• B73 是一座小型两层木结构实验室和办公设施。 • 从 1960 年开始分阶段使用有色金属材料建造。 • 木材、有色金属结构和偏远位置最大限度地减少了磁“噪音”。
CELIA ALGERIE B100 CHEPLAPHARM B62 CHIFA MOBILE B63 CNAS B08 CNOP B04 CNPM B05 CRSP B12 CYNALAB B71 DANONE DJ.ALG B99 DAR EL DAWA B47 DEMOCEDES B23/B27 DENIZ B53/B57 DERMILYNE B89 EURAPHARMA DISTRIB. B17 EPIC 俱乐部 B14 药学系 B11 FADERCO B68/B73 FAP B06 FRATER RAZES A69/A72 GENIS PHARM B83/B86
摘要:高效的遗传转化是快速进行基因功能分析和作物性状改良的先决条件。我们最近证明,使用我们的快速农杆菌介导转化方法,具有 NptII /G418 选择和兼容辅助质粒的新型 T-DNA 双元载体可以有效地转化玉米自交系 B104。在这项工作中,我们实施了非整合型 Wuschel2 (Wus2) T-DNA 载体方法进行农杆菌介导的 B104 转化,并测试了其对难转化自交系 B73 转化和基因编辑的潜力。非整合型 Wus2 (NIW) T-DNA 载体辅助转化方法使用两株农杆菌菌株:一株携带目的基因 (GOI) 构建体,另一株提供 NIW 构建体。为了监测 Wus2 与玉米基因组的共整合,我们将由强组成型启动子驱动的玉米 Wus2 表达盒与新的可见标记 RUBY 相结合,后者产生紫色色素甜菜碱。作为 GOI 构建体,我们使用之前测试过的 CRISPR-Cas9 构建体 pKL2359 进行 Glossy2 基因诱变。当 GOI 和 NIW 构建体都由 LBA4404Thy 菌株递送时,B104 转化频率显著提高了约两倍(10% vs. 18.8%)。重要的是,我们能够使用 NIW 辅助转化方法转化顽固性自交系 B73,并通过省略选择剂 G418 获得了三株无转基因编辑植物。这些结果表明,NIW 辅助转化可以提高玉米 B104 转化频率,并为 CRISPR 技术用于无转基因基因组编辑提供一种新选择。
