XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemBFGF
联合培养基与常规培养基对输卵管类器官培养的成本及效果比较
摘要输卵管上皮细胞 (FTEC) 被认为是高级别浆液性卵巢癌的起源细胞。FTEC 类器官可用作该疾病的研究模型。然而，培养类器官需要补充多种昂贵生长因子的培养基。我们提出，基于输卵管成分的组合条件培养基，包括上皮细胞、基质细胞和内皮细胞，可以增强 FTEC 类器官的形成。我们从输卵管的伞部获得了两种原代培养细胞系。根据类器官生长的培养基，将它们分成常规或组合培养基组并进行比较。评估了类器官的数量和大小。定量聚合酶链反应 (qPCR) 和免疫组织化学 (IHC) 用于评估基因和蛋白质表达 (PAX8、FOXJ1、β-catenin 和干性基因)。酶联免疫吸附测定用于测量两种培养基中的 Wnt3a 和 RSPO1。将 DKK1 和 LiCl 添加到培养基中以评估它们对 beta-catenin 信号传导的影响。通过生长因子阵列评估组合培养基中的生长因子。我们发现常规培养基更有利于类器官的增殖（数量和大小）。此外，组合培养基中的 WNT3A 和 RSPO1 浓度太低，需要添加，使得成本与常规培养基相当。然而，两组的类器官形成率均为 100%。此外，与常规培养基组相比，组合培养基组的 PAX8 和干性基因表达（OLFM4、SSEA4、LGR5、B3GALT5）更高。在常规培养基中生长的类器官中 Wnt 信号明显，但在组合培养基中则不明显。发现 PLGF、IGFBP6、VEGF、bFGF 和 SCFR 在组合培养基中富集。总之，组合培养基可以成功培养类器官并增强 PAX8 和干性基因表达。然而，传统培养基对于类器官增殖而言是更好的培养基。两种培养基的费用相当。使用组合培养基的好处需要进一步探索。