设施:PCR 装置-自动热循环仪(Applied biosystems)凝胶文档系统(Biorad)、HPLC – 制备和分析(Shimadzu)、二氧化碳培养箱、蛋白质凝胶电泳系统(Amersham Pharmacia)、色谱柱(Amersham Pharmacia)、冷冻离心机(Heraeus)、分光光度计(Shimadzu 2)、14 升发酵罐 - 全自动(Scigenics)、迷你发酵罐(Eyela Inc. Japan)、伽马计数器(ECI)、相差显微镜(Nikon,日本)、倒置相差显微镜(Olympus CK 40)、冻干机(Yamata Neocool,日本)、电子天平(Mettler)、实时 PCR 应用生物系统)、纳米分光光度计、低温恒温器、-80˚C 深度冷冻机(Thermo、Panasonic、 Eppendorf)、脉冲场凝胶电泳 (PFGE)-Bio-Rad、II 级生物安全柜、步入式冷藏室、多模式平板读数器、荧光细胞分选器- FAC、带照相机附件和其他配件的倒置显微镜、荧光显微镜、植物组织培养设施、动物细胞培养设施、斑马鱼设施、秀丽隐杆线虫设施、小动物设施。
细胞外囊泡(EV)被人体的不同细胞分泌,并被认为是细胞间通信中的重要参与者。它们的生物学功能源于转移货物分子的能力,包括膜和胞质蛋白,脂质,核酸和代谢产物。evs,例如外泌体,更具体地说是干细胞衍生的外泌体,因为它们在各种疾病模型中作为无细胞诊断和治疗剂的潜在作用,包括皮肤,神经系统,心脏,肝脏和肾脏。搅拌坦克生物反应器是确保可靠,可再现和可扩展的细胞培养过程的强大工具,以满足干细胞对细胞和基因治疗应用的不断增长的需求。在这里,我们通过将生物反应器的参数控制与高速和超速离心的性能相结合,描述了从人脂肪衍生的干细胞(HADSC)的快速隔离工作流程。首先将细胞在DASBOX®迷你生物反应器系统中培养,然后通过高速离心机CR22N和Ultratifuge CP100NX的组合将分泌的电动汽车分离。使用这种方法,我们能够实现大量的纯净,完整的细胞外囊泡。
评估了以下制造商的两个不同的96孔PCR板块(每批3板):Eppendorf(Twin.tec®PCR板),供应商“ 4T”和供应商“ AR”。每个PCR板的48孔中有100 µL的棋盘图案中的超纯水。将板用eppendorf热密封膜密封,并在500 x g处离心1分钟,然后在96°C下放入Mastercycler®X50s 40分钟。此外,将板混合(EppendorfMixmate®,RT和1200 rpm的10分钟)和离心(Eppendorf离心机5920 R,RT时1分钟,500 x g)。随后将90 µL的等分试样从每个井转移到UV-VIS,96/F微板,以测量微孔板分光光度计(Xmark™,Bio-Rad®)上的吸光度。测量了从220 nm到400 nm的吸光度波长光谱。未孵育的水用于设置空白值。在260 nm处的吸光度和50μg/mL的因子用于计算每个样品中源自UV浸泡的可刺激物的假DNA浓度。
摘要:近年来,机器人技术在各个制造业中都经历了重大的发展和广泛的应用。这一进步是由人工智能和计算机视觉等技术中突破的整合所驱动的,从而使机器人在执行特定任务时变得更加聪明和适应。因此,将机器人纳入人类生产和研究活动的需求得到了加速。具体来说,在化学相关的行业中,减少或避免与化学物质的直接接触对于确保表演者的安全至关重要。在实验室环境中,已经出现了自动化任务,例如使用机器人臂的化学管布置,以提高安全性并节省研究人员的时间。以这个概念为基础,本文提出了一个机器人系统,该系统是将离心管排成托盘的实验室助理。该系统由一个5度自由的机器人组,反应堆X-150,以及深度摄像头D435和计算机视觉模型Yolov8组成。通过从Yolov8收集图像识别信息并将其与深度摄像头数据结合进行分析,系统确定管子的位置和方向,然后将其传输到机器人以进行布置过程。这种综合方法旨在提高处理离心实验的安全性。
