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通过 CRISPR/Cas 拯救重组腺病毒...
重组腺病毒 (rAd) 载体是体内和体外基因转移应用中最常用的载体之一。rAd 基因组在大肠杆菌中构建，在大肠杆菌中，它们的基因组可以以环状质粒或细菌人工染色体的形式保存、繁殖和修改。尽管从环状质粒或杆粒形式中拯救 rAd 的方法已经很成熟，但其初级效率相对较低，阻碍了该技术用于文库应用。为了克服这一障碍，我们测试了一种重建 rAd 的新策略，该策略利用 CRISPR/Cas 机制在转染后在生产细胞内靠近其反向末端重复序列 (ITR) 的位置切割环状 rAd 基因组。这种 CRISPR/Cas 介导的体内末端分辨率可以有效拯救来自不同人类腺病毒 (HAdV) 物种的载体。通过这种方式，不仅可以将病毒拯救的效率提高约 50 倍，而且所提出的方法也比传统的 rAd 重建方法更简单、更快捷。
恒河虫腺病毒的保护性疗效，可抵抗小鼠适应的SARS-COV-2
摘要全球COVID-19大流行激发了人们对疫苗快速开发以及动物模型的强烈兴趣，以评估候选疫苗的候选者并定义保护的免疫相关性。我们最近报道了小鼠适应的SARS-COV-2病毒菌株（MA10），可能会感染野生型实验室小鼠，促进呼吸道组织中的高水平病毒复制，以及严重的临床和呼吸症状，以及在模型系统中捕获的人类疾病中重要的临床和呼吸道症状。我们评估了新型恒河猴血清型52（Rhad52）疫苗针对MA10挑战的免疫原性和保护性效率。恒河虫载体的基线血清阳性低于人类或黑猩猩腺病毒载体，使这些载体具有吸引人的疫苗开发候选者。我们观察到Rhad52疫苗引起了鲁棒的结合和中和抗体滴度，它们与挑战后的病毒复制成反比。这些数据支持RHAD52疫苗的开发以及MA10 Challenge病毒在筛查新型疫苗候选物中的使用，并研究野生型小鼠中SARS-COV-2挑战的免疫机制。
自我临时性的新型腺病毒载体covid- ...
摘要SARS-COV-2在全球造成了超过380万人死亡，并且迫切需要使用几种类型的Covid-19疫苗，包括腺病毒载体疫苗。但是，热不稳定性和预先存在的免疫力限制了其广泛的应用。为了绕过这些障碍，我们通过基于SAD23L载体（CAP）产生基于SAD23L载体的磷酸钙矿物质外观（CAP）来构建了一个自生物的腺病毒（SAD23L-NCOV-S-CAP），基于SAD23L载体载体，该载体具有SARS-COV-2 Spike-2 Protical Incordice polysiy（SS）。该SAD23L-NCOV-S-cap疫苗的结构特征，热稳定性，免疫原性并避免了先前的免疫力问题。在热稳定性测试中，SAD23L-NCOV-S-CAP可以在4 C下储存45天以上，26 C超过8天和37 C，持续2天。此外，SAD23L-NCOV-S-CAP诱导的较高水平的S特异性抗体和T细胞反应，并且不受先前存在的抗SAD23L免疫力的影响，这表明它可以用作对SAD23L-NCOV-SOV-SOV-S-S-S-S-SPRIMING启动疫苗的增强免疫。用SAD23L-NCOV-S-CAP疫苗促进的提升诱导的高滴度为10 5.01抗S1，10 4.77抗S2结合抗体，10 3.04伪病毒中和中和抗体（IC 50），IFN-C（1466.16 sfcs/10 6 6 sf）s pectiestiestss s s pectiestiest抗体（IC 50）和可靠的T-cell响应。总而言之，COVID-19疫苗SAD23L-NCOV-S-CAP的自我生物矿化改善了疫苗的效能，可用于预防人类的SARS-COV-2感染。
腺病毒疫苗的工作原理
导致 COVID-19 的病毒会迅速复制。如果没有疫苗，你的身体必须识别病毒，学习如何对抗病毒并进行免疫反应。与此同时，病毒可能会复制到你的免疫系统无法处理的水平——这意味着你会感到不舒服。有了疫苗，你的身体可以更快地识别病毒并直接开始免疫反应。
基于复制缺陷型腺病毒的 SARS-CoV-2 疫苗研发前景
摘要：新型冠状病毒 2 型 (SARS-CoV-2) 的出现及其在世界范围内的迅速传播构成了全球卫生紧急事件。疫情的严重性影响着全世界的人民，需要卫生系统和政府迅速采取措施。疫苗接种是预防病毒流行、进一步降低发病率和死亡率的最有效策略，且效果持久。然而，目前尚无针对新型冠状病毒的许可疫苗。来自世界各地的研究人员和临床医生正在使用各种方法推进针对新型人类 SARS-CoV-2 疫苗的开发。在此，我们旨在介绍和讨论使用基于腺病毒 (AdV) 复制缺陷的策略针对 SARS-CoV-2 疫苗研究领域的进展和前景，并对其进行理解，以支持研究和应对这一最近的世界卫生紧急事件。
腺病毒载体的免疫剂量反应
摘要：最佳疫苗剂量对于确保最大程度的保护和安全至关重要。对以前研究的剂量反应数据的分析可能会为未来的研究提供信息，以确定最佳剂量。最近有人建议在疫苗剂量确定中实施更多的定量建模方法，以加速疫苗开发。腺病毒载体疫苗正处于针对各种预防和治疗指征的开发后期，但剂量反应尚未系统地确定。为了进一步指导腺病毒载体疫苗的剂量识别，应系统地回顾历史剂量反应数据。进行了系统的文献综述，以整理和描述腺病毒载体疫苗的可用剂量反应研究。在 Medline 搜索策略确定的 2787 篇论文中，发现 35 篇符合预定标准。大多数研究是在小鼠或人类身上进行的，研究了腺病毒血清型 5。有 12 种不同免疫反应的剂量反应数据。大多数论文评估了三种剂量水平，只有两篇论文评估了五种以上的剂量水平。最常见的剂量范围是小鼠研究中的 10 7 –10 10 个病毒颗粒和人类研究中的 10 8 –10 11 个病毒颗粒。腺病毒疫苗剂量反应数据可用，主要是腺病毒血清型 5 骨架以及小鼠和人类。这些数据可用于定量腺病毒载体疫苗剂量优化分析。
Nebnext Ultra DNA库Prep套件，用于Illumina E7370手册
未显示。酶以粗体类型显示，并以常规类型显示具有两个限制位点的酶。所有NEB限制酶的位置位置可以在NEB网站上找到（选择技术参考> DNA序列和地图）。限制位点坐标是指每个识别序列中最高链上最高基数的位置。