摘要。Rante H,Manggau MA,Alam G,Pakki E,Erviani AE,Hafidah N,Abidin HL,Ali A.2024。在印度尼西亚Maros-Pangkep的卡丁车生态系统中隔离和鉴定具有抗真菌活性的放线菌。 生物多样性25:458-464。 放线菌产生了各种具有抗菌,抗病毒和抗癌作用(例如抗菌,抗病性和抗癌作用)的生物活性二级化合物。 这项研究旨在隔离,鉴定和筛选抗阴茎从印度尼西亚Maros-Pangkep的喀斯特生态系统收集的土壤环境样本中。 然后将活性分离物发酵,以生产次级代谢产物。 发酵过程在150 rpm的搅拌条件下使用M1培养基12天。 根据序列Gen 16S rRNA鉴定了分离株放线菌。 对白色念珠菌ATCC 10231和尼日尔ASPERGILLUS NIGIL ATCC 16404的抗真菌活性进行筛查。 使用纸盘应用扩散方法来评估抗真菌活性。 结果表明,从收集的土壤样品中纯化了8个分离株。 从获得的8种分离菌中,两个放线菌在筛选方法中表现出抗真菌活性,即用代码B11和B 17分离出。在印度尼西亚Maros-Pangkep的卡丁车生态系统中隔离和鉴定具有抗真菌活性的放线菌。生物多样性25:458-464。放线菌产生了各种具有抗菌,抗病毒和抗癌作用(例如抗菌,抗病性和抗癌作用)的生物活性二级化合物。这项研究旨在隔离,鉴定和筛选抗阴茎从印度尼西亚Maros-Pangkep的喀斯特生态系统收集的土壤环境样本中。然后将活性分离物发酵,以生产次级代谢产物。发酵过程在150 rpm的搅拌条件下使用M1培养基12天。根据序列Gen 16S rRNA鉴定了分离株放线菌。对白色念珠菌ATCC 10231和尼日尔ASPERGILLUS NIGIL ATCC 16404的抗真菌活性进行筛查。使用纸盘应用扩散方法来评估抗真菌活性。结果表明,从收集的土壤样品中纯化了8个分离株。从获得的8种分离菌中,两个放线菌在筛选方法中表现出抗真菌活性,即用代码B11和B 17分离出。分离株B11的粗提取物对白色念珠菌和尼日尔的活性为2 mg/纸盘,1.5 mg/paber Disc和0.75 mg/Paper Disc。此外,发现分离物B17仅对白色念珠菌具有活性。对16S rRNA基因序列的系统发育分析表明,B11显示出与链霉菌菌株NBRC 15617的最高相似性。
植物皂苷(PMS)购自成都慕斯特生物技术有限公司(四川,中国),纯度≥98%。A549、95D、SPC-A1、H460和H292细胞购自美国典型培养物保藏中心(ATCC;美国弗吉尼亚州马纳萨斯)。RPMI-1640培养基购自HyClone公司(Cat#SH30809.01;美国犹他州洛根)。胎牛血清(ATCC 30-2020)购自赛默飞世尔科技公司(美国马萨诸塞州)。二甲基亚砜(DMSO)、1-溴-3-氯丙烷、异丙醇、乙醇、顺铂(DDP)和其他溶剂购自Sigma公司(美国密苏里州圣路易斯)。细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)、0.25%胰蛋白酶、0.01 M PBS (粉末,pH7.2~7.4)、1%多聚甲醛、线粒体膜电位测定试剂盒(含JC-1)和100×青霉素-链霉素溶液均购自北京索莱宝科技有限公司(北京,中国)。B27、表皮生长因子 (EGF) 和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 均购自 Invitrogen 公司(CA,美国)。一抗,包括抗 Caspas-3 (Cat#ab13847)、抗 Caspas-9 (Cat#ab32539)、抗 SOX2 (Cat#ab93689)、抗 CD44 (Cat#ab216647)、抗
Wnt3a,R-Spondin1和Noggin(WRN)调节培养基。15在简短的L-WRN(ATCC CRL-3276)细胞中,在10 cm板上培养了带有培养基(Dulbecco修改的Eagle的培养基[DMEM,Fisher],0.5 mg/ml G418(Thermofisher),0.5 mg/ml hygromycin b(Hygrofomycin B(Hygroforisher),1%的(生命),(life offermin),/strimies contrymin和1%(life ottercin),(thermofisher)的0.5 mg/mL G418(Thermofisher),/STRECTCILIN(LIFERCTIN),症状(Themerofisher),/症胎牛血清)。在10%的L-WRL细胞(ATCC,CRL-3276)中已在10 cm板中播种在培养基中(没有G418和Hygromycin B),将细胞孵育3-4天。当细胞为80%-90%汇合时,将培养基替换为10 mL新鲜培养基,并将细胞孵育24小时。收集培养基,以1000×g离心4分钟,通过0.22-PM无菌过滤器,并存储在-80°C下。将另外10毫升的新鲜培养基添加到板上并在24小时后收集,以使用相同的步骤使第二批条件培养基。在使用前将第一,第二和第三批条件介质混合在一起,以制备100%WRN条件介质。
