XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemCLONE
汇集蛋白质标记、细胞成像和原位测序，用于实时监测药物作用
蛋白质的水平和亚细胞定位调节着许多细胞过程的关键方面，并可成为治疗干预的目标。然而，目前还没有高通量方法来发现通过在区室之间穿梭、结合更大的复合物或定位到不同的无膜细胞器而改变定位的蛋白质。在这里，我们描述了一种可扩展的策略来表征不同扰动对蛋白质定位和水平的影响。我们使用基于 CRISPR-Cas9 的内含子标记来生成从内源启动子表达数百种 GFP 融合蛋白的细胞池，并通过延时显微镜监测定位变化，然后使用原位测序进行克隆识别。我们表明，这种策略可以表征细胞对药物治疗的反应，从而识别非经典效应，如蛋白质 - 蛋白质相互作用的调节、凝聚物形成和化学降解。
使用 CRISPR 试剂对人类 B 细胞系进行电穿孔
图 1. 最佳条件基于细胞存活率和靶向敲除率。根据上述方案，每次电穿孔用含有靶向人 CD19 的 crRNA 的 RNP（从针对不同 B 细胞系中细胞内和细胞外标志物的 30 多种 crRNA 筛选中选择）转染 100 万个 Ramos 细胞。（A）电穿孔后的第二天，用 2.5 μg/mL 碘化丙啶（BioLegend，产品目录号 421301）对部分细胞染色，并通过流式细胞术进行分析。（B）电穿孔五天后，用 2.5 μg/mL Alexa Fluor ® 647 抗人 CD19（BioLegend，产品目录号 302220，克隆 HIB19）加碘化丙啶对部分细胞染色，并通过流式细胞术进行分析。对照 = 未经电穿孔的细胞：RNP 混合物。数据由德国弗莱堡大学的 Marco Cavallari 博士提供。
IEEE 论文 Word 模板（美国信函页面大小）（V3）
摘要 — 提出了将认知毫米波双光束 (DB) MIMO 相控阵系统与光学传感解决方案相结合的方法，旨在实现环境感知和无处不在的交互的新功能。由此产生的范例利用毫米波和光学传感解决方案的融合，使新兴技术能够促进人类与随机变化环境中的智能设备和系统的交互。通过基于混合认知毫米波 RFIC 技术和光学系统的无处不在的交互，描绘了具有高级驾驶辅助系统 (ADAS)（包括手势识别 (GR)）的自动驾驶汽车的前景。构建了几种毫米波相控阵的硬件实现，并将其与光学系统共同组装，以实现智能数据融合和实时信号处理，从而实现自主安全的决策过程。提出了一种统一的建模和测量平台，采用多物理（电磁热机械）数值协同仿真克隆（NCSC）的概念，作为功能硬件的对应部分，实现增强现实的 4D（时空演化）。
电子商务安全问题和人工智能的作用
网络钓鱼是攻击者获取用户登录凭据并从用户身上造成经济损失的常用技术之一。鱼叉式钓鱼、克隆钓鱼和捕鲸是常见的钓鱼类型。一些常用技术（例如双因素身份验证、基于电子邮件过滤（使用机器学习）的方法）适用于预防此类威胁。3. 窃听：未经授权的用户攻击私人通信网络。通常，电话线、电子邮件、蜂窝网络是此类攻击的目标实体。在这种情况下，消息中的小数据包是目标。防止这种情况的方法是使用 HTTPS 而不是 http。4. 信用卡欺诈：通过在电子商务交易过程中引入多个入侵点，攻击者可以获得用户凭据。这可以在 ATM 取款或在线交易期间完成。基于机器学习的监督和无监督学习算法可用于检测欺诈交易。
hiPSC 中的敲除/SNP 敲入方案
基因工程将细胞置于选择压力之下，需要几轮细胞倍增才能获得编辑后的克隆。因此，为避免基因组不稳定性积累，我们建议使用解冻后 2-3 次传代的细胞，尽可能接近质量测试过的细胞库。我们还建议在缺氧条件下（37 C/5% CO 2 /5% O 2 ）维护 hiPSC 并进行基因编辑实验，因为在缺氧条件下培养 hiPSC 有几个优点，包括增强多能性、增加增殖、减少氧化应激、提高重编程效率、更好的分化潜力和低遗传不稳定性频率。2、3 这些好处可以提高 hiPSC 的质量和功能，这对于再生医学和疾病建模中的下游应用至关重要。Vallone 等人描述了描述板涂层、细胞维护以及酶促和非酶促解离的一般方案。4
