Figure 1 – Schematic of wound healing in humans ........................................................ 3 Figure 2 – Schematic on DNA hairpin-based shape memory hydrogel............................ 5 Figure 3 – Schematics on how different studied self-healing systems work..................... 7 Figure 4 – DNA structure and the complementary base-pairing system ........................ 10 Figure 5 – Examples of DNA nanotechnology构造........................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................... 13图7 - 3D DNA折纸曲柄滑块结构.................................................to attach the DNA oligonucleotide crosslinks to the pAA chain ........................................................................................ 17 Figure 10 – Schematic illustrating how a free radical polymerization progresses........... 18 Figure 11 – DNA hairpin-dependent expansion of the pAA hydrogels in the 2017 study by Schulman et al................................................................................................................................................................................................................................................................................ 19图12 - PAA聚合反应的示意图............................................................................................................... 60分钟后的水凝胶形成.... 28图16 - 优化的PAA-SSDNA水凝胶............................................................................................................................................................................................... 29图17 - 对PAA凝胶优化的不同冷却设置的定性分析结果的结果.................................................................................................................................................................................................................................................................................反应混合物中存在的ssdna ................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................. 30
和药物输送。23,24在这里我们建立了这些设计概念,并开发了针对PSMA的TMV,以增强药物递送焦油焦油前列腺癌。特定的cally,我们使用了TMV的T158K突变体,25,它在外表面上呈现2130个反应性赖氨酸残基,而内部通道内衬有4260个谷氨酸残基。这允许将外部赖氨酸残基的主要胺用于N-羟氧化二酰亚胺(NHS)介导的生物结合,而内部谷氨酸的羧酸酯基团可以通过1-乙基-3--(3-二氨基甲基氨基氨基氨基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基酸)来解决带电的腔体,用于构成带正电的分子货物的凹入。Using a two-step bio- conjugation protocol (installation of an azide by conjugation of an NHS reactive linker to the surface lysines, followed by conjugation of an alkyne-terminated targeting ligand using copper-free click chemistry), we conjugated and displayed ((( S )- 5-amino-1-carboxypentyl)carbamoyl)- L -glutamic acid (DUPA),一种与PSMA结合的小靶向配体。26用近红外urophore cy5共价标记TMV通道,以启用纳米颗粒的成像和跟踪,或用抗肿瘤剂Mitoxantrone(MTO)(一种II型拓扑酶酶抑制剂)加载。27我们使用PSMA +和PSMA前列腺癌细胞在体外测试了焦油的特定城市和药物递送的效率。
和药物输送。23,24在这里我们建立了这些设计概念,并开发了针对PSMA的TMV,以增强药物递送焦油焦油前列腺癌。特定的cally,我们使用了TMV的T158K突变体,25,它在外表面上呈现2130个反应性赖氨酸残基,而内部通道内衬有4260个谷氨酸残基。这允许将外部赖氨酸残基的主要胺用于N-羟氧化二酰亚胺(NHS)介导的生物结合,而内部谷氨酸的羧酸酯基团可以通过1-乙基-3--(3-二氨基甲基氨基氨基氨基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基酸)来解决带电的腔体,用于构成带正电的分子货物的凹入。Using a two-step bio- conjugation protocol (installation of an azide by conjugation of an NHS reactive linker to the surface lysines, followed by conjugation of an alkyne-terminated targeting ligand using copper-free click chemistry), we conjugated and displayed ((( S )- 5-amino-1-carboxypentyl)carbamoyl)- L -glutamic acid (DUPA),一种与PSMA结合的小靶向配体。26用近红外urophore cy5共价标记TMV通道,以启用纳米颗粒的成像和跟踪,或用抗肿瘤剂Mitoxantrone(MTO)(一种II型拓扑酶酶抑制剂)加载。27我们使用PSMA +和PSMA前列腺癌细胞在体外测试了焦油的特定城市和药物递送的效率。
必需的材料(不包括)1。纯化的人尿DNA:应根据制造商协议2.DNA保存解决方案3。荧光PCR仪器能够阅读FAM通道(494 nm最大吸收,518 nm最大发射),VIC通道(520 nm最大吸收,558 nm最大激发),ROX通道(580 nm最大吸收,最大吸收),623 nm最大兴奋)和CY5(640 nm nm最大吸收,640 nm最大吸收,682 nm)。4。Vortex Mixer 5。微输出式6。移液器7。无菌核酸酶的无动移液尖端(建议使用屏障尖端)和微型试管8。兼容PCR板9。与我们的技术支持团队联系以获取有关兼容性的问题:TechSupport@raybiotech.com样本要求1。所有人类尿液标本都应被视为潜在的感染性,并谨慎处理。在测试任何样本时,应采取措施根据风险评估来最大程度地降低实验室传播的风险。这些预防措施至少应包括熟练度和能力测试,适当的PPE,避免气溶胶以及使用有效的消毒剂(第四纪铵化合物和0.5%的漂白剂)。2。我们建议在微量离心机中在5000 g处离心1 ml尿液,在室温下10分钟,然后去除800 µL上清液。剩余的上清液和沉淀应用于DNA提取**。最终提取的DNA应在100 µL的DNase,无RNase无RNase水中洗脱。实时PCR程序需要每个反应的10 µL提取的DNA。3。提取的人尿DNA是该试剂盒的起始材料。应根据制造商方案将DNA与PCR分析设置分开纯化,并具有DNA保存溶液,以使细菌失活和保存DNA。**本手册中显示的数据是基于DNA提取的,使用Thermo Fisher Scientific的Magmax™病毒/病原体核酸分离试剂盒。一般考虑1。为防止PCR反应的污染,清洁和净化所有工作表面,离心机,移液器和其他具有10%漂白剂或DNAave®的设备,然后在每次测定之前为70%乙醇。
