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彗星测定作为评估冷冻保存样品中DNA损伤的方法
保存核基因组的完整性对于细胞，组织和生物体的生存能力和整体健康至关重要。DNA，在生理条件下容易受到损害，并且容易受到内源性和环境因素的影响，面临着持续的威胁。为了评估单个真核细胞内的DNA损伤和修复，该彗星分析表明自己是一种多功能，基于凝胶电泳，相对简单且高度敏感的方法。最初旨在监测哺乳动物细胞种群内的DNA损伤和修复，该彗星分析现已在包括酵母，原生动物，植物，植物和无脊椎动物在内的各种域中发现了应用。这项技术在冷冻保存研究中已证明是无价的，它是确定合适的冷冻保存方案的宝贵辅助手段。这些方案包括与冷冻保护剂，样品制备以及时间和温度有关的储存条件有关的选择。在动物冷冻保存研究领域，彗星分析是评估DNA完整性的金标准方法。尽管如此，在以植物为导向的调查中应用，由于植物细胞的独特性质和相关的技术挑战，额外的努力至关重要。本综述阐明了彗星测定法，讨论其当前迭代的基本原则，并描述了其在动物和植物标本的冷冻保存中的应用。此外，在植物样品冷冻保存的背景下，我们深入研究了彗星测定效用作为监测工具面临的主要挑战。
彗星拦截器 OPIC 仪器的光学像差模拟
2 理论分析 3 2.1 光学像差....................................................................................................................................................................3 2.1.1 球面像差....................................................................................................................................................................3 2.1.2 像散....................................................................................................................................................................................3 2.1.2 彗形像差....................................................................................................................................................................4 2.1.3 彗形像差....................................................................................................................................................................4 2.1.3 彗形像差.................................................................................................................................................................... . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .................................................................................................................................................................................................21 2.2 与 OPIC 的相关性 .................................................................................................................................................................................22 2.2.1 镜头和传感器像差 .................................................................................................................................................................................22 2.2.2 轨迹动力学效应 .................................................................................................................................................................................24
使用中性彗星试验测量培养细胞中的 DNA 损伤
请引用本文：Clementi, E. 等人 (2021)。使用中性彗星试验测量培养细胞中的 DNA 损伤。Bio-protocol 11(22): e4226。DOI：10.21769/BioProtoc.4226。
通过DNA聚合酶辅助的终端标记
在彗星测定中的摘要中，如果细胞被X X倍化为Genoto XIC剂，则在单细胞凝胶电泳后形成尾巴。these尾巴包括DNA单链断裂（SSB）和双链断裂（DSB）的混合物。ho w e v er，这些两种类型的链断裂无法使用具有Con V en ventionDNA染色的彗星测定方案来区分。由于DSB对单元格是有问题的，因此如果可以在同一彗星中差异化SSB和DSB，则将很有用。为了能够区分SSB和DSB，我们为聚合酶辅助的DNA损伤分析（PADDA）设计了一种协议，可与Flash Comet协议或固定单元格结合使用。通过使用DNA聚合酶I将SSB和末端脱氧核苷酸转移酶标记为具有荧光团标记的核苷酸的DSB。在此，TK6细胞或HACAT细胞暴露于过氧化氢（H 2 O 2），电离辐射（X射线）或DNA切割酶，然后遵循彗星方案，以实施彗星方案。p adda提供了更广泛的检测范围，未发现的DNA链断裂的未发现的未发现。
