免疫抑制分子程序性细胞死亡配体 1 (PD-L1) 已被证明在自身免疫、感染和癌症等病理中发挥作用。PD-L1 不仅在癌细胞上表达,而且在未转化宿主细胞上的表达也与癌症进展有关。小鼠系统中 PD-L1 缺陷的产生使我们能够专门研究 PD-L1 在生理过程和疾病中的作用。最通用且最易于使用的位点特异性基因编辑工具之一是 CRISPR/Cas9 系统,它基于 RNA 引导的核酸酶系统。与其前身锌指核酸酶或转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 类似,CRISPR/Cas9 催化双链 DNA 断裂,这可能导致由于非同源末端连接 (NHEJ) 的随机核苷酸插入或缺失而导致的移码突变。此外,尽管不太常见,但 CRISPR/Cas9 可以在存在合适模板的情况下通过同源定向修复 (HDR) 导致插入确定的序列。在这里,我们描述了使用 CRISPR/Cas9 在小鼠 C57BL/6 背景下敲除 PD-L1 的方案。外显子 3 的靶向结合 HindIII 限制位点的插入会导致过早终止密码子和功能丧失表型。我们描述了靶向策略以及创始者筛选、基因分型和表型。与基于 NHEJ 的策略相比,所提出的方法可产生具有与 NHEJ 相当的效率和时间线的确定终止密码子,生成方便的创始者筛选和基因分型选项,并且可以快速适应其他目标。
摘要简介Versius CMR是一种新型的机器人系统,其特征是开放式手术控制台和独立的床头单元。该系统具有灵活性和多功能性的潜力,并且已用于泌尿外科,妇科和一般手术程序中。目的是描述对盆腔手术的Versius系统的全面分析。方法这是一项研究,涉及两个机构,分别是助理桑蒂·保罗和卡洛,米兰和阿普恩医院,意大利马萨诸塞州。包括在骨盆区域进行的所有干预措施。有关指示,内部和手术后课程的数据被前瞻性地收集和分析。结果总共对Versius进行了171项干预措施。其中的42个涉及骨盆手术。22个具有肿瘤学指征(局部前列腺癌),其余的具有非综合性或功能目的。主要进行的骨盆手术是根治性前列腺切除术(22),然后进行附件切除术(9)。没有发生术中并发症,也没有转化为其他方法。报道了Clavien II并发症和一个Clavien IIIB。需要系统功率周期的故障/警报发生在2种不同的情况下。在接受前列腺切除术的2例患者中,需要根据患者身高进行调整,其中the骨被尾部移动。在两种情况下,与其他妇科程序伴随着骨盆脱垂。结论盆腔手术是可行的,没有重大并发症。如果要进行适当的或设置和套管理放置,则可以完成解剖和重建步骤。Versius可以轻松地由不同学科和背景的外科医生采用;假定进一步的多专科实施,并且正在等待长期的肿瘤学和功能结果。
Lavo和全球制造商Wilo合作伙伴提供绿色的氢存储系统●Lavo和Wilo昨天签署了一种战略伙伴关系,以开发,商业化和部署氢存储系统●各方将利用各自的优势来支持跨用例的脱碳,●作为第一步威洛意识到他们的使命是支持新南威尔士州悉尼绿色能源过渡 - 2023年4月5日 - 澳大利亚储能技术公司Lavo昨天与总部位于德国的全球制造公司Wilo签署了战略合作伙伴关系。Lavo和Wilo将利用各自的优势共同开发,商业化和部署氢存储系统。作为第一步,使用待处理的金属氢化物的Lavo的创新氢存储技术将集成到德国多特蒙德的Wilo的绿色氢植物中。H2PopterPlant通过吸收多余的能量,将其存储为氢,然后在需要时将其重新将电力重新转移到电力中,从而缓冲可再生能源产生的自然波动。LAVO技术的集成将允许提供安全,低英尺印记和大规模的氢存储,并在现场支持网格管理。Lavo和Wilo共享相同的任务:通过设计,开发和部署商业准备就绪的氢生产,存储和使用解决方案来支持绿色能源过渡。这种伙伴关系是双方意识到这一任务的另一个重要步骤。Lavo的存储系统完全符合此政策。