简单总结:遗传性皮肤病是一种遗传性皮肤病,主要遵循单基因遗传模式。可遗传的结缔组织疾病,如经典的埃勒斯-丹洛斯综合征 (cEDS),属于这类人类罕见疾病,偶尔发生在其他物种中。本文报道了一头受影响的牛,其皮肤病变(包括皮肤松弛症)在临床和病理上与人类的 cEDS 相似。深层真皮的显微镜发现与胶原发育不良一致。全基因组测序 (WGS) 确定了 COL5A2 基因中最有可能致病的突变。已知 COL5A2 基因与小鼠和人类的显性遗传 cEDS 形式有关,但到目前为止,尚未发现它会在家畜中引起类似的表型。本文检查的疾病表型显示与母系中已识别的错义变异在两代中共同分离,很可能是由于自发突变事件造成的。牲畜中罕见的非致命疾病(如 cEDS)大多无法诊断,但可能会影响动物福利,从而降低受影响动物的价值。基于 WGS 的精确诊断可以了解罕见疾病,并支持对牛繁殖群体进行有害遗传疾病监测的价值。
布鲁塞尔,2021 年 11 月 25 日至 26 日 2011 年,委员会成立了两个专家工作组 (EWG),1) 制定统计报告的通用格式和 2) 评估程序的严重性,以促进实施关于保护用于科学目的的动物的指令 2010/63/EU。作为这项工作成果的一部分,成员国国家联络点在 2012 年 3 月 22-23 日的会议上批准了一份关于转基因动物 (GAA) 的指导文件,以实施指令 2010/63/EU,随后在 2012 年 7 月 11-12 日的会议上批准了 GA 福利评估方案(纳入附件)。附件的勘误表于 2013 年 1 月 23 日获得批准。然而,随着过去十年技术的快速发展,以及在何时和需要何种授权以及如何报告用于创建和维护 GA 品系的动物方面达成统一理解的明显困难,欧盟委员会于 2018 年 6 月 27-28 日在布鲁塞尔就 GAA 的创建、繁殖和维护举办了一次额外的 EWG 会议。会议之后成立了几个小组,以制定最常用的转基因动物的福利评估框架物种,另一项是确定在机构之间或欧盟以外的地方发送 GAA 时应携带的信息元素,以确保适当的饲养和护理实践到位,以协助最佳地应用减少和精炼实践。所有成员国和主要利益攸关方组织都被邀请提名专家提供意见并参与讨论。该文件是通过所有上述 EWG 的工作、与成员国的讨论以及委员会的法律意见制定的。该文件已于 2021 年 11 月 25 日至 26 日举行的国家主管当局会议上获得批准,以实施第 2010/63/EU 号指令。免责声明:以下内容旨在作为指导,帮助成员国和受第 2010/63/EU 号指令影响的其他人保护用于科学目的的动物(经欧洲议会和理事会条例 (EU) 2019/1010 修订)就指令中的条款达成共识并促进其实施。所有评论均应在本指令 2010/63/EU 和委员会实施决定 2020/569/EU 的背景下考虑。该文件的内容并未施加超出指令规定的额外义务。只有欧洲法院才有权以具有法律约束力的权力解释欧盟法律。
摘要:小鼠尿液中含有人尿中未发现的主要尿蛋白(MUP)。因此,即使健康的小鼠也表现出蛋白尿,与健康的人不同,将小鼠用作人类疾病的模型变得具有挑战性。也未知尿液分析的量子是否可以精确地测量含有MUP的尿液中的蛋白质浓度。为了解决这些问题,我们通过使用Cas9蛋白和两个指导RNA去除MUP基因簇来产生MUP敲除(MUP-KO)小鼠,并表征了这些小鼠中的尿蛋白。,我们使用蛋白质定量试剂盒和量油盒测量了MUP-KO和野生型小鼠中的尿蛋白浓度。我们还使用SDS-PAGE和二维电泳(2DE)检查了尿蛋白组成。MUP-KO小鼠(17.9±1.8 mg/dl,平均值±SD,n = 3)的尿蛋白浓度明显低(P <0.001)(p <0.001)(p <0.001)。这种差异并未反映在量强壮的值中,这可能是由于对MUP的敏感性低。这表明用量油量有限,可以精确地测量MUP的变化。SDS-PAGE和2DE证实,像人类一样,MUP-KO小鼠的尿液中没有MUP,而野生型小鼠的尿液中有大量的MUP。MUP在2DE中的掩蔽效果将使尿蛋白,尤其是低分子量蛋白的明确比较。因此,MUP-KO小鼠可以为人类尿液分析提供有用的模型。关键词:基因组编辑,敲除模型,主要尿蛋白,尿液分析
摘要:电穿孔动物基因敲除系统技术(TAKE)是一种简单有效的方法,利用成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR 相关蛋白 9(Cas9)系统生成转基因小鼠。为了增强电穿孔在小鼠基因编辑中的多功能性,针对玻璃化冷冻小鼠胚胎优化了电条件,并将其应用于广泛使用的近交系(C57BL/6NCr、BALB/cCrSlc、FVB/NJcl 和 C3H/HeJJcl)的新鲜胚胎。电脉冲设置(穿孔脉冲:电压,150 V;脉冲宽度,1.0 ms;脉冲间隔,50 ms;脉冲数,+4;转移脉冲:电压,20 V;脉冲宽度,50 ms;脉冲间隔,50 ms;脉冲数,±5)对于玻璃化冷冻加温的小鼠胚胎是最佳的,其可以有效地将 gRNA/Cas9 复合物递送到受精卵中而无需透明带变薄过程并编辑目标位点。这些电条件在广泛使用的近交系小鼠中有效地产生了转基因小鼠。此外,使用间隙为 5 mm 的电极进行电穿孔可以在 5 分钟内引入超过 100 个胚胎,而无需特殊的预处理和复杂的技术技能,例如显微注射,并且在产生的后代中表现出较高的胚胎发育率和基因组编辑效率,从而快速高效地产生基因组编辑小鼠。本研究中使用的电条件用途广泛,可以更轻松高效地生成转基因小鼠,有助于了解人类疾病和基因功能。关键词:CRISPR/Cas9、电穿孔、冻融胚胎、基因组编辑
