,我们将使用Axion Maestro Edge Microectrode阵列(MEA)系统(Axion Biosystems,Atlanta,GA)刺激与内皮细胞,肥大细胞和小胶质细胞共同培养的HIPSC衍生神经元后的神经元健康(图。2)与试验键微流体系统(Netri,Lyon,France)结合起来,以创建人体类芯片模型。使用这种人体器官系统,我们将研究触发器的单个或组合的效果,以刺激由RNA-SEQ和酶联免疫吸附测定(ELISA)分析的神经毒性分子的释放(ELISA),该分子(ELISA)专注于炎症,神经元连通性和血管分布(图。2)。由IPSC组成的人类器官已用于研究某些神经系统疾病,也可以用于筛查潜在治疗。
图4。虚拟温室模拟器从易于修改的基于文本的JSON文件中加载模型。上面:光合作用函数phi_phot_c很容易将其更改为0,并立即显示结果(请注意a和b之间的差异)。下面(c):文本格式允许轻松地将公开的模型从文献转换为在Python环境中模拟的工作模型。在这种情况下,来自van Henten的参数列表,2003年生物系统工程的参数列表在已发表的文章(右)和模型(左)中显示。
材料与方法 使用 Lightning-Link 试剂盒 (ab201807, Abcam plc., 英国剑桥) 将 HRP 与白蛋白结合,并通过蛋白质印迹法确定结合是否成功。在 DMEM 中使用 316L 不锈钢和纯镁圆盘进行浸没实验。成像是通过将圆盘从培养基中取出并在空气中干燥圆盘,然后将增强化学发光 (ECL) 底物直接添加到金属表面来进行的。通过使用 Azure 600 (Azure Biosystems Inc., 都柏林 CA) 在表面进行化学发光成像,ECL 和吸附的结合蛋白的反应可以指示吸附的蛋白质量。随后清洗表面以去除剩余的底物并返回浸没溶液以在多个时间点继续研究动态表面。
被动空气(即沉降板)采样是环境监测 (EM) 计划的关键部分。从历史上看,监管指南(如附件 1)概述了使用 90 毫米琼脂板进行药典被动空气采样。虽然这种方法可以有效捕获空气中的污染物,但手动培养这些传统的 90 毫米沉降板会减慢产品发布时间,从而降低其在高通量环境中的效率。附件 1 的最新更新建议使用经过验证的快速微生物学方法 (RMM) 来帮助快速检测环境和产品中的潜在污染物¹。本白皮书总结了 Rapid Micro Biosystems 与罗格斯大学合作进行的一项研究,该研究评估了使用 Growth Direct ® System EM 应用程序作为传统 90 毫米板的替代品。
Agilent Novocyte Quanteon 4025 流式细胞仪 Azure biosystems c600 凝胶成像仪 ThermoFisher QuantStudio3 qPCR 系统 2x ThermoFisher SimpliAmp PCR 系统 Molecular Devices Spectramax Plus 384 UV-Vis 微孔板读数仪 多台离心机 Denovix Nanodrop 和细胞计数器 哺乳动物细胞培养室,配备 3 个 Heracell 160i CO 2 培养箱和 1 个三气 CO 2 /N 2 Tuttnauer 3870 ELV 高压灭菌器 4x -80c 超低温冰柜,配备 24 x 7 监控和发电机备用 各种冰箱、-20 冰柜和 4c 熟食箱 借出的个人实验室设备(天平、加热板、玻璃器皿、pH 计、电泳设备、涡旋器、移液器等) 配备蔡司 Axiocam 202 单色相机的 Olympus IX70 荧光显微镜
利用选择标记鉴定转化植物,并筛选 T-DNA 拷贝数。通过扩增子测序鉴定编辑的 T0 植物(Clement 等人,2019 年;Illumina MiSeq 系统指南,2018 年;Illumina MiSeq 系统指南,2019 年),自交,并通过扩增子测序分析所得的 T1 植物以确认编辑。进行了额外的 PCR 检测,以确认不存在 T-DNA 插入物和质粒骨架(Applied Biosystems 用户公告 #2)。选择包含所需编辑但没有 T-DNA 或质粒骨架的纯合 T1 植物 P227933.30 进行延续,并将其命名为 GM200007。T1 植物不含外来 DNA,在 [ ] 基因中含有纯合缺失。表 1. 用于创建 GM200007 大豆的转化载体 F137620 的遗传元件
