg/mL左右。
