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姓名名字公司名称标题Cornejo Marcelo 225铁路运营总监Harris Alan 225铁路财务Pitchford Demetrius 225铁路副总裁,销售Rost Benjamin 225铁路运营总监Ziegler Bryan Bryan 225 Rail Bryan 225 Rail CFO CFO Willits Willits Willits Willits Willits Deborah 225 Deborah 225 Rail and Prail Carorder Contric Contring Corpor coledt rail harbard keord lllc lllc lllc lllc lllc ke vin 360 360 llc, Sampay-Bodwin Yvette 4J Energy, LLC Senior Rail Scheduler Hamilton Kyle A&K RAILROAD MATERIALS Sales Estimator PALMERI THOMAS A&K Railroad Materials, Inc. Southern Region Sales Manager Hoben Paul Aberdeen Carolina And Western Railway Director of Business Development Cupp Cody Acutum CEO Murdza Megan Advanced Polymer Coatings Rail Key Account Manager Wessemyer Scott Advanced Polymer Coatings Marketing Manager Necker Robert Advanced Rail Solutions President Hope Michelle Advanced Technology Innovations, Inc. VP Operations Marafino Frank Advanced Technology Innovations, Inc. CEO Herman Reggie AECOM Vice President, Industrial Development Beckberger Tina AITX Chief Commercial Officer Chesser Josh AITX VP, Corp Development Harris Mark AITX Director Mobile Operations Kent John AITX VP Leasing - Southwest Sagehorn Jerry AITX VP LEASING - SOUTH Wingate Kevin AITX VP租赁Massey Carl Akzonobel技术经理铁路北美洲PULGINI AKZONOBEL密钥客户经理 - 北美铁路北美Quero Victoria Akzonobel密钥帐户MGR -RAIL ENGLERT JEFF jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff jeff。
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方法在补充了10%FCS,1%谷歌补充剂(Gibco),100 U/ml青霉素和100μg/ml链霉菌素的IMDM(Gibco)中培养了衍生成近单倍型HAP1细胞的细胞培养。siRNA转染是根据制造商的指南使用Rnaimax(Invitrogen)进行的。在这项研究中使用了以下siRNA:Sinon-targetable(Dharmacon),Sipolg2(地平线,TargetPlus,SmartPool),SIMRPL23(Horizon,Targetplus,TargetPlus,Smartpool)。将所有药物(Aphidicolin,Hu,Olaparib,Rad51i(B02),DNA-PKI(NU74441)和寡霉素A)溶解在DMSO中,并以指示浓度使用。细胞使用具有137CS源的γ提取器(最佳疗法)进行γ辐射。生长测定HAP1细胞以1500个细胞/孔的密度将HAP1细胞铺在96孔板中,并被视为5天。5天后,使用100%甲醇固定细胞,并在室温下使用Crystal Violet染色2H。随后,将晶体紫溶解在10%乙酸中,并使用Biotek Epoch Epoch分光光度计在595 nm处测量强度。使用非线性拟合,sigmoidal,4pl,x是log(浓度),将这些测量值用于棱镜中的IC50计算。在9mm玻璃盖上生长免疫荧光细胞,并在室温下以4%甲醛和0.2%Triton X-100固定10分钟。使用了以下抗体:人类抗克雷斯特(Cortex Biochem,CS1058),兔抗PH3SER10(Campro,#07-081),小鼠抗ERCC6L(PICH)(ABNOVA,ABNOVA,000548421-B01P)。所有初级抗体在4°C的夜间孵育。使用固定缓冲液I(BD生物科学)固定细胞。细胞。二级抗体(分子探针,Invitrogen)和DAPI在室温下孵育2小时。使用延长金(Invitrogen)安装盖玻片。使用具有60倍1.40 Na油目标的Deltavision Deonvolution显微镜(Applied Precision)获取图像。SoftWorx(应用精度),ImageJ,Adobe Photoshop和Illustrator CS6用于处理获得的图像。单倍体插入诱变筛选基因对用APH或HU处理的HAP1细胞的存活至关重要,如先前所述35,使用单倍体插入诱变筛查鉴定。诱变的HAP1细胞是从Brummelkamp实验室获得的。