实时 TaqMan PCR 及其在兽医学中的应用 Christian M. Leutenegger 加利福尼亚大学医学和流行病学系,美国加利福尼亚州戴维斯 95616。简介 聚合酶链式反应 (PCR) 于 1985 年首次描述,是一种用于检测核酸的高灵敏度和特异性技术 [55]。该技术的发明者因其成就获得了诺贝尔奖 [43,44],该成就彻底改变了研究和诊断的可能性。定性 PCR 是一种成熟且简单的技术,但对样本中存在的特定核酸进行量化是一项艰巨的任务。样品制备、储存或反应过程中可能发生的许多变化阻碍了准确的定量。反应条件中的微小变化也会因 PCR 扩增的指数性质而大大放大。可以通过将特定模板的 PCR 产物量相对于内部参考模板进行标准化来部分克服这些变化。考虑到已发表的数百篇关于定量 PCR 使用的论文,存在各种各样的协议也就不足为奇了。这些方法几乎仅限于研究使用,因为它们有两个共同点:难以执行且运行成本高昂。为满足更快、更准确、更经济且具有高通量能力的系统的需求,三个关键词对于下一代 PCR 系统的开发变得非常重要:自动化、标准化和小型化。通过将计算机辅助 PCR 与激光技术相结合,开发过程得到了加速,因此现在借助所谓的 TaqMan 探针对 PCR 产物进行激光引导检测,以及每个 PCR 循环的荧光数据点的实时积累几乎取代了耗时的后扩增步骤。此外,使用国际标准化的 96 孔微量滴定板格式可以在几个小时内筛选大量样本。TaqMan 原理在 Applied Biosystems (ABI) 棱镜序列检测设备(Applied Biosystems,美国加利福尼亚州福斯特城)中实现,这是目前最先进的技术之一,为进一步开发提供了独特的平台。
资金重点关注植物病理学和植物生物技术研究,以开发和维护可持续的生物系统,实现资源利用,同时考虑到流行病学和进化生物学机制。可持续作物生产方面的研究需求不断增加,例如通过现代育种技术(如基因组编辑)改良作物;使用环保农药(如“生物制剂”)开发新的作物保护方法;使用突破性创新,如使用非编码 RNA 控制植物疾病;引入生物技术方法减少磷酸盐和硝酸盐施肥;以及通过实质性的可持续生产战略提高热带和亚热带地区的作物产量。
总结“泻湖”一词通常被滥用。农民,媒体和公众倾向于称所有土肥盆地盆地泻湖。“泻湖”一词具有特定的含义。asae standards将泻湖定义为“废物处理蓄水池……(其中的肥料)与足够的水混合以提供高度稀释……为主要目的而言……(通过生物学活性减少)污染潜力。治疗泻湖没有在其治疗卷下方绘制……除了维护外。”许多有关液体肥料处理系统的问题:衬里渗漏,意外流动,灾难性的堤防失败,病原体释放,气味排放和泥土盆地的闭合并不是基于泻湖的系统这些问题均由所有流动系统共享。本卷中的其他白皮书涉及这些问题。本文的重点是泻湖的生物治疗潜力。泻湖依靠物理,化学和生物过程来降解肥料。生物过程在退化中起着最大作用。生物群落的生长和维持取决于温度,食物,缺乏有毒元素以及生物在泻湖中保持足够长的生殖能力。微生物群落在泻湖中垂直隔离。每一层在整体治疗过程中执行分离率功能。Lagoons用作流通系统的运行最佳,其机制可定期去除废水。植物营养素的效率低下,2。 气味和氨排放。植物营养素的效率低下,2。气味和氨排放。光合生物在含硫和氮的化合物的降解中起着重要作用,以及浓厚的元素。因此,在泻湖生物学中存在适当的光波长以进行光合作用。废水清除的最常见方法是通过灌溉将植物营养回收到农作物中。局部降雨和蒸发的局部模式(以及孤立的风暴事件产生的降雨量)决定了泻湖是否具有净剩余废水,或者是否必须将水添加到系统中以维持通过泻湖的材料流动。如果要保持动物农业的可行治疗方法,则必须解决两个挑战:1。在泻湖流出物中不能考虑到所有进入泻湖的氮中有80%,并且在污泥中保留了大部分进入泻湖的肥料磷。植物营养素在泻湖废水中的浓缩量低于其他肥料处理产品,尽管泻湖废水比大多数肥料养分来源的氮与可溶磷具有更好的平衡。2道格拉斯·W·汉密尔顿(Douglas W. Hamilton),俄克拉荷马州立大学生物系统和农业工程副教授。3 Babu Fathepure,俄克拉荷马州立大学微生物学和分子遗传学助理教授。4 Charles D. Fulhage,密苏里大学生物学和农业工程教授。 5威廉·克拉克森(William Clarkson),俄克拉荷马州立大学民用与环境工程副教授。 6 Jerald Lalman,俄克拉荷马州立大学生物系统和农业工程助理教授。4 Charles D. Fulhage,密苏里大学生物学和农业工程教授。5威廉·克拉克森(William Clarkson),俄克拉荷马州立大学民用与环境工程副教授。6 Jerald Lalman,俄克拉荷马州立大学生物系统和农业工程助理教授。la-la-la-la-la-lapluent应以氮的基础用于农作物生产,在多个1审查员中灌溉废水:爱荷华州立大学农业和生物系统工程副教授托马斯·格兰维尔(Thomas D. Glanville);爱荷华州立大学农业和生物系统工程副教授Jeffery C. Lorimor;华盛顿特区美国农业部自然资源保护局国家环境工程师Barry L Kintzer;德克萨斯州沃思堡的USDA-NRCS国家水管理中心环境工程师David C. Moffit; Vincent R. Hill,北卡罗来纳大学教堂山分校的环境科学与工程博士研究助理;北卡罗来纳州立大学生物学和农业工程副教授John J. Classen。