Lavo Germany首席成长兼董事总经理Alexander Clavien评论说:“这种伙伴关系释放了许多商业合作机会。 这些将使Lavo和Wilo能够证明其独特技术对相关部门脱碳的价值。 合作伙伴关系还展示了Lavo跨存储系统的咨询和技术能力。”董事总经理Martin Linge-Boom,Wilo Projects的高级法律经理Christian Preetz博士表示:“ Wilo的公司政策包括开拓可持续性和效率。 Wilo很高兴与Lavo找到了一个聪明而聪明的伙伴,可以一起走向未来。”Lavo Germany首席成长兼董事总经理Alexander Clavien评论说:“这种伙伴关系释放了许多商业合作机会。这些将使Lavo和Wilo能够证明其独特技术对相关部门脱碳的价值。合作伙伴关系还展示了Lavo跨存储系统的咨询和技术能力。”董事总经理Martin Linge-Boom,Wilo Projects的高级法律经理Christian Preetz博士表示:“ Wilo的公司政策包括开拓可持续性和效率。Wilo很高兴与Lavo找到了一个聪明而聪明的伙伴,可以一起走向未来。”
基线参数的开放率(n = 15),腹腔镜(n = 12)和机器人(n = 25)Pn相似,除了肿瘤的大小和肾小球评分,在开放组中较高(p = 0.000)。在机器人方法中的手术时间明显更长(180分钟; P = 0.05),而开放组的失血量更大(450 mL; P = 0.000)。中位数的智慧是25分钟;在机器人组中,显着的并发症(Claviendindo≥II)和正手术缘分别为12%和0%。术前成像和最终的组织病理学数据显示,与腹腔镜和机器人PN相比,最好通过开放方法进行较大的肿瘤(6.3 cm vs. 3.4 cm; p = 0.000)。在最初的26例中进行了更多开放和腹腔镜程序(n = 12,10),在接下来的26例中,以后向机器人辅助PN(n = 21)进行了过渡。没有参数在后半部分显示出改善,而手术时间显示出增加(150 vs. 180分钟; p = 0.045)。
图 1、图 S1 和表 S1 总结了从 IO/TKI 治疗前影像学到手术时原发肿瘤大小 (PT) 和 ITT 的变化。表 2 提供了每例病例的病理评估结果。4 例为透明细胞组织学,1 例为乳头状 II 型。2 例有多个肺转移,手术前获得完全缓解。在新辅助 IO/TKI 治疗期间,所有患者均按推荐剂量接受 IO 药物。然而,在出现不良事件的情况下,口服阿昔替尼调整为 1 mg 每天两次(病例 4)、2 mg 每天两次(病例 5)和 3 mg 每天两次(病例 6)。4 例患者接受了开放根治性肾切除术和血栓切除术,1 例患者因从 cT3b 分期降级至 cT3a 而接受了腹腔镜根治性肾切除术 (LRNx)在病例 5 中,IV 级 ITT 缩小至 III 级,从而避免了开放性胸骨切开术的需要(图 S1)。中位手术时间和估计失血量分别为 431 分钟和 3,100 毫升(表 S2)。外科医生报告所有病例的手术部位均存在纤维化和炎症变化。术前治疗后,ITT 和原发性 RCC 中残留活肿瘤细胞的百分比在不同病例中有所不同(表 2)。没有报告重大术中并发症。1 名患者因术后 90 天内腹部淋巴漏(Clavien IIIa)需要接受淋巴干预。中位总住院时间和随访时间分别为 10 天和 691 天。使用 Kaplan-Meier 方法估计 PFS 曲线(图 2)。我们的病例系列显示中位 PFS 为 11 个月(95% CI:5.5-22.5 个月)。除 1 名由医生决定在术后 1 个月内接受 IO 的患者外,中位 TFS 为 10 个月(95% CI:5.8– 18.7 个月)。随访期间无患者死亡。
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