图 2:与亲本细胞系相比,ATCC CRISPR 编辑的病毒生产细胞系显示病毒基因组拷贝数增加。MDCK.STAT1KO、Vero.STAT1KO 和 293.STAT1 BAX KO 病毒上清液的 TCID ⁵⁰ 染色显示,与各自的亲本细胞系相比,甲型流感病毒产量增加了 2 倍,登革热 II 病毒产量增加了 30 倍,仙台病毒产量增加了 1.8 倍。
在30°C-35°C孵育24-48小时后观察到的文化特征与蛋黄乳液一起在Baird Parker琼脂底部使用。生物(ATCC)菌落金黄色葡萄球菌亚种的生长颜色。金黄色葡萄球菌(25923)好灰色黑色闪亮大肠杆菌(25922)无-Kocuria ronizophila菌株PCI 1001(9341)可怜的非常小的棕色黑色黑杆菌(6633)
avicennia码头是沿海地区常见的红树林,并以其药用特性而闻名。在这项研究中,针对MDR微生物评估了AVICENNIA叶片乙醇提取物的乙醇提取物的抗菌和抗真菌活性。针对一系列细菌菌株(包括沙门氏菌sp。)评估提取物的抗菌活性。(MDR),Klebsiella sp。(MDR),假单胞菌sp。(MDR),Acinetobacter sp。(MDR),金黄色葡萄球菌以及真菌菌株白色念珠菌(ATCC 10231),念珠菌parapapasilosis(ATCC 22019)。结果表明,针对所有测试的MDR微生物的Avicennia码头提取物表现出显着的抗菌活性。该植物的植物化学含量包括许多生物活性化合物 - 类黄酮,单宁和生物碱,可能导致观察到的抗菌活性。这些发现表明,Avicennia Marina可能是天然抗菌剂的潜在来源,可用于开发新药物以治疗耐药性细菌和真菌感染。需要进一步的研究来识别和分离负责观察到的活性的活性化合物,并评估其在体内的功效和安全性。关键字:Avicennia Marina;抗菌活性;抗真菌活性;沙门氏菌。;克莱伯斯ella sp。;假单胞菌sp。; ACINETOBACTER SP。;金黄色葡萄球菌;白色念珠菌;念珠菌parapasilisos。
大肠杆菌 16S 标签 1 AAATTGAAGAGTTTGATCATGGCTCAGATTACATGCGGATTCGAGGGGCCACAGGAGGCATCACTGACATGCCCTATCGTGATAGGG GCTAGCTACAGCAGAGTGGCGGACGGGTGAGTAATGTGAGTAGCGAAAAGTCATGGCTAAAGGTACTGTTTCGTCATCCGATAAGA TTGACGGAAATTGATTCTCACACGTCCCGATGTGGGAGCCGCGACCGTCACAGGTGAAGAATCTCTCTCAAAAGATTTATGGCCATA GTAGATTTCACTCACAAATCCAGACACACGGGTAGTTCGCTGCGACTCGATTTCTAATATCTTATGGATCCTAATCTAGACTCCTACGG GAGGCAGCAGTGGTCTACTGCATGATCAACCAAAGGTGTTCCGGCTTACGTTCAATTTGAGAACGGCGGTCTGGAGCATGAAAGGA CGAGACGGCATTAGGACTTGCCAGGCGATGTATGCTGATCGGGAAGTAGGGAAACATGAGAGGCCGCTCTAAATCCTCTTCCGTGC CAGCAGCCGCGGTAATACGACGTGTGATCATGGTAGACGTCCACTTTTACCGTGTGTGGGCGATGAGGGATGCAAGAGGATCATTG GTTAGCGTATTTGTGACTCTGAAACTAAGGCAGGAGACCAGGTTAGGTAAACGGTGCGTAGATAATCCGCAGACCGCCGGTCGCGT AGCTTAAGGAAAGGGTATGCCCGACGTGGCTTGAAACAGATACCTAAACCAGGTGACGCCTATAGAGAACGACGAAGCTAATCTAT CCGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGAC 产气荚膜梭菌 