单细胞中汇总的基因组尺度CRISPR屏幕
将功能分配给基因并学习如何控制其表达是细胞生物学和治疗发育的基础的一部分。遗传筛查是一种有效且公正的方法，它在历史上需要艰苦的克隆产生和表型，并且仍然受到当今规模的限制。使用CRISPR-CAS调节基因功能并在单个细胞中测量它的快速技术进步已经重新获得了主要的实验约束，并启用了通过单个细胞的复杂读数进行汇总的筛选。在这里，我们回顾了汇总单细胞CRISPR筛查的原理和实践考虑因素。我们讨论了扰动策略，实验模型系统，与单个单元格的概述，读取细胞表型和数据分析。我们的重点是单细胞RNA测序和基于细胞分类的读取，包括启用图像的细胞分类。我们期望这种变革性的方法可以在接下来的几十年中推动生物医学研究。
案例报告和文献评论
早期T细胞前体急性淋巴细胞白血病（ETP-ALL）是T细胞急性淋巴细胞白血病（T-ALL）的不常见亚型，占儿童的大约10-13％的T-ALL病例，成人为5-10％。一名55岁的女性患者没有大量病史，由于贫血和整体健康状况恶化，在内科医学部门住院。临床检查未显示任何肿瘤综合征。进行了全血数，显示了白细胞增多症的正常细胞差异性贫血。脊髓造影揭示了80％的爆炸骨髓侵袭。免疫表型揭示了存在特定免疫表型的骨髓元素的74％的T淋巴样性质的存在。因此，将ETP的诊断保留。进行了核型，显示存在数量和结构上具有克隆异常的次素克隆的存在。将患者放入超vad方案（环磷酰胺，阿霉素，长春新碱，地塞米松）。诱导结束时的脊髓造影显示出45％的爆炸存在。
鲍曼不动杆菌对 d-甘露糖敏感的菌毛与生物膜形成和粘附在呼吸道上皮细胞上有关
摘要背景/目的：鲍曼不动杆菌是一种重要的院内病原体。为了更好地了解鲍曼不动杆菌 CsuA/BABCDE 菌毛在毒力中的作用，进行了细菌生物膜形成、粘附和碳水化合物介导的抑制研究。方法：克隆鲍曼不动杆菌 ATCC17978 的 CsuA/BABCDE 菌毛产生操纵子（简称 Csu 菌毛），以分析非生物塑料平板上的生物膜形成、细菌对呼吸道上皮人 A549 细胞的粘附和碳水化合物介导的抑制。用于抑制生物膜形成和对 A549 细胞粘附的碳水化合物包括单糖、吡喃糖苷和甘露糖聚合物。结果：将鲍曼不动杆菌ATCC17978的Csu菌毛克隆表达到不产生菌毛的大肠杆菌JM109中，并将其敲除。在电镜和原子力显微镜下观察大肠杆菌JM109/rCsu菌毛产生克隆上重组Csu（rCsu）菌毛丰富，而Csu敲除的鲍曼不动杆菌ATCC17978
全球实验室制造质粒中错误的流行率
质粒在生命科学研究和治疗学开发中是必不可少的。目前，大多数实验室定制其质粒。到目前为止，尚无有关实验室制造质粒质量的系统数据。在这里，我们报告了全球数百个学术和工业实验室的质粒的广泛调查。我们表明其中几乎一半包含设计和/或序列错误。用于制造AAV载体的转移质粒，该质粒广泛用于基因治疗中，由于其固有的不稳定性，ITR区域中约有40％的突变，这受到GC含量侧翼的影响。，由于其毒性，我们还列出了难以克隆质粒或包装中的基因。我们的发现引起了人们对实验室制造的质粒的可信度的严重关注，这与以前报道的未被低估的支原体污染和错误识别的哺乳动物细胞系相同，并突出了社区广泛的标准，以维护这项在研究和医学中这种普遍于这种普遍剂量的质量。
语音综合的轻巧语言模型
大规模自回归文本到语音（TTS）模型可以产生与人类言语几乎没有区别的语音。但是，由于记忆和计算限制，培训大语言模型（LLMS）具有挑战性。本文描述了我们2024对话语音克隆挑战（COVOC）的TTS方法。我们的方法通过扩展中文拼音词汇并减少仅解码器式变压器体系结构中的层数来修改劳拉格模型，以综合中文和英语文本。尽管使用了最少的训练数据，但在主观和某些客观评估中，我们的方法和其他受约束系统之间的性能差距相对较小。本文讨论了我们试图训练轻量级LLM的零拍摄TTS的尝试，并分析了导致低性能的因素。我们的音频样本可以在线访问1。索引术语：文本到语音，语音识别，人类计算机互动，计算副语言学