pic源顶部:带有samtools的核心分析数据的屏幕截图bam文件pic源底部:samtools github页面https://samtools.github.io/hts-specs/samv1.pdf
CRISPR 介导的基因扰动研究的成功高度依赖于 gRNA 的质量,并且已经开发了几种工具来实现最佳的 gRNA 设计。然而,这些工具并不都适用于最新的 CRISPR 模式或核酸酶,也没有提供全面的注释方法或用于高级 CRISPR 应用的可扩展性。在这里,我们介绍了一个新的 R 包生态系统,它能够为多种 CRISPR 技术实现高效的 gRNA 设计和注释,包括 CRISPR 敲除、CRISPR 激活 CRISPR 干扰和 CRISPR 碱基编辑。核心包 crisprDesign 提供了一个全面、用户友好且统一的界面,可通过几种比对方法添加靶向和脱靶注释、丰富的基因和 SNP 注释以及十几个靶向和脱靶活动分数。这些功能适用于任何 RNA 或 DNA 靶向核酸酶,包括 Cas9、Cas12 和 Cas13。我们通过为三个案例研究设计最佳 gRNA 来说明我们工具的普遍适用性:使用碱基编辑器 BE4max 平铺 BRCA1 的 CRISPRbe 库、使用 CasRx 平铺 CD46 和 CD55 的 RNA 靶向库以及使用 CRISPRa 激活 MMP7。我们的 R 软件包套件是开源的,并通过 Bioconductor 项目部署,以方便 CRISPR 社区使用它们。