16S 标签 2 AAATTGAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGATGTACGACGAGGATTTAGGTGGGGAGGGACTGGCACGAGTAGTATACGGTTTTAAAAA GTATTGGAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACCTTAAGGCGGGTTGGGGCGTCCGAAACATACGATCCCGCTGGCAAAGGTGCCAGT GGCAGACCTGGCGGGGAGTACCGGAGCATAAAGGATTCGCAAGCACGTTCAGCGGTTAGGGAGCCTGGGCTGCAAGCGCGAAGGC CAGCGCTTTACCGTGCATGGTTAGCAAATGAGTCCCTGACCGACCACCACATAATCGTACGTCCGTATCCTCTCTACAGACTCCTACG GGAGGCAGCAGTGGTAGGCTCCATAATGCTAGTCGACCTCGTGCTTGGTCGCTGCTTCAACCGTTCACAAGAACTCTCCTGCCAACGT TAATCGGCGTAGCGCGTAATCGATCACCGAGTGTAGTACGTATCTATCCCTATACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTGAAGGTTT GAACTGAAATCAAGAAAGTTAATCAAGGGTTGCGTGCGCGGAATCGGCGTGAAAACAAATTGAGCGGGTGGGAACAAAACGAAGA TGGTAGTTCTATAGGTTGCAGATAACTCCCGTAACTTTAGCTGCGGTAAGGAAGTGTGCGCTTACGGGATAGCGATATGTACTGGCC TAAGAGCTCCGGATTTCTAAGCTGCTGGGTCGAATGTAAGCACGACACATCTCTAATCCGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCC ACGCCGTAAACGATGAATAC 金黄色葡萄球菌 16S 标签 3 TTTATGGAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGATCATTACCTCGATTGAGATAAGCAAACAAGTCTCGCCTAGTGAAGGCACGTCTGATCGT加拿大邮政GTGCCAGCAGCCGCGGTAATACCGAAGTCTATTATCTCGGCATGCTCGTGGAGCTCAGACCGCTGAGGTGAAGTATAAAGTGTTCGC AGGATCGAGATATAACGGCTCATATATGTGATGGGACCAGTTTAAAATACGCGGATATGCAGTGCACGGACCAGGAGGGACGGAG AGGGACCTCTTACTTGCAATCGTTCAATGGAGGTCAGTACCGCAGAGAGTAGGTAATACTGTGAGACGAAGAGAAAGAGATTTGTG AATCCTCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGC 表 1. 3 个菌株标记基因组 DNA 均匀混合物 (ATCC® MSA-1014™) 的组成
摘要 尽管倾注平板法在微生物质量控制中得到广泛应用,但它也存在某些缺点,包括必须在接种前融化培养基。在本研究中,通过使用较低浓度的琼脂(10 g/L)对培养基的制备进行了改进,琼脂在灭菌过程中与营养物质分离。在食品、化妆品和药品微生物质量控制中经常使用的培养基中评估了新方案,其中包括胰蛋白酶大豆琼脂 (TSA)、Sabouraud 4% 葡萄糖琼脂 (SDA) 和紫红胆汁葡萄糖琼脂 (VRBG)。与传统生产的培养基相比,改进后的培养基显著改善了 SDA 中酿酒酵母、金黄色葡萄球菌、肠道沙门氏菌亚种的生长。在 TSA 中可分离肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和白色念珠菌,在 VRBG 中可分离大肠杆菌 ATCC 8739 和 ATCC 25922 以及鼠伤寒沙门氏菌。改良的 VRBG 对铜绿假单胞菌也更具选择性。至于物理化学性质,在 TSA 和 VRBG 中观察到 pH 值明显较低,在 TSA 中观察到强度值较低。将琼脂与培养基的其他成分分开灭菌,并将琼脂浓度降低至 10 g/L,可改善微生物生长,并提高倾注平板法中差异培养基的选择性。这些改进可以促进这种培养技术的自动化。