简短地,获得HAP1细胞的诱变如下:在HEK293T细胞中产生了基因陷阱逆转录病毒。每天两次收获逆转录病毒至少三天,并通过离心(使用SW28转子进行2小时,21,000 rpm,4°C,4°C)进行沉淀。在8μg/ml硫酸素硫酸素的存在下,在T175烧瓶中至少连续两天,在8μg/ml硫酸素的存在下,将大约4000万个HAP1细胞通过浓缩基因陷阱病毒的转导而被诱变。在包含10%DMSO和10%FCS的IMDM培养基中冷冻诱变细胞。解冻后,在存在27.5 nm adphidicolin或100μmHu的情况下,将诱变的HAP1细胞转移了10天。传递后,通过胰蛋白酶-EDTA收集细胞,然后进行沉淀。为了最大程度地减少潜在地含有杂合突变的二倍体细胞的混杂,用DAPI染色固定的细胞,以允许使用Astrios Moflo对G1单倍体DNA含量进行分类。将3000万个排序的细胞在56°C下裂解过夜,以使使用DNA迷你试剂盒(QIAGEN)进行基因组DNA分离。插入位点映射基因陷阱插入位点通过LAM-PCR放大,然后进行捕获,ssDNA接头连接和指数放大,并在测序之前使用含有Illumina适配器的引物,如前所述,如前所述35。映射和插入位点的分析以前描述了78。简短地,在对HISEQ 2000或HISEQ 2500(Illumina)进行测序之后,将插入位点映射到人类基因组(H19),允许一个不匹配,并与RefSeq坐标相交,以将插入位点分配给基因。基因区域在相对链上重叠的基因区域没有考虑进行分析,而对于在相同链基因名称上重叠的基因是串联的。对于每种复制和两种药物治疗(APH或HU)基因的必要性都是通过二项式检验确定的。合成致死性。一个基因通过所有Fisher的测试,其p值截止为0.05,效应大小至少为0.12(减法比率wt sense比率 - 复制应力条件感官比率)。
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制定日期:2024 年 12 月 18 日 新的 HCPCS 代码:0020M - ONC CNS ALYS 30000 DNA LOCI 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0439U - CRD CHD DNA ALYS 5 SNP 3 DNA 有效期 = 04/01/2024 期限 = 无 0440U - CRD CHD DNA ALYS 10 SNP 6DNA 有效期 = 04/01/2024 期限 = 无 0441U - NFCT DS BCT FNGL/VIRAL SEMIQ 有效期 = 04/01/2024 期限 = 无 0442U - NFCT DS RESPIR NFCTJ MXA&CRP 有效期 = 04/01/2024 期限 = 无 0443U - NEURFLMNT LT CHN ULTRSENS IA 有效期 = 04/01/2024 期限 = 无 0444U - ONC SLD ORGN NEO TGSAP 361 生效 = 04/01/2024 期限 = 无 0445U - ABETA42 & PTAU181 ECLIA CSF 生效 = 04/01/2024 期限 = 无 0446U - AI DS SLE ALYS 10 细胞因子 生效 = 04/01/2024 期限 = 无 0447U - AI DS SLE ALYS 11 细胞因子 生效 = 04/01/2024 期限 = 无 0448U - ONC LNG&CLN CA DNA QUAL NGS 生效 = 04/01/2024 期限 = 12/31/2024 0449U - CAR SCR SEV INH COND 5 基因 有效期 = 04/01/2024 期限 = 无 0450U - ONC MM LC-MS/MS MONOC P-PRTN 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0451U - ONC MM LC-MS/MS PEP ION QUAN 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0452U - ONC BLDR MTHYL PENK LTE-QMSP 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0453U - ONC CLRCT CA CFDNA QPCR ASY 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0454U - RARE DS ID OPT GENOME MAPG 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0455U - NFCT AGT STI MULT AMP PRB UR 生效 = 07/01/2024 期限 = 无 0456U - AI RA NGS 19 基因 ANTI-CCP 生效 = 07/01/2024 期限 = 12/31/2024 0457U - PFAS 9 CMPND LCMS/MS PLS/SR 生效 = 07/01/2024 期限 = 无 0458U - ONC BRST CA S100 A8&A9 ELISA 生效 = 07/01/2024 期限 = 无 0459U - ABETA42 & TTAU ECLIA CSF 生效 = 07/01/2024 期限 = 无 0460U - ONC WHL BLD/BUCC RTPCR 24GEN 生效 = 07/01/2024 期限 = 无0461U - ONC RXGENOM ALYS RTPCR 24GEN 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0462U - MELATONIN LVL TST SLP STD7/9 