商业准备的培养基的最终用户应根据适用的政府监管机构进行质量控制测试,并符合认证要求。Hardy Diagnostics建议最终用户检查是否有污染和恶化的迹象,如果由实验室质量控制程序或法规决定,请执行质量控制测试以证明生长或积极的反应并表现出抑制作用或负面反应(如果适用)。Hardy Diagnostics质量控制测试记录在Hardy Diagnostics分析证书网站上的分析证书(COFA)上。还请参阅文档“成品质量控制程序”,以及有关商业准备的微生物培养基的CLSI文档M22-A3质量保证,以获取有关适当QC程序的更多信息。请参阅下面的参考文献。
1. Wickerham, J. Tropical Med. Hyg., 42, 176 (1939) 2. Williams, (Ed.),2005,《官方分析化学家协会官方分析方法》,第 19 版,AOAC,华盛顿特区 3. 微生物类型培养物保藏中心和基因库 (MTCC) 微生物技术研究所,昌迪加尔。 4. Isenberg, HD 《临床微生物学程序手册》第 2 版。 5. Jorgensen, JH、Pfaller, MA、Carroll, KC、Funke, G.、Landry, ML、Richter, SS 和 Warnock., DW (2015) 《临床微生物学手册》,第 11 版。 1. 6. 美国公共卫生协会,《乳制品检验标准方法》,1978 年,第 14 版,华盛顿特区 7. Salfinger Y. 和 Tortorello ML,第五版(编辑),2015 年,《食品微生物检验方法概要》,美国公共卫生协会,华盛顿特区 8. Wehr HM 和 Frank JH,2004 年,《乳制品微生物检验标准方法》,第 17 版,APHA Inc.,华盛顿特区
包括布鲁氏杆菌、棒状杆菌、巴氏杆菌、肺炎球菌和链球菌等难培养菌,在适当的温度下无需添加增菌剂(1,11,12)即可在较长时间内生长。甚至一些对光敏感的厌氧微生物也可以在没有特殊条件的情况下在该培养基中生长,但在还原气氛中,它们会得到理想的生长。该培养基在新鲜配制时效率最高,但可以长期保存,但注意避免脱水。为此,强烈建议使用螺旋盖或适当密封。在有二氧化碳的培养基中,牛放线菌、漏斗状拟杆菌和细毛菌(8)等厌氧菌在该培养基中生长良好。添加碳水化合物后,它可用于研究不在酚红经典培养基中生长的微生物的糖发酵。通过酚红指示剂的颜色变化可以轻易观察到酸化。在半固体琼脂中,酸性反应很容易检测到,因为形成的酸不会像在肉汤中那样立即扩散到整个培养物中。当不存在可发酵碳水化合物时,大多数培养物都会出现碱性反应。在半固体培养基中很容易检测到运动性 (13)。运动性培养物远离接种线生长。非运动性生物沿着接种线在接种区域生长,而周围区域保持清洁。胰蛋白胨、L-胱氨酸提供支持苛刻微生物生长所需的营养。碳水化合物发酵是通过培养基的可见颜色变化来检测的,这是由于 pH 指示剂染料酚红的掺入。当生物代谢存在的碳水化合物时,会产生有机酸,培养基会变酸。然而,培养基中存在的蛋白胨也会被存在的细菌降解,产生 pH 呈碱性的物质。当碳水化合物发酵产生的酸量大于蛋白胨降解的碱性终产物时,酚红指示剂会从红橙色变为黄色。酚红的颜色变化发生在 pH 值 6.8 左右,接近培养基的原始 pH 值。在研究奈瑟菌属的发酵时,只接种管状培养基的表面。对于兼性生物,例如链球菌和严格厌氧生物,接种方法是用接种针刺入培养基中心,深度约为培养基深度的 1/2。根据所测试的生物,使用松开的盖子进行有氧或厌氧培养。奈瑟菌应使用松开的盖子培养(7);如果在 CO2 培养箱中培养(3,10),则应在非 CO2 培养箱中使用紧密的盖子培养(3)。为了更快地生长和更快地进行发酵反应,厌氧培养物最好在 CO2 以及氢气或氮气存在下进行培养。
原理和解释 酵母和霉菌是一类庞大而多样的微生物,由数千种组成。酵母和霉菌可导致不同程度的食物腐坏。如果环境条件不受限制,几乎任何类型的食物都可能出现酵母和霉菌的侵袭和生长。一些食源性酵母和霉菌是不可取的,因为它们对人类和动物健康有潜在危害 (1)。建议使用按照 USP/EP/BP/JP/IP (2,3,4,5,6) 统一方法制备的马铃薯葡萄糖琼脂进行药物检测中的微生物限度测试。它还用于刺激孢子形成、维持某些皮肤癣菌的种培养物以及根据色素产生区分典型的皮肤癣菌品种 (7)。马铃薯浸液和葡萄糖 (葡萄糖) 可促进真菌的旺盛生长。用酒石酸将培养基的 pH 值调节至 3.5 可抑制细菌生长。酸化后应避免加热培养基,因为这可能会水解琼脂,导致琼脂无法凝固。
