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Accellix数据的手动门控通常从分析在整个数据采集范围内收集的事件的FSC开始,并使用FSC-A的双变量图到高峰时间,从而产生时间门(图1A)。然后,使用信号残差参数(图1B)将内部对照珠与事件库分开,并通过CD45阳性鉴定细胞(未显示)。在健康人血中发现的典型细胞子集的大小是众所周知的。根据这些信息,使用了与这些细胞集匹配的微球(流式细胞仪尺寸校准套件,CAT#F13838,Thermofisher Scientific)。这些微球不会荧光,而是根据FSC特性易于识别(图1C)。
