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Hiya Health |获取概述-CloudFront.net
关于Abeona Therapeutics Abeona Therapeutics Inc.是一家临床阶段的生物制药公司，开发了严重疾病的细胞和基因疗法。prademagene Zamikeracel（PZ-CEL）是Abeona的研究自体，Col7A1基因校正的表皮片目前正在开发中，用于隐性营养不良的表皮溶液。该公司完全集成的细胞和基因治疗CGMP制造设施是其3阶段Viital™试验中使用的PZ-CEL的制造地点，并且能够在FDA批准后支持PZ-CEL的商业生产。该公司的开发组合还具有基于AAV的基因疗法，可用于高未满足医疗需求的眼科疾病。Abeona的小说，下一代AAV Capsids正在评估，以改善各种毁灭性疾病的热潮概况。有关更多信息，请访问www.abeonatherapeutics.com。
优先利用AAV ITR作为包装终端信号的定量分析
基因工程进步已导致重组腺相关病毒（RAAV）成为开发有效基因疗法的宝贵工具。RAAV的生产容易受到脱靶异质包装的影响，其影响仍在理解。在这里，使用粘附和悬浮液HEK293细胞同时生产具有四基因组长度的RAAV载体，以了解5'ITR终止。AAV8载体是由人FVIII质粒产生的，用于具有特定截断的4,707个核苷酸的全长货物，从而产生较小的基因组。通常，Raav的特征是将空的衣壳与全帽夹区分开，但是对于这项工作，该描述是不完整的。这项研究中的小基因组的特征是电荷检测 - 质谱法（CD-MS）。使用CD-MS，在常规归因于部分的范围内的包装基因组得到解析和定量。此外，碱性凝胶和QPCR用于评估包装基因组的身份。一起，这些结果显示了要封装的单位长度基因组的倾向。包装的基因组是作为从5'ITR发出的复制中间体发生的，表明HEK293细胞更喜欢单位长度基因组，而不是5'ITR终止和先前从SF9 Cell Systems观察到的5'ITR终止和异构DNA包装。由于两种制造过程均已使用并不断评估以生产临床材料，因此这种理解将使RAAV设计用于基础研究和基因治疗。
ZFR + AAV是治疗CMT1A ...
•我们已经确定了稳健的人PMP22-靶向ZFR，并确认了用BBB-PENETRANT AAV CAPSID靶向Schwann细胞的能力。•对于下一步，我们试图识别Schwann细胞特异性调节元素，以驱动目标细胞类型中的高水平ZFR。•此外，我们计划将选择ZFR包装到AAV矢量中，并从患者来源的细胞线屏幕中确定顶部构造中的“脱靶”差异基因表达。•最后，在另一项研究中，我们希望使用Schwann细胞的单细胞分析来确定内部开发的新型AAV衣壳的向流曲线。
优化基因治疗的可扩展RAAV生产
• Data from a perfusion benchtop bioreactor scale show that Ala, Asn, His, Tyr, and Trp positively correlate with capsid production, while Gln correlates negatively • Analysis of cell culture media from shake flask experiments shows that Asn and other amino acids, including several essential amino acids, deplete during AAV production • Capsid titer per cell increases when Gln is absent from media • The REBEL device enabled通过准确，精确地定量氨基酸的数据驱动的RAAV生产的生物过程开发，用于HEK293细胞中的RAAV生产，从而进一步了解过程•正在进行更多的实验，以优化灌注过程，以获得全面的Capsids
生物制药的测序解决方案
PACBIO测序溶液的出色精度为您提供了细胞和基因治疗开发所需的工具。这种准确性使您能够快速加速新型腺相关病毒（AAV）衣壳的工程和发现，监测和评估杂质并评估病毒整合。跨PACBIO平台的综合变体检测提供了CRISPR-CAS9基因编辑结果的全部表征，包括小和大插入或删除，以及目标构造集成站点。最后，PACBIO测序技术的精度使您可以确认转基因的正确表达和剪接以及细胞和基因治疗开发中使用的细胞系的身份和基因组完整性。
cap-004-icar-poster-final.pdf
利用我们高通量的定向进化工程平台，Capsida确定了一个系统地给药的（IV）Capsid，该capsID可实现NHP脑范围的生物分布，除了提供治疗相关的心脏转移水平外，还可以在关键FA相关的大脑区域中转导大量的神经元。在NHP研究中，同时给予一小片capsID（n = 3 NHP），工程化的衣壳驱动的RNA表达水平比CNS中的AAV9高约100倍，同时在心脏组织中保持相似的RNA表达，并且在肝脏中降低了约10x。重要的是，Capsida已经确定了一种与我们工程化的衣壳结合的新型血脑屏障受体。受体在猕猴和人类之间表现出完整的氨基酸序列同源性，从而使临床翻译变得过时。
通过双重技术改进向骨骼肌的基因传递...
