摘要:乳酸细菌(LAB)共享并对人类健康提供了几种有益的影响,例如生物活性代谢产物的释放,病原体竞争和免疫刺激。益生菌微生物的两个主要储层是人类胃肠道和发酵乳制品。但是,由于其较大的分布和营养价值,其他来源(例如植物性食品)代表了重要的替代品。在这里,通过体外和体内方法研究了自plastiblantibacillus plantarum plantarum plantarum plantarum plantarum plantarum plantarum partarum plantarum plantarum plantarum plantarum planarum plantarum plantarum Pfa2018au,它是从富西诺高地(Fucino Highland)(意大利)(意大利)收获的胡萝卜中分离出来的。菌株被送往意大利的iStituto Zoopro fintico sperimentale della lombardia emilia romagna,目的是根据《布达佩斯条约》下的专利程序。在体外模拟的胃肠道条件下,分离株显示出很高的生存能力,抗生素易感性,疏水性,聚集以及抑制肠道肠内鼠伤寒沙门氏菌的体外生长的能力Caenorhabditis秀丽隐杆线虫被用作体内模型,以分析促进性和抗衰老效应。L. plantarum pfa2018au显着殖民了蠕虫的肠道,延长了其寿命并刺激了他们的先天免疫力。总体而言,这些结果表明,来自蔬菜的自毒实验室(例如胡萝卜)具有可以视为新型益生菌候选物的功能特征。
肿瘤抑制剂BRCA1-BARD1复合物调节许多细胞过程。对其肿瘤抑制功能的批评是其在基因组完整性中的作用。尽管环E3泛素连接酶活性是复合物的唯一已知酶促活性,但对BRCA1-BARD1 E3泛素连接酶活性的体内需求一直存在争议。在这里,我们使用C探索Brca1-bard1 E3泛素连接酶活性的作用。elesgans。遗传,细胞生物学和生化分析E3连接酶活性有缺陷的突变体表明,在DNA损伤修复和减数分裂的背景下,Complex的E3连接酶依赖性和独立功能既存在。我们表明,E3连接酶活性对于复合物的核积累至关重要,特别是集中在减数分裂重组位点,而在增殖生殖细胞中的DNA损伤位点不重要。虽然仅BRCA1才能进行单位素化,但BRCA1需要Bard1来促进聚氨基化。我们发现,通过推动BRCA1的核积累和自我关联,可以部分缓解E3连接酶活性和BARD1在DNA损伤信号传导和修复中的需求。我们的数据表明,除了E3连接酶活性外,BRCA1还可以在DNA损伤信号传导和修复中起结构作用,而BARD1在增强BRCA1功能方面发挥了可观的作用。
秀丽隐杆线虫的内胚层特征化通过一个网络进行,在该网络中,母系提供的 SKN-1/Nrf 和来自 POP-1/TCF 的额外输入激活了 GATA 因子级联 MED- 1,2 → END-1,3 → ELT-2,7。MED、END 和 ELT-7 因子的直系同源物只存在于与秀丽隐杆线虫密切相关的线虫中,这引出了一个问题:在该属中较远的物种中,在没有这些因子的情况下,肠道是如何特征化的。我们发现 GATA 因子基因 elt-3 的 C. angaria、C. portoensis 和 C. monodelphis 直系同源物在早期 E 谱系中表达,刚好早于它们的 elt-2 直系同源物。在 C. angaria 中,Can-pop-1(RNAi)、Can-elt-3(RNAi) 和 Can-elt-3 无效突变导致渗透性“无肠”表型。Can-pop-1 是 Can-elt-3 激活所必需的,表明它作用于上游。在 C. elegans 中强制早期 E 谱系表达 Can-elt-3 可以指导 Can-elt-2 转基因的表达并拯救 elt-7 end-1 end-3; elt-2 四重突变菌株的生存能力。我们的研究结果表明,隐杆线虫肠道特化和分化的祖先机制涉及更简单的 POP-1 → ELT-3 → ELT-2 基因网络。