摘要目的:我们正在进行的研究旨在建立一种经过验证的方法,用于测量使用UPLC MS/MS的等离子体中的Empagliflozin。材料和方法:钠葡萄糖CO转运蛋白抑制剂(SGLTI),一种新型的糖尿病药物。非胰岛素依赖性糖尿病和成年糖尿病是2型糖尿病的先前名称。empagliflozin是第一个SGLT2抑制剂一种药物,它降低了心血管风险2型糖尿病和先前存在的心血管疾病的风险。empagliflozin D4作为内部溶液(IS)。液态萃取用于在Synergi上分离2.5µ融合 - 反向相100A(100 mm×2.0 mm),2.5 µm色谱柱。甲醇的混合物:作为流动相,使用75:25体积比的0.2%甲酸。流速设置为0.3µL/min。校准曲线是线性和绘制的。结果:开发的方法是从人血浆溶液中确定雌激素的准确,精确,灵敏的方法。HPLC级中乙酸乙酸乙酯和水是雌激素的首选溶剂。用离心机和LV氮蒸发剂用乙酸乙酯和水进行LLE提取。乙酸乙酯用作非极性溶剂,水用作极性溶剂进行液体液体提取。lle是一个低成本提取过程,与固体液体提取相比。报告的方法适用于生物等效性和药代动力学研究。
将柱子转移到新的 DNA 和/或 RNA 洗脱管(已提供)中。向膜柱中心添加 100 μL 无 RNAse 的水,等待 1 分钟,然后以最大速度离心 1 分钟。RNA/DNA 样本现在可以用于下游应用了。注意:用 100 μL 无 RNAse 的水洗脱将最大程度地提高核酸的产量。为了获得更浓缩的样品,至少可以使用 50 μL 无 RNAse 的水。注意:样品的核酸浓度是通过其在 260 nm 下的紫外吸光度计算的,其中吸光度 1(1 cm 光程长度)相当于 50 μL DNA/mL。RNA、蛋白质、盐、乙醇、腐殖酸或其他非核酸污染物的污染会导致 260 nm 下的总吸收,因此导致对真实 DNA 浓度的估计过高。使用紫外光谱法测量时,A260/A280 比率在 1.80–1.90 之间且 A260/A230 >1.8 表示纯 DNA。A260/A280 和 A260/230 比率高于 2.0 表示 RNA 污染。相反,A260/A280 比率低于 1.8 表示蛋白质污染。此外,较低的 A260/A230 比率表示存在腐殖酸以及蛋白质、糖类、乙醇、盐和其他可能抑制后续酶促反应的污染物。
在动物和细胞培养中的应用 1. 项目描述:将使用针对 [插入物种] 的 CRISPR 来灭活 [插入基因],以创建 [插入疾病] 的模型。包括 CRISPR 的剂量:病毒载体、质粒、脂质体等。 2. 基因沉默的形式:您是尝试随机还是特定的基因沉默?沉默是一步到位(Crispr/Cas9 和 gRNA 结合在一个载体中)还是两步到位(创建含有 Crispr/Cas9 的细胞系,然后添加 gRNA)或购买含有 CRISPR-Cas9 的预转染细胞系,然后转染 RNA 指导序列? 3. 遏制要求:通常所有涉及非病毒剂量的活动都采用 BSL-1 和化学卫生规范、遏制设备和设施。对于病毒载体 CRISPR,建议采用包括生物安全柜在内的 BSL-2 规范。离心机安全预防措施,用于培养箱和 BSC 之间运输的二级容器。不要用手触摸眼睛、鼻子和嘴巴,以避免粘膜暴露;护目镜或面罩可能有助于实现这一目标。4. CRISPR 注射给药注意事项:应尽量减少使用锐器。强烈建议在动物给药期间使用安全锐器技术。5. 泄漏:如果非病毒载体,请按照化学卫生计划进行清理。如果病毒载体,请遵循 BSL-2 泄漏说明。6. 生物危害废物:收集在双层红色袋子中并在硬质容器中运输。7. 批准的消毒剂:
