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牛奶和奶制品中甲型流感病毒的提取和检测 - 2024 年 8 月 22 日

a. 95% 乙醇（Sigma E7023 或同等溶液） b. 不含 DNase/RNase 的水（Life Technologies AM9937 或同等溶液） c. 去离子水/蒸馏水/Milli-Q 水 d. NaCl（Sigma S3014 或同等溶液） e. NaOH（Sigma S5881 或同等溶液） f. HCl（Sigma H1758 或同等溶液） g. 甘氨酸（Sigma G7126 或同等溶液） h. 10X PBS 组织培养 (tc) 级（Sigma P5493）稀释至 1X i. KCl（Sigma P9541 或同等溶液） j. 磷酸二氢钾（Sigma P9791 或同等溶液） k. 磷酸氢二钠（Sigma S5011 或同等溶液） l. 甘油（Sigma G5516 或同等溶液） m.无 DNase/RNase 微量离心管，不粘连、低吸附、硅化 0.5 ml（Life Technologies AM12350 或同等产品） n. 无 DNase/RNase 微量离心管 1.5 ml，不粘连、低吸附、硅化（Life Technologies AM12450 或同等产品） o. 无 DNase/RNase 微量离心管 2.0 ml，不粘连、低吸附、硅化（Life Technologies AM12475 或同等产品） p. 过滤屏障防气溶胶微量移液器吸头，无 DNase/RNase（0.2 – 1000 µl） q. Qiagen QIAamp 病毒 RNA 小量试剂盒（Qiagen 52904） r. Qiagen 收集管（Qiagen 19201） s. OneStep™ PCR 抑制剂去除试剂盒（Zymo Research D6030） t. 2.0 mL 微量离心管，不含 DNase/RNase（USA Scientific 1620-2799 或同等产品） u. OneStep RT-PCR 试剂盒（Qiagen 210210 或 210212） v. Ambion Superase·In RNase 抑制剂（20 单位/µl）；Life Technologies AM2694 (2,500 U) 或 AM2696 (10,000 U) w. Eppendorf DNA LoBind Tubes 5.0 mL Fisher Scientific 0030108310 或同等产品 x. 15 ml 聚丙烯锥形管（Fisher Scientific 14-959-70C 或同等产品） y. 50 mM MgCl 2（BioRad 1708872 或同等产品）或 25 mM MgCl 2（ThermoFisher Scientific AB0359 或同等产品）z.内部对照 RNA（BioGX 目录号 750-0001 - 联系公司）aa. 所有 RTqPCR 检测的标准脱盐引物和 HPLC 探针（Integrated DNA Technologies 或同等公司）bb. RT-qPCR 阳性对照（甲型流感病毒的定量基因组 RNA