摘要:自发性hhy小鼠出现脑积水和皮层下异位,且已鉴定出Ccdc85c基因突变。为了比较Ccdc85c在不同物种中的作用,我们建立了Ccdc85c KO大鼠并研究了其病理表型。Ccdc85c KO大鼠是通过转录激活因子样效应核酸酶(TALEN)的基因组工程改造而来的。KO大鼠的Ccdc85c基因约350 bp缺失,缺乏CCDC85C蛋白表达。KO大鼠表现出非阻塞性脑积水、皮层下异位和颅内出血。KO大鼠具有许多与hhy小鼠相似的病理特征。这些结果表明CCDC85C在大鼠大脑发育中起着重要作用,且CCDC85C在大鼠和小鼠大脑中的作用相似。关键词: Ccdc85c, 脑积水, 大鼠, 皮层下异位
自从大约 10 亿年前单细胞祖先出现以来,后生动物目前的多样性是通过漫长的进化过程实现的。这一进化过程产生了大约 35-37 个现存动物门,除脊椎动物亚门外,这些门均由无脊椎动物组成。目前,已描述的现存后生动物种类约为 1,162,000 种,其中只有约 50,000 种是脊椎动物(约 5%)。此外,无脊椎动物能够适应所有类型的生态系统,包括水生和陆地生态系统,因此研究无脊椎动物的多样性和进化对于了解现存动物生物学至关重要。总结无脊椎动物或基于无脊椎动物的研究历史会过于广泛。然而,值得注意的是,自诺贝尔奖创立以来,它曾多次授予使用无脊椎动物模型的研究人员。一些例子包括使用果蝇作为模型的研究(例如,染色体在遗传中的作用、昼夜节律、先天免疫机制、嗅觉受体、早期胚胎发育的遗传控制)、秀丽隐杆线虫(程序性细胞死亡的机制、RNA 干扰)、海胆(细胞周期的关键调节器)、海蛞蝓(神经系统中的信号转导)、蜜蜂(社会和行为模式的组织)、螃蟹(生理和化学视觉过程)、章鱼(涉及神经细胞膜周围和中心部分的兴奋和抑制的离子机制)或水母(用于发现和开发绿色荧光蛋白 GFP)。除了基于无脊椎动物模型的研究有着悠久的历史之外,我们现在生活在一个特殊的时代,主要有两个原因:首先,自从第一个无脊椎动物的完整基因组被测序(2000 年秀丽隐杆线虫的基因组)以来,我们现在可以获得大约 1000 个无脊椎动物物种的完整基因组序列(存放在 NCBI 数据库中);其次,由于 CRISPR/Cas9 或 TALEN 等简单基因组改造技术的发展,我们可以进行一系列功能实验,这在几年前是不可想象的。考虑到所有这些,我们很高兴在这本题为“无脊椎动物的进化”的卷中介绍关于不同无脊椎动物谱系的新颖而有趣的研究,重点关注其生物学的几个方面。本卷包含八篇原创研究文章和三篇评论,它们的重点、想法和假设反映了使用无脊椎动物作为模型生物的研究的当前多样性和未来方向。本书显然无意成为无脊椎动物研究的详尽集合,但我们希望这里介绍的文章集合能够让您对无脊椎后生动物研究的类型和所用动物模型的多样性有一个总体了解。因此,我们可以阅读使用鹿角珊瑚 [ 1 ] 开展的研究,使用几种软体动物开展的研究,例如头足类 Nautilus pompilius [ 2 ]、腹足类 Crepidula fornicata [ 3 ] 或双壳类 Mytilus galloprovincialis [ 4 ],以及使用涡虫 Schmidtea mediterranea [ 5 ] 开展的研究,或者使用几种脊索动物开展的研究,例如两种头索动物(Branchiostoma lanceolatum [ 6 ] 和 Branchiostoma floridae [ 7 ])和两种尾索动物(Ciona robusta [ 8 ] 和 Phallusia mammillata [ 4 ])。如今,从非经典动物模型中获取转录组和基因组数据更加容易,使得基因家族进化的研究更加全面。因此,
- 鲱鱼 ( Clupea harengus, Clupea pallasii ), 凤尾鱼 ( Engraulis spp .), 沙丁鱼 (Sardina pilchardus, Sardinops spp .), 沙丁鱼 ( Sardinella spp .), brisling or sprattus ( Sprattus sprattus ), 鲭鱼 ( Scomber scombrus , Scomber australasicus , Scomber japonicus ), 印度鲭鱼 ( Rastrelliger spp .), 锯鱼 ( Scomberomorus spp .), 竹荚鱼和竹荚鱼 ( Trachurus spp .), jacks, crevalles ( Caranx spp .)、军曹鱼 ( Rachycentron canadum )、银鲳 ( Pampus spp .、秋刀鱼 ( Cololabis saira )、鲹 ( Decapterus spp .)、毛鳞鱼 (Mallotus villosus)、剑鱼 (Xiphias gladius)、卡瓦卡瓦鱼 (Euthynnus affinis)、鲣鱼 (Sarda spp.)、枪鱼、旗鱼、旗鱼 (Istiophoridae),不包括子目 0302.91 的可食用鱼内脏至 0302.99: