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肠杆菌科细菌鉴定流程图
H2S + K/A 可能的生物 变形杆菌、爱德华氏菌、沙门氏菌、弗氏柠檬酸杆菌 你对这些知识了解多少？ 2-4 进行并解释吲哚、MR-VP、柠檬酸盐、尿素酶、运动性和蔗糖发酵试验。陈述这些试验的目的和原理，并根据结果识别肠杆菌科的成员。描述细菌和病毒的繁殖和增殖方式。利用无菌技术安全处理微生物。应用各种实验室技术识别微生物的类型。识别主要微生物群的结构特征，比较原核细胞和真核细胞，对比各种微生物群的生理和生物化学。培养基：蔗糖发酵液、胰蛋白胨肉汤、MR-VP 肉汤、柠檬酸盐斜面、尿素斜面、运动琼脂。设备：接种线和接种环、原种培养物（产气克雷伯菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌）。试剂：Kovac 试剂、甲基红、Barritt 试剂 A 和 B。肠杆菌科的革兰氏阴性杆菌在临床微生物实验室中很常见。这些细菌通常被称为“肠道菌”，是正常肠道微生物群的一部分。由于它们具有相似的革兰氏染色结果和细胞形态，因此需要进行生化测试以进行识别。编码在细菌基因组中的生化酶为每种菌种形成独特的“指纹”。从历史上看，IMViC 测试用于识别肠道菌。该首字母缩略词代表吲哚、甲基红、Voges-Proskauer 和柠檬酸盐测试。大肠杆菌曾被用作食物和水源中粪便污染的指标。虽然肠杆菌与大肠杆菌相似，但它在土壤和草丛中广泛存在，因此它是一种不太可靠的指标。大肠杆菌、克雷伯氏菌、肠杆菌和变形杆菌通常是正常肠道微生物群的一部分，但在不同情况下会导致疾病。真正的肠道病原体包括沙门氏菌，它因“食物中毒”而导致伤寒和胃肠炎，以及志贺氏菌，它因“食物中毒”而导致细菌性痢疾。市面上有 Enterotube 和 API20E 等商业试剂盒系统可用于识别肠杆菌科。此练习需要微型细菌分析练习小组工作。小组中的每个人都将使用一种彩色点培养物。有四种蔗糖发酵液测试可供选择。1. 获取蔗糖发酵液，其中含有糖和 pH 指示剂。2. 使用便签创建标签，上面写有您的姓名、指定的生物和培养基类型。 3. 从琼脂平板上取少量细菌，加入到每个发酵管中。 4. 培养发酵管直至下一次实验。培养后，观察每个蔗糖发酵管的外观： - 黄色发酵液：阳性（发酵蔗糖） - 红色发酵液：阴性（不发酵蔗糖） 将发酵管丢弃在实验室后面的废弃架中。 尿素酶测试 获取尿素琼脂斜面并贴上您的姓名、指定生物和培养基类型标签。 使用无菌环将细菌添加到整个斜面中。 孵育直到下一次实验课。 孵育后，观察尿素培养基的颜色变化： - 热粉色肉汤：阳性（产生尿素酶） - 淡鲑鱼肉汤：阴性（不产生尿素酶） 将尿素斜面丢弃在实验室后面的废弃架中。 吲哚测试 获取胰蛋白胨肉汤并贴上您的姓名、指定生物和培养基类型标签。 使用无菌环向每种培养物中添加少量细菌。 孵育直到下一次实验课。孵育后，向每种培养物中加入 10 滴 Kovac 试剂： - 红色环：阳性（产生吲哚） - 无红色环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。MR-VPP 测试 获得一个 MRVP 肉汤管并贴上标签，写上您的名称、指定生物和培养基类型。使用无菌环向每种培养物中添加细菌。孵育至下一次实验课。孵育后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红色环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红色环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 将接种管孵育至下一次实验课，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液管将接种的肉汤分离到标有“MR”和“VP”的两个管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架上。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌的运动性呈阳性，而肺炎克雷伯氏菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏供应，未对志贺氏菌进行测试。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌的测试结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他发现了主要组织相容性复合体基因，这些基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Fc 受体由 Benacerraf 发现，同时还发现了 T 细胞和 B 细胞识别抗原并合作产生抗体反应的独特方式。尿素酶测试 获取尿素琼脂斜面并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。用无菌环将细菌添加到整个斜面中。孵育至下次实验课。孵育后，观察尿素培养基的颜色变化： - 热粉色肉汤：阳性（产生尿素酶） - 淡鲑鱼色肉汤：阴性（不产生尿素酶） 将尿素斜面丢弃在实验室后面的废弃架中。吲哚测试 获取胰蛋白胨肉汤并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。用无菌环向每种培养物中添加少量细菌。孵育至下次实验课。孵育后，向每种培养物中加入 10 滴 Kovac 试剂： - 红色环：阳性（产生吲哚） - 无红色环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。 MR-VPP 测试 准备一个 MRVP 肉汤管，并在上面贴上您的姓名、指定生物和培养基类型标签。使用无菌环将细菌添加到每个培养物中。孵育至下一次实验。孵育后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红色环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红色环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 孵育接种管直至下一次实验，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：孵育后，使用转移吸量管将接种的肉汤分成两个标记为“MR”和“VP”的管。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样本被丢弃在实验室的废弃架上。检测结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌运动性呈阳性，而肺炎克雷伯菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏志贺氏菌，未进行检测。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的检测呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他确定了主要组织相容性复合体基因，该基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。 Fc 受体以及 T 细胞和 B 细胞识别抗原和协作产生抗体反应的独特方式都是由 Benacerraf 发现的。尿素酶测试 获取尿素琼脂斜面并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。用无菌环将细菌添加到整个斜面中。孵育至下次实验课。孵育后，观察尿素培养基的颜色变化： - 热粉色肉汤：阳性（产生尿素酶） - 淡鲑鱼色肉汤：阴性（不产生尿素酶） 将尿素斜面丢弃在实验室后面的废弃架中。吲哚测试 获取胰蛋白胨肉汤并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。用无菌环向每种培养物中添加少量细菌。孵育至下次实验课。孵育后，向每种培养物中加入 10 滴 Kovac 试剂： - 红色环：阳性（产生吲哚） - 无红色环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。 MR-VPP 测试 准备一个 MRVP 肉汤管，并在上面贴上您的姓名、指定生物和培养基类型标签。使用无菌环将细菌添加到每个培养物中。孵育至下一次实验。孵育后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红色环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红色环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 孵育接种管直至下一次实验，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：孵育后，使用转移吸量管将接种的肉汤分成两个标记为“MR”和“VP”的管。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样本被丢弃在实验室的废弃架上。检测结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌运动性呈阳性，而肺炎克雷伯菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏志贺氏菌，未进行检测。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的检测呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他确定了主要组织相容性复合体基因，该基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。 Fc 受体以及 T 细胞和 B 细胞识别抗原和协作产生抗体反应的独特方式都是由 Benacerraf 发现的。观察尿素培养基的颜色变化： - 热粉色肉汤：阳性（产生尿素酶） - 淡鲑鱼肉汤：阴性（不产生尿素酶） 将尿素斜面丢弃在实验室后面的废弃架中。吲哚测试 获取胰蛋白胨肉汤并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。使用无菌环向每种培养物中添加少量细菌。孵育至下一次实验课。孵育后，向每种培养物中添加 10 滴 Kovac 试剂： - 红环：阳性（产生吲哚） - 无红环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。MR-VPP 测试 获取 MRVP 肉汤管并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。使用无菌环向每种培养物中添加细菌。孵育至下一次实验课。培养后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 将接种管培养至下一个实验环节，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液器将接种的肉汤分离到标有“MR”和“VP”的两个管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架中。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌具有阳性运动能力，而肺炎克雷伯菌和沙门氏菌则呈阴性。由于缺乏供应，未对志贺氏菌进行测试。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的尿素酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的检测结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他确定了主要组织相容性复合体基因，该基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Benacerraf 发现了 Fc 受体，以及 T 细胞和 B 细胞识别抗原并协作产生抗体反应的独特方式。观察尿素培养基的颜色变化： - 热粉色肉汤：阳性（产生尿素酶） - 淡鲑鱼肉汤：阴性（不产生尿素酶） 将尿素斜面丢弃在实验室后面的废弃架中。吲哚测试 获取胰蛋白胨肉汤并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。使用无菌环向每种培养物中添加少量细菌。孵育至下一次实验课。孵育后，向每种培养物中添加 10 滴 Kovac 试剂： - 红环：阳性（产生吲哚） - 无红环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。MR-VPP 测试 获取 MRVP 肉汤管并贴上您的名称、指定生物和培养基类型标签。使用无菌环向每种培养物中添加细菌。孵育至下一次实验课。培养后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 将接种管培养至下一个实验环节，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液器将接种的肉汤分离到标有“MR”和“VP”的两个管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架中。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌具有阳性运动能力，而肺炎克雷伯菌和沙门氏菌则呈阴性。