收获细胞、清洗细胞并将其与活化的 ConA 珠子结合。高质量的样品制备对于 CUT&RUN 工作流程至关重要。请注意,建议对某些样品类型(冷冻细胞、细胞核、粘附细胞、组织)进行修改,可在 support.epicypher.com 上找到。该方案包括在初始细胞收获、清洗步骤后以及 ConA 珠子结合后确认样品质量的详细步骤。避免珠子在检测过程中变干和结块,这会导致样品损失并降低 CUT&RUN 产量。
将 K-MetStat Panel 加入指定用于 H3K4me3、H3K27me3 和 IgG 对照抗体的反应中。如果使用 500,000 个细胞/反应,则添加 2 µL。对于较低的细胞数,请按照手册说明减少 K-MetStat Panel。轻轻涡旋试管以混合并快速旋转。
宫颈癌风险水平。指标包括: o 性接触的平均年龄 o 青少年怀孕率 o 一生中性伴侣的平均数量 o 过去 12 个月的性传播感染患病率 o 男性包皮环切率和 HIV 患病率。 冷链容量充足性 Penta3 管理和调查覆盖率(NDHS,2018 年)
Prat MD, MD,C Sara MD,S腿MD,肿瘤学,西班牙,M Munoz,M Vidal,B Adamo);治疗学院(IDIBAPS) Adamo,B Story MD,F Schettini);医学系意大利,意大利,P教授P Count MD); IRCC的包含医学2, Lineberger Gonzalez-Farré和Sanfeliu);肿瘤学诊所,部门
非常适合较小的空间,Multidesk为您带来了多功能器的所有好处,转变为多功能桌子,以便您可以在舒适的工作和最大化空间时保持井井有条。通过添加层压板或胶合板桌面来提升现有的29系列多辅助器 *,并根据需要从钢发夹或木腿中进行选择。或购买桌面供两个多辅助器,以将您现有的存储空间改造成时尚时尚的工作台。
靶标下切割和标记 (CUT&Tag) 是一种突破性的表观基因组图谱策略,它以之前的免疫束缚技术 CUT&RUN 和 ChIC 1-6 为基础。在 CUTANA ™ CUT&Tag 中,细胞核被固定在固体支持物上,抗体原位结合其染色质靶标。蛋白 A 和 G 与原核转座酶 5 (pAG-Tn5) 的融合用于选择性切割和标记抗体结合的染色质,并带有测序接头 (图 1)。使用 EpiCypher 独有的单管 (“直接 PCR”) 方法直接对标记片段进行 PCR 扩增,得到可测序的 DNA 6,7。
地方发展中心(CEDEL)和文化和土著研究中心(CIRIR),Villarrica Campus,Pontifical catulica cat的Villarrica校园农业与森林科学学院生态系统与环境系野生动植物实验室,宗教大学cat cat g olima de Chile,Avda。vicu〜na Mackenna 4860,Macul,Macul,大都会地区,智利C角国际全球变化研究与生物文化保护和生物文化保护中心(CHIC),De Magallanes大学和应用生态与可持续性中心(CAPES)智利D国家奥杜邦学会,奥杜邦美洲,伯纳多或希金斯501,维拉里卡,阿劳卡尼亚地区,智利
CUT&RUN 方法 CUT&RUN 使用 CUTANA™ChIC/CUT&RUN 试剂盒进行,起始于 500k K562 细胞,含 0.5 µg IgG(EpiCypher 13-0042)、H3K4me3(EpiCypher 13-0060)、H3K27me3(EpiCypher 13-0055)或 0.125 µg CTCF(EpiCypher 13-2014)抗体,一式两份。使用 CUTANA™CUT&RUN 文库制备试剂盒(EpiCypher 14-1001/14-1002)以 5 ng DNA(或回收总量,如果少于 5 ng)进行文库制备。文库在 Illumina NextSeq2000 上运行,采用双端测序(2x50 bp)。样本测序深度为 5.5/18.8 百万个读数 (IgG Rep 1/Rep 2)、14.2/17.0 百万个读数 (H3K4me3 Rep 1/Rep 2)、24.7/18.1 百万个读数 (H3K27me3 Rep 1/Rep 2) 和 8.6/5.5 百万个读数 (CTCF Rep 1/Rep 2)。使用 Bowtie2 将数据与 T2T-CHM13v2.0 基因组比对。过滤数据以删除重复、多比对读数和 ENCODE DAC 排除列表区域。