生长素诱导降解 (AID) 系统最初由 Dernburg 实验室引入秀丽隐杆线虫,现已成为研究基因功能的组织特异性和/或时间方面的一种广泛使用的方法(Zhang 等人,2015 年;Ashley 等人,2020 年;Martinez 等人,2020 年)。AID 系统利用植物来源的 E3 泛素连接酶 TIR1,在用植物生长激素生长素处理后特异性地降解与“降解决定子”标签融合的蛋白质。为了提高 AID 系统的实用性,Ward 实验室最近生成了一组扩展的 TIR1s 转基因,由不同的组织特异性启动子控制(Ashley 等人,2020 年)。在这里,我们旨在比较不同种系表达的 TIR1 转基因降解转录因子 LAG-1 的效率,该转录因子的 C 端带有降解决定子 (Chen et al. , 2020)。如图 1 所示,这些 TIR1 转基因由以下启动子驱动:gld-1p (Zhang et al. 2015)、mex-5p (Ashley et al. 2020)、sun-1p (Ashley et al. 2020) 和 pie-1p (Kasimatis et al. 2018),并含有所示的 C 端荧光蛋白和 3' 非翻译区 (图 1A)。
过去 20 年中,对秀丽隐杆线虫自然多样性的研究已经证明了数量遗传方法在揭示形成性状的进化、生态和遗传因素方面的强大功能。这些研究补充了适合实验室使用的 N2 菌株,并使仅使用一种遗传背景无法实现的额外发现成为可能。在本章中,我们将描述如何对秀丽隐杆线虫进行数量遗传学研究,重点是秀丽隐杆线虫。这些方法利用遗传多样化个体种群中基因型和表型之间的相关性来发现表型变异的遗传原因。我们介绍了使用连锁、近等基因系、关联和批量分离作图的方法,并描述了每种方法的优缺点。秀丽隐杆线虫数量遗传图谱的强大功能最能体现在将表型差异与特定基因和变异联系起来的能力上。我们将介绍将基因组区域缩小到候选基因的方法,然后通过测试确定与数量性状有关的基因或变异。秀丽隐杆线虫成为卓越实验模型动物的相同特征也使其作为理解自然表型变异的工具具有非凡的价值。
改进的基因组工程方法可以使大型和精确的编辑自动化对于系统研究基因组功能至关重要。我们将Peel-1负选择适用于秀丽隐杆线虫中CRISPR-CAS9基因组工程的优化双标志物选择(DMS)盒式方案,并观察到多种效率测量的强大提高,这些效率均一致,这些效率是一致的。使用Peel-1-DMS选择杀死了具有转基因的动物,这些动物具有转基因,并保留了基因组编辑的整合体,通常会规避视觉筛查以识别基因组编辑的动物。为了证明该方法的适用性,我们会在推定的蛋白酶体亚基PBS-1和未表征的基因K04F10中删除等位基因。3并使用机器视觉自动表征其表型促进,从而揭示了纯合基本和杂合行为表型。这些结果为快速产生和表型基因组编辑的动物提供了强大而可扩展的方法,而无需通过眼睛进行筛查或评分。
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可,根据 未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是 由 此预印本的版权持有者(此版本于 2020 年 5 月 27 日发布。 ; https://doi.org/10.1101/2020.05.26.117390 doi: bioRxiv preprint
发育基因调控网络 (GRN) 是后生动物胚胎发生的基础,经历了重大修改,形成了当今地球上种类繁多的动物形态。线虫秀丽隐杆线虫一直是推动基础机械生物学许多重要发现的核心模型,最近,它为探索 GRN 结构的进化多样化和其他物种的发育过程提供了坚实的基础。在这篇简短的综述中,我们将重点关注最古老的胚胎胚层内胚层的 GRN 进化多样化。早期胚胎发生在线虫门中存在很大差异。值得注意的是,虽然一些物种部署了调控发育,但更衍生的物种,如秀丽隐杆线虫,则表现出胚胎发生的马赛克模式。尽管不同物种的线虫肠道形态相对相似,但已观察到启动内胚层 GRN 的信号输入存在广泛差异,这是发育系统漂移 (DSD) 的一个典型。我们将探索内胚层 GRN 的遗传变异如何帮助在物种间和物种内推动 DSD,从而形成强大的发育系统。使用不同线虫进行比较研究有望揭示控制发育可塑性的遗传机制,并为控制胚胎 GRN 进化修饰的原理提供范例。
摘要。可供性的概念是感知和行动的生态方法的支柱之一。它于 20 世纪 80 年代末在设计界流行起来,对人体工程学产生了巨大影响,主要是在人机界面 (HMI) 设计领域。我们回到可供性的概念,更具体地回到可供性的表征,它基于对个体固有的统一环境的描述,也就是说参考他的身体或其行动系统。在简要提醒一些基本原则和概念的定义之后,我们通过有关可供性文献的一些主要结果,详细介绍了经典地用于表征可供性的形式主义,直到其最近的发展。最后,我们讨论了功能可供性的概念及其在人体工程学中的形式主义所提供的远超出 HMI 的视角。