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ADCC生物测定效应细胞，传播模型
抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）是一种抗体作用机理，通过该抗体，病毒感染或其他疾病的细胞针对细胞介导的免疫系统（例如天然杀伤细胞）的成分来破坏。ADCC报告基因生物测定是一种生物发光的记者测定，用于在ADCC作用机理（MOA）测定中量化通过治疗抗体药物在途径激活途径激活的生物学活性。可以使用ADCC生物测定效应器单元，传播模型（A – C）（Cat。G7102）进行ADCC记者生物测定，此处描述了该模型，该模型允许在独特的购买协议下进行单元格库和传播。该测定方法结合了一种简单的添加混合阅读格式和优化的协议，以提供较低的可变性和高精度的生物测定。这些性能特征使生物测定法适合在抗体药物研究，开发和制造批次释放中应用。
生物测定生物测量生物学生物测量管理的监管考虑
Bioassay • Uses a monocyte stable cell line • Measures the ability of antibody in activating the cells upon binding to target Y • Activation is measured by secretion of chemokine Z, positively correlates to the antibody concentration • Chemokine Z indicates monocyte activation to macrophage, but does not distinguish M2 vs M1 → the
ADCC 报告基因生物测定，完整试剂盒 (Raji)
抗体依赖性细胞介导细胞毒性 (ADCC) 是抗体的一种作用机制，通过这种机制，病毒感染或其他患病细胞被细胞介导免疫系统的成分（例如自然杀伤细胞）靶向破坏。ADCC 报告生物测定 (a–e) 是一种生物发光报告测定，用于在 ADCC 作用机制 (MOA) 测定中量化治疗性抗体药物对通路激活的生物活性。该测定结合了简单的添加-混合-读取格式、以冷冻、解冻和使用格式提供的效应细胞以及优化的方案，以提供具有低变异性和高准确性的生物测定。此外，生物测定可以在一天内完成。这些性能特征使生物测定适用于抗体药物研究、开发和生产批次放行等应用。 ADCC 报告生物测定试剂盒中提供的解冻即用细胞是在高度受控的条件下生成的，这使得每次运行的测定变化性较低，同时提供了测定试剂的便利，无需每次繁殖和准备细胞。
使用化学发光生物测定法直接免疫检测全局 A-to-I RNA 编辑活性
腺苷到肌苷 (A-to-I) 编辑是一种保守的真核 RNA 修饰，有助于发育、免疫反应和整体细胞功能。RNA 编辑模式在不同细胞和组织类型之间可能存在显著差异，而过度活跃的 A-to-I 特征则表明存在多种疾病，包括癌症和自身免疫性疾病。由于这些差异具有生物学和临床重要性，因此迫切需要有效的方法来测量细胞 RNA 中的整体 A-to-I 编辑水平。当前的标准方法依赖于 RNA-seq 来间接检测编辑位点，这需要大量时间和材料投入以及大量的计算分析。在这里，我们利用核酸内切酶 V (EndoV)（它特异性地与 RNA 中的肌苷结合）来开发基于蛋白质的化学发光生物测定法，以直接分析 A-to-I RNA 编辑活性。我们之前展示了 EndoV 可以在 RNA 测序之前结合并丰富 A-to-I 编辑的转录本，现在我们利用这一活性构建 EndoV 连接免疫吸附测定 (EndoVLISA)，作为一种快速的、基于板的化学发光方法，用于测量细胞 RNA 中的全局 A-to-I 编辑特征。我们首先使用化学合成的寡核苷酸优化和验证我们的测定方法，说明对 RNA 中的肌苷具有高度选择性和灵敏度的检测。然后，我们展示了对处理过的细胞系中肌苷含量的快速检测，证明了与当前标准 RNA 测序方法相当的性能。最后，我们部署了 EndoVLISA 来分析正常和患病人体组织中的差异 A-to-I RNA 编辑特征，说明了我们的平台作为诊断生物测定的实用性。总之，EndoVLISA 方法经济高效、简单易用，并且使用常见的实验室设备，为研究 A-to-I 编辑提供了一种高度可用的新方法。此外，多孔板格式使其成为第一个适用于直接高通量量化 A-to-I 编辑的检测方法，可用于疾病检测和药物开发。
ADCC 生物测定效应细胞，F 变体，繁殖模型
抗体依赖性细胞介导细胞毒性 (ADCC) 是抗体的一种作用机制，通过这种机制，病毒感染或其他患病细胞被细胞介导免疫系统的成分（例如自然杀伤细胞）靶向破坏。ADCC 报告生物测定 F 变体是一种生物发光报告测定，用于量化 ADCC 作用机制 (MOA) 测定中治疗性抗体对通路激活的生物活性。ADCC 报告生物测定 F 变体可以使用此处描述的 ADCC 生物测定效应细胞 F 变体增殖模型 (a–c)（目录号 G9302）进行，该模型允许在独特的购买协议下进行细胞储存和增殖。该测定结合了简单的添加-混合-读取格式和优化的协议，以提供具有低变异性和高准确性的生物测定。这些性能特征使生物测定适合应用于抗体药物研究和开发。
通过分子动力学模拟、虚拟筛选和生物测定评估发现针对 LsrK/HPr 蛋白质-蛋白质相互作用位点的 AI-2 群体感应抑制剂
摘要：群体感应 (QS) 是一种细胞间通讯机制，可调节细菌致病性、生物膜形成和抗生素敏感性。在已鉴定的群体感应中，AI- 2 QS 存在于革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌中，并负责跨物种通讯。最近的研究强调了磷酸转移酶系统 (PTS) 与 AI-2 QS 之间的联系，这种联系与 HPr 和 LsrK 之间的蛋白质-蛋白质相互作用 (PPI) 有关。在这里，我们首先通过分子动力学 (MD) 模拟、虚拟筛选和生物测定评估发现了几种针对 LsrK/HPr PPI 位点的 AI-2 QSI。在购买的 62 种化合物中，八种化合物在基于 LsrK 的测定和 AI-2 QS 干扰测定中表现出显着的抑制作用。表面等离子体共振 (SPR) 分析证实，命中化合物 4171-0375 特异性结合 LsrK-N 蛋白（HPr 结合域，KD = 2.51 × 10 − 5 M ），因此与 LsrK/HPr PPI 位点结合。结构-活性关系 (SAR) 强调了与疏水口袋的疏水相互作用以及与 LsrK 关键残基的氢键或盐桥对于 LsrK/HPr PPI 抑制剂的重要性。这些新的 AI-2 QSI，尤其是 4171-0375，表现出新颖的结构、显著的 LsrK 抑制作用，适合进行结构修饰以寻找更有效的 AI-2 QSI。
基于药物发现的方法确定了新的硝化抑制剂Beeckman，Fabian； Drozdzecki，Andrzej； Knijf，Alexa de； Corrochano-Monsalve，Mar