由于缺乏供应，未对志贺氏菌进行测试。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的尿素酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的检测结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他确定了主要组织相容性复合体基因，该基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Benacerraf 发现了 Fc 受体，以及 T 细胞和 B 细胞识别抗原并协作产生抗体反应的独特方式。向每种培养物中加入 10 滴 Kovac 试剂： - 红色环：阳性（产生吲哚） - 无红色环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。MR-VPP 测试 获得一个 MRVP 肉汤管并贴上标签，写上您的名称、指定生物和培养基类型。使用无菌环向每种培养物中添加细菌。孵育至下一次实验课。孵育后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红色环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红色环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 将接种管孵育至下一次实验课，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液管将接种的肉汤分离到标有“MR”和“VP”的两个管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架上。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌的运动性呈阳性，而肺炎克雷伯氏菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏供应，未对志贺氏菌进行测试。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌的测试结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他发现了主要组织相容性复合体基因，这些基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Fc 受体由 Benacerraf 发现，同时还发现了 T 细胞和 B 细胞识别抗原并合作产生抗体反应的独特方式。向每种培养物中加入 10 滴 Kovac 试剂： - 红色环：阳性（产生吲哚） - 无红色环：阴性（不产生吲哚） 将胰蛋白胨管丢弃在通风橱中。MR-VPP 测试 获得一个 MRVP 肉汤管并贴上标签，写上您的名称、指定生物和培养基类型。使用无菌环向每种培养物中添加细菌。孵育至下一次实验课。孵育后，观察 MRVP 肉汤的外观： - 红色环：阳性（通过混合酸途径发酵葡萄糖） - 无红色环：阴性（不通过混合酸途径发酵葡萄糖） 1. 首先准备用于细菌分析的测试培养基。这涉及使用无菌接种环获取少量细菌并接种 MR-VP 肉汤。 2. 将接种管孵育至下一次实验课，之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液管将接种的肉汤分离到标有“MR”和“VP”的两个管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架上。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌的运动性呈阳性，而肺炎克雷伯氏菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏供应，未对志贺氏菌进行测试。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌的测试结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他发现了主要组织相容性复合体基因，这些基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Fc 受体由 Benacerraf 发现，同时还发现了 T 细胞和 B 细胞识别抗原并合作产生抗体反应的独特方式。之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液器将接种的肉汤分离到两个标记为“MR”和“VP”的管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架上。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌的运动性呈阳性，而肺炎克雷伯氏菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏供应，没有测试志贺氏菌。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌的检测结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他发现了主要组织相容性复合体基因，这些基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Fc 受体由 Benacerraf 发现，同时还发现了 T 细胞和 B 细胞识别抗原并合作产生抗体反应的独特方式。之后将进行几项测试以分析细菌特性。 3. **MR 测试**：培养后，使用移液器将接种的肉汤分离到两个标记为“MR”和“VP”的管中。将甲基红试剂添加到“MR”管中，并记录任何反应或结果。琼脂样品被丢弃在实验室的废弃架上。测试结果表明：大肠杆菌和奇异变形杆菌的运动性呈阳性，而肺炎克雷伯氏菌和沙门氏菌呈阴性。由于缺乏供应，没有测试志贺氏菌。大多数菌株的蔗糖发酵呈阴性，但奇异变形杆菌除外，其发酵呈阳性。不同细菌的脲酶活性各不相同，奇异变形杆菌呈阳性。不同物种的吲哚生成也不同，肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌的检测结果呈阳性。在 1940 年代的研究中，Baruj Benacerraf 博士对免疫学做出了重大贡献。他发现了主要组织相容性复合体基因，这些基因对于区分自身和非自身至关重要。他的工作还阐明了巨噬细胞的吞噬活性并描述了 IgG 亚类的功能。Fc 受体由 Benacerraf 发现，同时还发现了 T 细胞和 B 细胞识别抗原并合作产生抗体反应的独特方式。
