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Izza Usman Bajwa 1 , Samuel Sigaud 1* 1 Accumol Inc.,加拿大艾伯塔省卡尔加里 * samuel.sigaud@accumol.com 摘要 磁性粒子通常用于从血液样本中分离特定类型的细胞。从这些细胞中提取的基因组 DNA 中的残留粒子会干扰紫外吸收分光光度法的浓度测量。在本研究中,我们在谱系特异性嵌合体分析工作流程中确定了紫外分光光度法 DNA 定量的不准确程度。我们发现残留磁性粒子和 RNA 的存在会导致对 DNA 浓度的估计过高。简介使用磁性粒子从血液样本中分离特定类型细胞是诊断或免疫遗传学实验室的常用技术。例如,谱系特异性嵌合体分析的典型工作流程包括从血液样本中分离 T 淋巴细胞、髓细胞或其他细胞类型,然后提取基因组 DNA,然后进行 PCR 或 qPCR 1 。提取后通常会检查 DNA 浓度和质量,以确保下游 PCR 反应在最佳条件下进行。根据 DNA 提取方法,在最终 DNA 样本中可能会发现用于细胞分离步骤的残留磁性粒子。虽然这些粒子通常不会干扰后续的 PCR 反应,但它们可能会影响 DNA 定量步骤。紫外吸光度分光光度法是评估 DNA 浓度和纯度最广泛的方法。它速度快,不需要使用标准曲线或特殊试剂。它使用非常少量的 DNA,尤其是使用无比色皿分光光度计(如 NanoDrop 仪器(ThermoFisher Scientific))进行时。然而,紫外吸光度对 DNA 2 不具有选择性。浓度测量可能会受到污染物的影响,例如 RNA、蛋白质、DNA 提取过程中使用的化学品或用于细胞分离的磁性粒子。为了克服这些问题,已经开发出荧光 DNA 结合染料 3。这些化合物与双链 DNA 结合时会显著增强荧光。它们具有高度的特异性和灵敏度,现在被认为是 DNA 定量的黄金标准。然而,与紫外分光光度法相比,荧光测量更耗时,需要使用昂贵的试剂,并需要实现 DNA 标准曲线。由于这些原因,当许多样本需要快速处理时,例如在分子诊断实验室中,紫外分光光度法仍然是确定 DNA 浓度的首选方法。本研究的目的是确定在谱系特异性嵌合体分析工作流程中紫外分光光度法 DNA 定量的不准确程度。我们研究了残留磁粒子对 DNA 浓度和质量测量的影响,并提出了提高测量准确性的建议。
1。引言n Owadays,水果和蔬菜,尤其是含有功能性化合物的植物,越来越引起人们对预防性人类健康的兴趣。多酚物质,尤其是葡萄糖类药物,例如槲皮素,procyanidin,氯酸,氯酸,epicatechin和维生素C,每天被人类自然或通过食物补充剂消费,并且由于其高生物活性而引起了极大的兴趣。此外,它们具有许多生物学和药理作用,例如抗氧化剂,抗癌,抗抗激素,抗炎性,抗病毒和心脏保护活性[1 E 6]。槲皮素是最丰富的烟素之一,自然地发现了果皮,绿叶蔬菜,草莓,洋葱,蔓越莓,蓝莓,红茶,红酒和各种果汁[7 E 10]。它的
本研究提出了一种对激光粉末融合的原位监测方法。使用标准的激光光学元件,在瞄准前扫描配置中获得了粉末床的同轴高分辨率多光谱图像。可以生成整个114×114 mm粉末床的连续概述图像,检测到直径低至20 µm的物体,最大偏移量为22-49 µm。通过从405 nm到850 nm的6个不同波长捕获图像来获得多光谱信息。与已建立方法的吸光度光谱相比,这允许在线确定粉末床的吸光度,最大偏差为2.5%。对于此方法的资格,已经在粉末表面和20种不同粉末的测试上进行射线追踪模拟。这些包括不同的颗粒大小,年龄和氧化粉末。
S.CONCENTRATION (μg/ml) ABSORBANCE At 270nm Analyst 1 Analyst 2 1 30 0.118 0.119 2 30 0.120 0.118 3 30 0.119 0.119 4 30 0.116 0.117 5 30 0.120 0.118 6 30 0.119 0.120 average 0.118 0.118 Standard Deviation 0.00048 0.00108 %RSD 0.406% 0.915%
有一系列可用于定量DNA的方法,包括吸光度,琼脂糖凝胶电泳和荧光DNA结合染料。传统方法涉及使用紫外分光光度计测量样品的吸光度。DNA在260 nm附近具有最大吸光度,因此该波长的紫外线通过样品传递。较高水平的吸光度表明样品中存在的DNA浓度更高。此方法的优点是也可以评估DNA的质量;还测量了280 nm处的吸光度以确定蛋白质污染的水平。A 260 /A 280比例表示DNA样品的纯度,值为1.8或更高的纯DNA样品。这种方法的缺点是,单链DNA(ssDNA)和RNA在260 nm处也吸收紫外线,因此可以干扰结果并引起双链DNA(DSDNA)浓度的高估。可用多种紫外线分光光度计,从量化板或比色杯中DNA的传统仪器到纳米旋风等仪器(Thermo
森林流域中野火的频率和严重程度的增加有可能显着影响从这些生态系统中导出的可萃取有机物(WEOM)的数量和质量。这项研究检查了实验室加热土壤中WEOM的光学特性,以了解由于加热而在有机物中发生的物理化学变化,并测试了光学参数在评估中的有用性。WEOM吸光度和荧光光谱形状和强度随着土壤加热温度的函数而系统变化。值得注意的是,吸光度和荧光强度,特定的紫外线吸光度,明显的荧光量子产率,特定的荧光发射强度以及最大的荧光发射波长与加热温度表现出一致的变化,并且表明在加热土壤中的WEOM在分子量和芳香的样品中较低。加热土壤中的较低分子量通过尺寸排斥色谱测量来证实。这项工作增加了野火对WEOM发生的分子变化的理解,并表明光学测量(即吸光度和荧光)可用于水分监测火后自动生成有机物。
• Absorbance of active components, by having a fully inert sample path • Interferences from air with specially designed valve enclosures purged with Helium carrier gas to prevent air diffusion and improve detection limits • Low concentration measurement with high sensitivity detectors like HID & SCD • Issues due to co-elution's of HC components with sulphur components are overcome by using an SCD over PFPD, where the SCD具有较高的选择性,更好的线性性和在SCD的前几代的稳定性提高
摘要:本研究描述了通过将金纳米颗粒(AUNP)沉积到光纤传感器上实现的局部表面等离子体共振(LSPR)效应的光纤探针的基本原理。这个想法是读取AUNP的吸光度谱及其对环境参数的依赖性,即使用光纤周围的折射率。基本上,我们选择了一种薄的光纤来鼓励周围介质中存在evanscent波。此外,纤维表面已被功能化,允许AUNP嫁接,而光纤尖端上的银镜则允许读取以进行反射配置。反射光谱显示出与单个和汇总AUNP相关的吸光度特征。在本文中,峰吸收性,即对反射信号的深度进行了研究,作为周围折射率的函数,以用于化学传感。