* 通讯地址。电话:+1 650 725 9250;传真:+1 650 724 1164;电子邮件:gibbson783@gmail.com。通讯地址也可以是 Kaihang Wang。电子邮件:kaihangwang@caltech.edu。通讯地址也可以是 Stephen L. Mayo。电子邮件:smayo@caltech.edu
Argonaute(AGO)蛋白是生命所有领域中存在的保守核酸引导的蛋白质。真核生物Argonaute蛋白(EAGOS)是RNA干扰途径中的关键玩具,并且在生理温度下起RNA引导的RNA核酸内切酶的作用。尽管Eagos被认为是从原核蛋白质(Pagos)演变而来的,但先前研究的Pagos无法在生理温度下催化RNA引导的RNA裂解。在这里,我们描述了来自中粒细菌库尔西亚马西里尼斯(Kmago)的独特pago。kmago利用DNA指南裂解具有较高活性的单链DNA(ssDNA)和RNA靶标。kmago还利用RNA指南在适度的温度下裂解ssDNA和RNA靶标。我们表明,Kmago可以使用5'磷酸化的DNA指南,以切割SS-DNA和RNA,例如Butyricum of Of。小的DNA结合赋予了Kmago上的显着热稳定性,我们可以通过避免DNA指南加载温度来抑制空kmago的独立于导向的质粒加工活性。更重要的是,Kmago在37°C上执行双链DNA和高度结构化的RNA的可编程切割。因此,Kmago可以被视为一种DNA引导的可编程无内能力核酸酶,以使大多数类型的核酸有效地切断。这项研究扩大了我们对AGO蛋白质的理解,可以扩展基于Pago的DNA和RNA MA-MA-MA-MA-MA-MA-NIPULATION工具箱。
(d AGO)菌株均为各种DNA复制抑制剂,以研究TT AGO是否确实在DNA复制中起作用。受到回旋酶A抑制剂环氧蛋白的抑制剂,TT AGO编码细胞的外观正常,而D前细胞变得伸长并形成纤维。tt ogo对正常表型的恢复仅在cipro伏那霉素的某些浓度下观察到。透射电子显微镜和刺激的发射消耗显微镜表明,在这些环氧蛋白浓度下,由于DOGO细胞中的cat染色性染色体未能使细胞分裂完成(图1)。因此,得出的结论是,当抑制回旋酶A时,TT AGO通过解开夹层染色体来有助于进行性复制。通过共免疫沉淀,然后进行质谱分析,作者表明,即使在DNase I的处理后,TT AGO与参与DNA复制和修复的许多蛋白质相互作用。
新版本中的大部分更改旨在使本文与 Hedgge 等人和 Kuzmenko 等人已经发表的文章保持关联,这两位作者描述了来自其他丁酸梭菌菌株的类似 pAgo,其中只有一篇文章(Hedgge 等人)在发送本文的第一个版本时作为未修改的文章发布。基本上,在得知 Kuzmenko 等人的结果后,我们重新考虑了 CbcAgo 与 CbcAgo 的热稳定性水平的差异,他们也报告了他们的标记版本的 CbAgo 具有更高的热稳定性。其他细微更改与图表编号的正确对齐或字体大小的增加有关,以便于阅读。讨论部分也进行了修改,以对相应部分中包含的审阅者意见提供适当的答复。