简介:人们对民航中的加速度 (G) 效应持续关注,因为 G 引起的意识丧失 (G-LOC)、意识受损和视觉效应在特技飞行、农业和军事航空事故中起着一定作用。方法:开发了一种软件模型(民航医学研究所 G 效应模型 [CGEM]),该模型基于与飞行中组织补给相关的物理和生理变量,使用氧气流量作为补给可用性的代理,以评估飞行员 G-LOC 和相关现象的风险。使用多个参数对飞行员进行建模,包括性别、心血管健康和其他常见的修饰符,例如 G 服、正压呼吸装置、抗 G 拉伤和其他肌肉紧张。通过与同行评审文献中的实验数据进行比较,验证了该软件的有效性。结果:CGEM 准确预测了 Gz 暴露的生理效应,尤其是对于快速发作率。预测的 G-LOC 时间和绝对失能时间始终在利用美国海军和美国空军飞行员进行的离心机实验中获得的汇总结果的一个标准差范围内。基于视觉效应开始的 G 耐受性预测也与已发布的数据相符,对困难特技机动期间预期症状的评估也是如此。讨论:CGEM 是民用和军用航空的新工具。通过正确选择参数,飞行外科医生、飞行员和事故调查员可以深入了解疲劳、药物、脱水和抗 G 对策等因素导致的风险变化,而不是提供简单的 G 耐受性数字。
液体聚合物罗杰斯(RWU)的罗杰斯(RWU),阿肯色州正在邀请来自合格竞标者的密封竞标,以提供液体聚合物,用于在现场离心机中用于脱水。可以在任何时候从RWU网站https://www.rwu.org/developers-and-contractors/bids-contracts或通过电子邮件通过电子邮件通过电子邮件toddbeaver@rwu.org获取出价(IFB)和投标数据包的副本。需要预先资格。可能会上交,直到2025年2月18日(星期二)下午2:00,竞标将在下午2:30在PCF的会议室大声朗读,并在下午2:30大声朗读。 2月18日的当地时间。没有计划会议。For a copy of the IFB and bid packet or more information, contact: Todd Beaver Plant Manager 4300 S Rainbow Rd Rogers, AR 72758 479-273-7378 Email- toddbeaver@rwu.org RWU reserves the right to reject any and all bids, to accept any bid or bid alternate deemed to be in the best interest of RWU, to waive any IFB或任何其他形式的技术,形式和/或非正式性,并放弃收到的投标中的任何非正式或违规行为,而这种接受,拒绝或豁免被认为符合RWU的最大利益。rwu保留接受从所有考虑中似乎符合RWU的最大利益的出价的权利。rwu可能会拒绝RWU在合理的询问或评估后发现的任何出价者的出价,而不承担任何责任。rwu应成为确定这些事项的唯一法官。rwu保留取消此出价程序和/或扣留法律允许的投标的权利。根据此出价程序的实际合同的实际裁决取决于罗杰斯水厂和下水道委员会的批准。该出版物是由罗杰斯水电工具支付的。
富含血小板的血浆,也称为“ PRP”,是一种治疗方法,通过该治疗,一个人的血液被用作刺激组织再生的生长因子和细胞因子(信号蛋白)的来源。研究科学家在富含血小板的血浆中发现了一组称为非常小的胚胎(VSEL)干细胞的干细胞的存在。建议以与胚胎干细胞相同的方式,VSEL干细胞是“组织形成”干细胞,因此理论上能够使任何不同的组织和人体的任何不同的组织和细胞。在循环血液中发现了VSEL干细胞,但在正常情况下它们似乎在生物学上是无活跃的。人们认为,VSEL干细胞可能是活跃于发育中的胎儿的生物学发展的残余,但在出生后不久和人类的余生就变得不活跃。研究指出,分离这些VSEL干细胞的最佳和最简单方法是从静脉收集外周血并在离心机中处理血液,以产生一小部分血液富含血小板的血浆(PRP)。PRP馏分已知不仅包含大量的血小板,各种不同的生长因子和细胞因子,还包含VSEL干细胞。研究人员报告说,VSEL干细胞在生物学上似乎是无活跃的。研究医生Todd Ovokaitys博士报告说,可以通过应用调制红外相干激光来激活VSEL干细胞。将活化的VSEL干细胞返回到通过注射到特定解剖部位收获血液的个体时,例如,膝关节或重新注入静脉,起着个体活性干细胞的作用。