使用碱性单细胞凝胶电泳（SCGE）彗星测定的氧化DNA损伤以及N-乙酰基半决赛的保护作用
Zearalenone（ZEN）是一种由几种在谷物和农产品中发现的镰刀菌产生的非甾体雌激素霉菌毒素。Zen与农场动物和人类的霉菌毒性有关。ZEN的毒性作用众所周知，但是尚未确定碱性彗星测定法评估Zen诱导的Chang肝细胞中氧化DNA损伤的能力。这项研究的第一个目的是评估彗星测定法测定Zen Toxin诱导的细胞毒性和DNA大坝的程度，第二个目的是研究N-乙酰半胱氨酸酰胺（NACA）保护细胞以保护细胞免受Zen诱导的毒性的能力。在彗星测定中，通过量化尾部范围矩（TEM；任意单位）和尾部长度（TL；任意单位）来评估DNA损伤，这些损伤用作SCGE中DNA链断裂的指标。通过抑制细胞增殖并诱导氧化DNA损伤，介导Zen在变肝细胞中的细胞毒性作用。增加ZEN的集中度增加了DNA损伤的程度。用Zen毒素治疗后，DNA迁移的程度和尾部的细胞百分比显着增加（P <0.05）。与高浓度的Zen毒素（250 p m）的细胞治疗相比，用低浓度的Zen毒素（25 p m）处理Zen毒素（25 p m）的治疗诱导的DNA损伤水平相对较低。氧化DNA损伤似乎是Chang肝细胞中Zen诱导的毒性的关键决定因素。在暴露于任何浓度的ZEN之前先用NACA预先处理细胞时，观察到细胞溶解性的显着降低和氧化DNA损伤。我们的数据表明ZEN在Chang肝细胞中诱导DNA损伤，NACA的抗氧化活性可能有助于通过消除氧化应激减少Zen诱导的DNA损伤和细胞毒性。
致NESA委员会，BSA弗吉尼亚理事会中心：我很荣幸提名Rob Comet攻读NESA杰出的Eagle Scout奖。我知道Rob Si致NESA委员会，BSA弗吉尼亚理事会中心：我很荣幸提名Rob Comet攻读NESA杰出的Eagle Scout奖。我知道Rob Si
致NESA委员会，BSA弗吉尼亚理事会中心：我很荣幸提名Rob Comet攻读NESA杰出的Eagle Scout奖。 自1981年以来，我就认识罗布（Rob），当时我们首次在SWA建筑师一起工作，也是他在443委员会任职25年以上的部队委员会的一部分。 像大多数鹰童子军一样，Rob了解了领导力和服务的价值。 他了解如何建立团队并指导其高水平的表现。 Rob在整个职业生涯中一直做到这一点，他参与社区以及年轻人从事侦察。 以下简历重点应该说明我的意思：建筑学教育BS - 弗吉尼亚大学建筑硕士 - 密歇根大学职业生涯，让罗布的一位商业伙伴给您他的观点：“罗布的职业生涯对弗吉尼亚州的里士满和弗吉尼亚州的社区产生了令人难以置信的影响，”查尔斯·派珀（Charles Piper）与奎因·埃文斯（Quinn Evans）的原则说。 “他在我们公司中为真正的仆人领导建模，并积极从事许多同事的成长和发展。 在为学校和政府客户的服务以及他在为服务和指导许多关键的公民和非营利组织方面所做的非凡承诺中，他的领导能力也很明显。”当他获得了美国建筑师研究所（AIA）的2002年杰出成就奖和2022年的Marcellus Wright Jr.奖中，他的职业生涯得到了著名的职业 这两个奖项都是建筑专业人员对同伴的最高认可之一。致NESA委员会，BSA弗吉尼亚理事会中心：我很荣幸提名Rob Comet攻读NESA杰出的Eagle Scout奖。自1981年以来，我就认识罗布（Rob），当时我们首次在SWA建筑师一起工作，也是他在443委员会任职25年以上的部队委员会的一部分。像大多数鹰童子军一样，Rob了解了领导力和服务的价值。他了解如何建立团队并指导其高水平的表现。Rob在整个职业生涯中一直做到这一点，他参与社区以及年轻人从事侦察。以下简历重点应该说明我的意思：建筑学教育BS - 弗吉尼亚大学建筑硕士 - 密歇根大学职业生涯，让罗布的一位商业伙伴给您他的观点：“罗布的职业生涯对弗吉尼亚州的里士满和弗吉尼亚州的社区产生了令人难以置信的影响，”查尔斯·派珀（Charles Piper）与奎因·埃文斯（Quinn Evans）的原则说。“他在我们公司中为真正的仆人领导建模，并积极从事许多同事的成长和发展。在为学校和政府客户的服务以及他在为服务和指导许多关键的公民和非营利组织方面所做的非凡承诺中，他的领导能力也很明显。”当他获得了美国建筑师研究所（AIA）的2002年杰出成就奖和2022年的Marcellus Wright Jr.奖中，他的职业生涯得到了著名的职业这两个奖项都是建筑专业人员对同伴的最高认可之一。Rob在里士满度过了整个职业生涯，他负责了许多屡获殊荣和备受瞩目的设计项目。这样一个项目是开发里士满城公立学校范围内的设施总体规划。是BCWH Architects的创始合伙人，他曾担任该公司的总裁，直到2018年底与Quinn Evans合并。合并使彗星能够分享他在设计方面的专业知识，包括与奎因·埃文斯（Quinn Evans）团队在公司中部和中西部上部的六个办公室中与奎因·埃文斯（Quinn Evans）团队的历史保存工作。社区Rob目前是里士满的国会大厦广场保护委员会主席，还活跃于历史悠久的里士满基金会和里士满社区。彗星过去的社区参与包括在：
第 22 条咨询声明 - 2016 年 6 月
写信或发送电子邮件给我们本地计划数据库中的每个人，告知他们有关咨询的信息；在互联网上发布咨询文件，包括在咨询期间在自治市议会网站首页上发布链接；在自治市议会位于 Danestrete 的主要办公室以及市中心和老城大街的图书馆提供文件的硬拷贝以供查阅。在 2013 年 6 月 20 日和 7 月 18 日在 The Comet 上刊登显眼的广告；发布新闻稿，并分别于 2013 年 7 月 3 日和 7 月 4 日在 The Herts Advertiser 和 The Comet 上发表文章；在议会的 Facebook 页面和 Twitter 推送上宣布咨询；向自治市的每个住宅和商业地址发送摘要传单；并与议会老年人论坛（6 月 13 日）、当地商界（6 月 18 日）和青年理事会（6 月 26 日）举行一系列有针对性的演讲会
I. DeLimaris。研究DNA损伤与阿尔茨海默氏病之间的潜在关系：一种临床生物学方法。科学慢性
单细胞凝胶电泳测定法，也称为彗星测定法，是一种广泛使用的方法，可在视觉上评估DNA损伤。受到碱性条件的影响，具有不同分子量和电荷的DNA分子在电场中表现出不同的行为。未损坏的DNA分子保留在细胞核内，并在电泳过程中显示出最小的迁移，而变性的DNA片段则从核中迁移。遗传物质从细胞核到尾部的迁移增加，称为“彗星损伤”，是DNA损伤的量度。彗星测定基本上涉及量化通过光学显微镜获得的图像[5]。此外，人类8-羟基-2-脱氧鸟苷（8-OHDG）ELISA测定是一种精确的体外定量技术，用于检测人类唾液，血清，尿液和质量样品中的8-OHDG。8-OHDG是由于鸟嘌呤的羟基自由基攻击引起的活性氧（ROS）诱导的DNA碱基修饰。通过ELISA对8- OHDG浓度的量化由于其稳定性而变得越来越流行，