膜过滤程序和粪便延迟孵育。蛋白质肽,色氨酸和酵母提取物为粪便生长提供必要的营养。乳糖是培养基中的碳源和可发酵碳水化合物。胆汁盐抑制污染革兰氏阳性微生物的生长。苯胺蓝是一种三苯基甲烷染料,可抑制许多革兰氏阳性微生物的生长。苯胺蓝以及玫瑰酸形成培养基的指示系统。膜过滤器,通过将水样品通过无菌放置在M-FC琼脂底板上。如果要估计总大肠菌群,则在35-37°C下进行孵育,而如果要估算粪便大肠菌数,则在44-45°C下进行孵育。大肠菌群将形成蓝色菌落,而非颜色将在M-FC琼脂碱基上形成灰色菌落。
乳酸杆菌MRS琼脂夫人是由研究人员Deman,Rogosa和Sharpe开发的,是一种替代性的非选择性培养基,用于培养挑剔的乳酸乳杆菌。以前用于乳酸乳杆菌的培养基使用了番茄汁,但是,番茄汁琼脂是不希望的,因为它的可变性和制备困难。Rogosa,Mitchell和Wiseman描述的媒体虽然足以适合大多数乳酸杆菌,但仍发现与某些乳制品乳酸乳杆菌的生物不满意。考虑到这一点,Deman,Rogosa和Sharpe希望为乳酸杆菌开发一种新的和一般的非选择性生长培养基。他们发现包含Tween®80,柠檬酸盐和醋酸酯会改善乳杆菌的生长,而柠檬酸盐和醋酸盐和醋酸酯弱抑制了革兰氏阴性杆菌和真菌的生长。锰和镁是柠檬酸盐存在下生长所需的无机离子。(1)此媒体的选择性程度较低;因此,伴随伴随菌群的次生可能会良好生长并竞争营养。然而,大多数随附的微生物可以通过添加各种选择性剂,例如环己酰亚胺,多粘霉素,乙酸硫酸硫酸硫酸,索比酸,乙酸或亚硝酸钠。乳酸乳杆菌MRS琼脂与环己酰亚胺可用于抑制样品中可能的真菌。
平板计数琼脂(标准方法琼脂)二型用途板计数琼脂(标准方法琼脂)用于从牛奶和乳制品,食品,水和其他卫生材料中获取微生物板计数,该材料符合BIS规格LS 5402:2012:2012。如Buchbinder等人所述,摘要板数琼脂是配制的,相当于牛奶和其他乳制品中微生物的板计数APHA推荐的培养基,也可以用于确定食品,水和其他材料的卫生质量,适用于获得纯平室的细菌计数。 它包含在食品和化妆品测试的细菌分析手册中。 原理胰酮提供氮气和其他氨基酸。 酵母提取物提供B复杂的维生素,而葡萄糖是能源。 配方 *成分G/L酪蛋白5.0酵母提取物的酶促摘要2.5葡萄糖,无水1.0琼脂15.0最终pH(在25°C下)7.0±0.2 *调整为适合性能参数。 储存和稳定存储在紧密闭合的容器和2°C-8°C下制备的培养基中脱水的培养基脱水。 避免冷冻和过热。 在标签上到期日之前使用。 打开后,保持粉末状培养基闭合以避免补水。 样品,牛奶和乳制品样品的类型;根据已建立的指南,水样品收集和处理临床样品的处理遵循适当的处理标本的技术。 对于食物和乳制品样本,根据已建立的指南遵循适当的处理标本的技术。 指示摘要板数琼脂是配制的,相当于牛奶和其他乳制品中微生物的板计数APHA推荐的培养基,也可以用于确定食品,水和其他材料的卫生质量,适用于获得纯平室的细菌计数。它包含在食品和化妆品测试的细菌分析手册中。原理胰酮提供氮气和其他氨基酸。酵母提取物提供B复杂的维生素,而葡萄糖是能源。配方 *成分G/L酪蛋白5.0酵母提取物的酶促摘要2.5葡萄糖,无水1.0琼脂15.0最终pH(在25°C下)7.0±0.2 *调整为适合性能参数。储存和稳定存储在紧密闭合的容器和2°C-8°C下制备的培养基中脱水的培养基脱水。避免冷冻和过热。在标签上到期日之前使用。打开后,保持粉末状培养基闭合以避免补水。样品,牛奶和乳制品样品的类型;根据已建立的指南,水样品收集和处理临床样品的处理遵循适当的处理标本的技术。对于食物和乳制品样本,根据已建立的指南遵循适当的处理标本的技术。指示对于水样品,按照既定准则和当地标准遵循适当的技术来处理标本。应在给药之前获得标本。使用后,必须在丢弃前高压灭菌对受污染的材料进行消毒。