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0463U - ONC CRVX MRNA GENXPRSN 14BMK 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0464U - ONC CLRCT SCR QRTSA DNA MRK 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0465U - ONC URTHL CARC DNA QMSP 2GEN 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0466U - CRD CAD DNA GWAS 564856 SNP 有效期 = 07/01/2024 期限= 无 0467U - ONC BLDR DNA NGS 60GEN&ANEUP 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0468U - HEP NASH MIR34A5P A2M YKL40 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0469U - RARE DS WHL GEN SEQ FTL SAMP 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0470U - ONC OROP DETCJ MRD 8 DNA HPV 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0471U - ONC CLRC CA 35 VRN KRAS&NRAS 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0472U - CA VI PSP&SP1 ANTB SJOGREN 有效期 = 07/01/2024 期限 = 无 0473U - ONC SLD TUM BLD/SLV 648 基因 有效 = 07/01/2024 期限 = 无 0474U - HERED PAN CA GSAP 88GENE NGS 有效 = 07/01/2024 期限 = 无 0475U - HERED PRST8 CA GSAP 23 基因 有效 = 07/01/2024 期限 = 无 0476U - RX METAB PSYC 14GEN&CYP2D6 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0477U - RX METAB PSY 14&CYP2D6 GN-RX 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0478U - ONC NSCLC DNA&RNA DPCR 9GENS 有效期 = 10/01/2024 期限 = 无 0479U - TAU 磷酸化 PTAU217 有效期 = 10/01/2024 期限 = 无 0480U - NFCT DS CSF METAG NGS ALYS 有效期= 10/01/2024 期限 = 无 0481U - IDH1 IDH2&TERT PROMOTER NGS 效果 = 10/01/2024 期限 = 无 0482U - OB PE BIOCHEM ASY SFLT1&PLGF 效果 = 10/01/2024 期限 = 无 0483U - NFCT DS NG GYRA S91F PT MUT 效果 = 10/01/2024 期限 = 无 0484U - NFCT DS MGEN 23S RRNA PT MUT 效果 = 10/01/2024 期限 = 无 0485U - ONC SOL TUM CFDNA&RNA NGS GM 效果 = 10/01/2024 期限 = 无 0486U - ONC PAN SOL TUM NGS CFCTDNA 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0487U - ONC SOL TUM CFCDNA TGSAP 84 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0488U - OB FETAL AG NIPT CFDNA ALYS 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0489U - OB SGNIPT CFDNA SEQ ALYS 1+ 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0490U - ONC CUTAN/UVEAL MLNMA CD146 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0491U - ONC SOL TUM CTC SLCT ER PRTN 有效 = 10/01/2024 期限 = 无 0492U - ONC SOL TUM CTC SLCTN PD-L1 生效 = 10/01/2024 期限 = 无 0493U - TRNSPL MED QUAN DD-CFDNA NGS 生效 = 10/01/2024 期限 = 无 0494U - RBC AG FTL RHD GENE ALYS NGS 生效 = 10/01/2024 期限 = 无 0495U - ONC PRST8 ALYS CRCG PLSM PRT 生效 = 10/01/2024 期限 = 无 0496U - ONC CLRCT CFDNA 8/7 GENES 生效 = 10/01/2024 期限 = 无
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