通过肌肉嗜性 AAV 衣壳和肌肉特异性启动子的双策略方法改进向骨骼肌的基因传递。作者：Annalucia Darbey 1、Wenanlan Jin 1、Linda Greensmith 1 James N. Sleigh 1,2*、John Counsell 3*、Pietro Fratta 1,4* 隶属关系：1 英国伦敦大学学院皇后广场神经肌肉疾病系和伦敦大学学院皇后广场运动神经元疾病中心，伦敦大学学院皇后广场神经病学研究所，伦敦 WC1N 3BG。2 英国伦敦大学学院英国痴呆症研究所，伦敦 WC1E 6BT。3 英国伦敦大学学院外科和介入科学部靶向干预研究系，查尔斯贝尔楼，伦敦，英国 4 弗朗西斯克里克研究所；伦敦，NW1 1AT，英国 * 通讯作者：Pietro Fratta ( p.fratta@ucl.ac.uk)，John Counsell ( j.counsell@ucl.ac.uk) 和 James N. Sleigh ( j.sleigh@ucl.ac.uk)。摘要基于腺相关病毒 (AAV) 的病毒载体技术已展示出将基因货物运送到体内各种器官的良好能力，过去十年中，几种新型候选病毒在人体试验中显示出临床效果。然而，天然存在的 AAV 血清型在靶向骨骼肌方面的能力有限，而骨骼肌是许多神经肌肉疾病的重要基因治疗靶点。这意味着通常需要高剂量的 AAV 才能在肌肉中达到治疗有效剂量。为了克服这个问题，新型 AAV 载体衣壳已被设计成通过将靶向肽插入 AAV9 衣壳可变区 VIII (VRIII) 来实现更高的肌肉转导效率。我们在此描述了一种新报道的衣壳，称为 MyoAAV1A，与临床验证的肌肉特异性启动子相结合。我们分析了体内递送至小鼠骨骼肌的效率，发现 MyoAAV1A 衣壳与 MHCK7 启动子的最佳组合可维持骨骼肌中的转基因表达，并减少脱靶组织（尤其是肝脏）中的表达。这突出了一种有前途的衣壳-启动子组合，可在骨骼肌基因治疗的进一步临床前研究中取得进展。图形摘要
腺相关病毒工具包可靶向多种脑细胞
重组腺相关病毒 (AAV) 是神经科学研究中常用的基因传递载体。它们具有两个可工程化的特征：衣壳（外部蛋白质壳）和货物（封装的基因组）。可以修改这些特征以分别增强细胞类型或组织向性并控制转基因表达。已经鉴定出几种具有独特向性的工程化 AAV 衣壳，包括具有增强的中枢神经系统转导、细胞类型特异性和神经元逆向运输的变体。将这些 AAV 与现代基因调控元件和最先进的报告、传感器和效应货物配对，可以实现高度特异性的转基因表达，以对脑细胞和回路进行解剖和功能分析。在这里，我们讨论了最近的进展，这些进展提供了一个全面的（衣壳和货物）AAV 工具包，用于遗传访问分子定义的脑细胞类型。
标准化的术语和PACBIO HIFI测序和RAAV基因治疗载体分析的报告
尽管重组腺相关病毒（RAAV）是基因疗法的主要平台，但缺乏标准化的计算分析方法和通过长阅读测序评估每个帽子的内容的报告。PACBIO高度准确的长阅读HIFI测序可以对AAV基因组进行全面表征，但需要生物信息学专业知识来分析，解释和比较结果。为了满足这一需求并提高对功能性病毒有效载荷的理解，我们的工作组建立了标准化的命名法，并报告了RAAV矢量的长阅读测序数据。工作组建议涵盖与矢量纯度（全长与零散基因组）和污染物（宿主DNA，质粒DNA）鉴定有关的关键质量属性（CQA）。通过推荐的协议，我们对从头制造的数据分析揭示了全部和部分填充的衣壳的特异性以及部分/截断的载体物种的高分辨率表征。最后，我们提供了实施此
DNA-DNA滑动摩擦和非平衡动力学在病毒基因组喷射和包装中的作用 使用RNA 对植物基因组进行遗传性CRISPR-CAS9编辑
许多病毒通过病毒壳中的纳米通道弹出，这是由高密度基因组堆积产生的内力驱动的。DNA出口的速度受限制分子迁移率的摩擦力控制，但这种摩擦的性质尚不清楚。我们引入了一种方法，通过用光学镊子测量噬菌体Phi29衣壳的DNA出口来探测紧密限制的DNA的迁移率。我们测量了极低的初始退出速度，速度指数增加的制度，主导动力学的随机暂停和较大的动态异质性。使用可变的力量测量提供了证据，表明初始速度由DNA-DNA滑动摩擦控制，这与纳米级摩擦的Frenkel-Kontorova模型一致。我们证实了理论模型预测的弹出动力学的几个方面。暂停的特征表明它与软性系统中“堵塞”的现象相连。我们的结果提供了证据表明DNA-DNA摩擦和堵塞控制DNA出口动力学，但这种摩擦并没有显着影响DNA包装。