序言 “历史建筑和历史遗迹提高了人们的生活质量,有助于营造一种我们都认同的地方感。作为一个社区和地方当局,我们有责任为子孙后代保护我们的历史资产,并确保它们不会因无情的改建或劣质开发而受到损害。保护区的指定和后续管理是实现这一目标的一种方式。保护区的目的不是阻止进步或阻止变革。相反,它们为当地社区和自治市议会提供了积极管理变革的手段,并保护该地区的特色免遭破坏或完全消失。斯韦尔自治市很幸运,拥有如此丰富多样的建筑和自然遗产。自治市议会希望看到它被积极地用作可持续、敏感的再生和发展的催化剂,并创造人们愿意生活、工作和充分利用闲暇时间的地方。为此,我们审查了 Cellar Hill 和 Greenstreet 保护区,审查结果已在本文件中列出,自治市议会目前正在寻求建设性反馈。这是自治市议会在通过 2020 - 2032 年 Swale 遗产战略后承诺进行的一系列保护区审查之一。”
在DEF-CS系统中,人IPS细胞的预期形态DEF-CS技术与特定涂层结合使用了基于酶的传递,以促进单细胞生存,快速扩张和更容易传播。将IPS单元素转移到该系统时,您会注意到某些单元格特性与您以前系统中培养的IPS细胞的特性不同。与常用的基于菌落的培养系统相反,Def-CS培养系统产生了均匀间隔细胞的单层。在Def-CS培养系统中生长的新传递的细胞倾向于散布。然而,随着细胞的增殖,培养物变得更密集,细胞显示出典型的未分化的干细胞形态(即高核与细胞质比,定义的边界和突出的核仁)。
一旦 Cas9/sgRNA RNP 复合物通过囊泡递送并恢复细胞,就必须分离单细胞并将其扩增成克隆细胞系,以便分离和筛选目标基因型(图 3)。传统上,从作为菌落生长和传代的 hiPS 细胞建立克隆群效率低、困难且耗时;通常会导致细胞死亡或过早分化。然而,Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 囊泡和单细胞克隆系统的细胞培养组件包含一个确定的培养系统(Cellartis DEF-CS™ 培养系统,由基础培养基、涂层和添加剂组成),可有效进行单细胞克隆和扩增编辑的 hiPSC 克隆。 DEF-CS 培养系统是一种基于单层的培养系统,它通过允许单细胞传代、促进接种单细胞的存活和进一步扩增以及保留这些细胞的多能性,克服了基于菌落的培养所面临的挑战。