<根特大学，技术帕克71，9052，根特，比利时B比利时B植物系统生物学中心，Technologiepark 71，9052，Ghent，Belgium C Ghent C Ghent C Ghent C ghent University for Bioassay Development of Bioassay Development and Specant（C-Bios），9052，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VENT，VENT，VENT，VIB，VIB，VIB 9052，根特，比利时E植物生物学与生态学系，巴斯克大学Universe of apdo。 644, Bilbao, E-48080, Spain f Laboratory of Applied Physical Chemistry (ISOFYS), Ghent University, Coupure Links 653, 9000, Ghent, Belgium g Department of Microbiology, RIBES, Radboud University, Heyendaalseweg 135, 6525, AJ, Nijmegen, the Netherlands h VIB Metabolomics Core, Technologiepark 71，9052，根特，比利时I合成，生物库和生物有机化学研究小组（Synbioc），绿色化学技术系，根特大学，政变链接653，9000，比利时根特，<根特大学，技术帕克71，9052，根特，比利时B比利时B植物系统生物学中心，Technologiepark 71，9052，Ghent，Belgium C Ghent C Ghent C Ghent C ghent University for Bioassay Development of Bioassay Development and Specant（C-Bios），9052，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VENT，VENT，VENT，VIB，VIB，VIB 9052，根特，比利时E植物生物学与生态学系，巴斯克大学Universe of apdo。 644, Bilbao, E-48080, Spain f Laboratory of Applied Physical Chemistry (ISOFYS), Ghent University, Coupure Links 653, 9000, Ghent, Belgium g Department of Microbiology, RIBES, Radboud University, Heyendaalseweg 135, 6525, AJ, Nijmegen, the Netherlands h VIB Metabolomics Core, Technologiepark 71，9052，根特，比利时I合成，生物库和生物有机化学研究小组（Synbioc），绿色化学技术系，根特大学，政变链接653，9000，比利时根特，<根特大学，技术帕克71，9052，根特，比利时B比利时B植物系统生物学中心，Technologiepark 71，9052，Ghent，Belgium C Ghent C Ghent C Ghent C ghent University for Bioassay Development of Bioassay Development and Specant（C-Bios），9052，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VENT，VENT，VENT，VIB，VIB，VIB 9052，根特，比利时E植物生物学与生态学系，巴斯克大学Universe of apdo。 644, Bilbao, E-48080, Spain f Laboratory of Applied Physical Chemistry (ISOFYS), Ghent University, Coupure Links 653, 9000, Ghent, Belgium g Department of Microbiology, RIBES, Radboud University, Heyendaalseweg 135, 6525, AJ, Nijmegen, the Netherlands h VIB Metabolomics Core, Technologiepark 71，9052，根特，比利时I合成，生物库和生物有机化学研究小组（Synbioc），绿色化学技术系，根特大学，政变链接653，9000，比利时根特，<根特大学，技术帕克71，9052，根特，比利时B比利时B植物系统生物学中心，Technologiepark 71，9052，Ghent，Belgium C Ghent C Ghent C Ghent C ghent University for Bioassay Development of Bioassay Development and Specant（C-Bios），9052，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VIB，VENT，VENT，VENT，VIB，VIB，VIB 9052，根特，比利时E植物生物学与生态学系，巴斯克大学Universe of apdo。644, Bilbao, E-48080, Spain f Laboratory of Applied Physical Chemistry (ISOFYS), Ghent University, Coupure Links 653, 9000, Ghent, Belgium g Department of Microbiology, RIBES, Radboud University, Heyendaalseweg 135, 6525, AJ, Nijmegen, the Netherlands h VIB Metabolomics Core, Technologiepark 71，9052，根特，比利时I合成，生物库和生物有机化学研究小组（Synbioc），绿色化学技术系，根特大学，政变链接653，9000，比利时根特，
测量治疗抗体的定量测定...
图3。左上角：ADCC生物测定原则的插图。右上：在ADCC生物测定效应子Jurkat细胞系中FcγRIIIIA-F158过表达的流式细胞仪分析（F变体； BPS Bioscience＃60540）。左下：在表达HER2 SKBR-3乳腺癌细胞的情况下，ADCC对抗HER2抗体药物曲妥珠单抗反应。右下：在SKBR-3和FcγRIIIIA-F158/NFAT荧光素酶报告基因jurkat细胞（EC50 = 28.1 ng/ml）的共同培养中，ADCC对增加剂量的曲妥珠单抗的反应。用biorender.com创建的插图。