现场制造的检修门 - 每个检修门组件都有四根直径为 1/4 英寸 (6 毫米) 和长度为 5 英寸 (127 毫米) 的螺纹杆,门开口的每个角落都焊接了一根。长度为 4-1/2 英寸 (114 毫米) 的空心钢管安装在检修盖板外侧和螺纹杆上。四个 12 号 (3 毫米) 和 4-1/2 英寸 (114 毫米) 长的钢绝缘销焊接到检修盖板上,以便安装三层 FastWrap XL。将一层 FastWrap XL 切割成与检修面板大致相同的尺寸,并将其刺穿在面板上的绝缘销上。切割第二层 FastWrap XL 以便与第一层重叠至少 1-1/2 英寸 (38 毫米)。第一层和第二层必须紧密贴合周围的包裹物,并且没有通孔。第三层和最外层应切割成与第二层绝缘层重叠至少 1-1/2 英寸 (38 毫米)。绝缘销上安装最小 1-1/2 英寸 (38 毫米) 的圆形或方形绝缘夹,以将三层绝缘层固定到检修盖板上。绝缘材料的所有切割边缘应使用宽度至少为 3 英寸 (75 毫米) 的铝箔胶带粘贴。翼形螺母和垫圈安装在四根螺纹杆上,并拧紧在空心钢管上,以将检修盖板密封到管道上。
细胞LRRK2激酶活性是使用Invitrogen的Lanthascreen技术测量的。SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞用HG2019S或HWT LRRK2转染。 在小鼠成纤维细胞3T3细胞系中测量 LRRK2 PS935/总LRRK2比,以评估LRRK2激酶抑制。 OPM-383报告了细胞IC50值(NM)。 使用辐射蛋白激酶测定(Panqinase®活性测定)来测量所选蛋白激酶面板的激酶活性。 OPM-383溶解在1%DMSO的适当矩阵中。 在细胞色素P450抑制分析中研究了七个主要的细胞色素P450同工型(CYP1A,CYP2B6,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4)。 OPM-383溶解在1%Tween 80和1%HPMC中,并通过口服途径给药。 在给药后,在不同时间处死啮齿动物。 使用LC/MS-MS方法对OPM-383进行了定量。 OPM-383(5 µM)脑中的蛋白结合在4H使用UPLVC/MS-MS孵育后进行分析。 在英国Cyprotex评估了体外代谢,渗透性和蛋白质结合的体外代谢。 HERG研究是在Cerep进行的;法国。 OPM-383溶解在1%Tween 80中,1%HPMC溶于水中,并通过口头途径以50 mg/kg的速度进行CD1。 在给药后九十分钟后,迅速剖析了小鼠,并在液氮中迅速解剖血液,脑和肾脏。 用于免疫印迹程序,使用针对PS935和总LRRK2的抗体。 MC-38细胞被接种到C57BL/6小鼠中。SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞用HG2019S或HWT LRRK2转染。LRRK2 PS935/总LRRK2比,以评估LRRK2激酶抑制。细胞IC50值(NM)。使用辐射蛋白激酶测定(Panqinase®活性测定)来测量所选蛋白激酶面板的激酶活性。OPM-383溶解在1%DMSO的适当矩阵中。在细胞色素P450抑制分析中研究了七个主要的细胞色素P450同工型(CYP1A,CYP2B6,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4)。OPM-383溶解在1%Tween 80和1%HPMC中,并通过口服途径给药。啮齿动物。使用LC/MS-MS方法对OPM-383进行了定量。OPM-383(5 µM)脑中的蛋白结合在4H使用UPLVC/MS-MS孵育后进行分析。在英国Cyprotex评估了体外代谢,渗透性和蛋白质结合的体外代谢。HERG研究是在Cerep进行的;法国。 OPM-383溶解在1%Tween 80中,1%HPMC溶于水中,并通过口头途径以50 mg/kg的速度进行CD1。 在给药后九十分钟后,迅速剖析了小鼠,并在液氮中迅速解剖血液,脑和肾脏。 用于免疫印迹程序,使用针对PS935和总LRRK2的抗体。 MC-38细胞被接种到C57BL/6小鼠中。HERG研究是在Cerep进行的;法国。OPM-383溶解在1%Tween 80中,1%HPMC溶于水中,并通过口头途径以50 mg/kg的速度进行CD1。在给药后九十分钟后,迅速剖析了小鼠,并在液氮中迅速解剖血液,脑和肾脏。用于免疫印迹程序,使用针对PS935和总LRRK2的抗体。MC-38细胞被接种到C57BL/6小鼠中。蛋白质印迹检测和定量,并计算LRRK2 PS935/总LRRK2比例以比较LRRK2激酶抑制剂剂量与媒介物组相比。当肿瘤肿块达到75mm³时,将小鼠随机分配以接受OPM-383(50和100 mg/kg,口服,本次),抗PD1抗体(10 mg/kg,IP,每周两次)或组合。用OPM-383处理通过胃管通过口服烤(PO)进行治疗。给药量为10 mL/kg,调整为最新的个体体重。抗PD-1处理被注入腹膜腔(IP)。 动物治疗35天。 OPM-383使用Sengine-Paris®平台在患者衍生的类器官中进行了评估。 使用声液体处理机器人在第一天对细胞进行处理,不同浓度范围为0.32至10 µm。 在第六天,相对于车辆处理的井,每个孔中的细胞活力是一个百分比确定的。 为了评估药物敏感性,对药物反应曲线的AUC数据进行了分层聚类。 因此,Sengine确定了阈值(SPM),以定义分子在器官中的活性。 如果SPM> 9,则认为类器官对药物敏感,而SPM <9表示耐药性。抗PD-1处理被注入腹膜腔(IP)。动物治疗35天。OPM-383使用Sengine-Paris®平台在患者衍生的类器官中进行了评估。使用声液体处理机器人在第一天对细胞进行处理,不同浓度范围为0.32至10 µm。在第六天,相对于车辆处理的井,每个孔中的细胞活力是一个百分比确定的。为了评估药物敏感性,对药物反应曲线的AUC数据进行了分层聚类。因此,Sengine确定了阈值(SPM),以定义分子在器官中的活性。如果SPM> 9,则认为类器官对药物敏感,而SPM <9表示耐药性。
