通过向细胞中添加RIPA裂解缓冲液(ServiceBio)提取总蛋白质。蛋白浓度,并调整蛋白质浓度,以使它们之间在不同组之间保持一致。使用SDS-PAGE分离蛋白质,并转移到PVDF膜(美国Billerica,美国)。 初级抗体TFRC(1:10000),ACSL4(1:10000),GPX4(1:5000),FTH1(1:2000)和GAPDH(1:500)在4°C下孵育12小时。 这些抗体是从英国剑桥市ABCAM获得的。 使用1×TBST从PVDF膜表面取出初级抗体后,将山羊抗兔二级抗体(1:10000,ServiceBio)在室温下孵育12小时。 通过化学发光检测蛋白表达,并处理灰度值,并使用图像J. 计算相对蛋白表达。蛋白质,并转移到PVDF膜(美国Billerica,美国)。初级抗体TFRC(1:10000),ACSL4(1:10000),GPX4(1:5000),FTH1(1:2000)和GAPDH(1:500)在4°C下孵育12小时。这些抗体是从英国剑桥市ABCAM获得的。使用1×TBST从PVDF膜表面取出初级抗体后,将山羊抗兔二级抗体(1:10000,ServiceBio)在室温下孵育12小时。蛋白表达,并处理灰度值,并使用图像J.
Castleman病,于1956年首次描述[1],是一种与淋巴结肿大有关的慢性炎性疾病。Castleman疾病的临床形式被分为单认证和多中心骑员疾病,多中心骑员疾病进一步分为人类疱疹病毒(HHV)-8-相关的多中心castleman疾病和特分患者多中心疾病(IMCD)[2]。IMCD表现为非特异性症状,暗示着炎症性疾病,例如发烧,汗水,体重减轻和不适。这是一种罕见而难治性的疾病,每年在日本影响约900-4200人[3]和〜1500人[4]。如果不适当治疗,IMCD可能会导致器官损伤和继发性淀粉样变性,从而降低患者的生活质量(QOL)并缩短预期寿命。
随着全球针对严重急性呼吸综合征疾病2(SARS-COV-2)的疫苗接种运动,越来越多地报道了稀有和新型疫苗相关的疫苗相关,全身性障碍和免疫介导的不良事件的运动[1]。特发性多中心castleman疾病(IMCD)是一种潜在的威胁生命的全身性疾病,其复杂的症状是由于细胞因子失调引起的。白介素6(IL-6)的过量生产是某些患者的已知驱动因素。尽管病因尚不清楚,但提出的机制包括病原体/病毒假设,副塑性假说和自身免疫性假设[2]。严重程度从几乎没有临床和实验室异常到多器官失败范围。已经描述了IMCD的临床上不同的变体,其中最严重的是Tafro综合征(血小板减少症,Anasarca,Fever,网状细胞,肾功能衰竭和组织肿大)[3]。siltuximab - 抗IL-6,嵌合单克隆抗体 - 是欧盟和美国批准IMCD的唯一治疗方法,建议基于II期试验作为第一线治疗,该方法证明了34%的肿瘤和症状反应[4,5]。