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牛奶和奶制品中甲型流感病毒的提取和检测 - 2024 年 8 月 22 日
a. 95% 乙醇（Sigma E7023 或同等溶液） b. 不含 DNase/RNase 的水（Life Technologies AM9937 或同等溶液） c. 去离子水/蒸馏水/Milli-Q 水 d. NaCl（Sigma S3014 或同等溶液） e. NaOH（Sigma S5881 或同等溶液） f. HCl（Sigma H1758 或同等溶液） g. 甘氨酸（Sigma G7126 或同等溶液） h. 10X PBS 组织培养 (tc) 级（Sigma P5493）稀释至 1X i. KCl（Sigma P9541 或同等溶液） j. 磷酸二氢钾（Sigma P9791 或同等溶液） k. 磷酸氢二钠（Sigma S5011 或同等溶液） l. 甘油（Sigma G5516 或同等溶液） m.无 DNase/RNase 微量离心管，不粘连、低吸附、硅化 0.5 ml（Life Technologies AM12350 或同等产品） n. 无 DNase/RNase 微量离心管 1.5 ml，不粘连、低吸附、硅化（Life Technologies AM12450 或同等产品） o. 无 DNase/RNase 微量离心管 2.0 ml，不粘连、低吸附、硅化（Life Technologies AM12475 或同等产品） p. 过滤屏障防气溶胶微量移液器吸头，无 DNase/RNase（0.2 – 1000 µl） q. Qiagen QIAamp 病毒 RNA 小量试剂盒（Qiagen 52904） r. Qiagen 收集管（Qiagen 19201） s. OneStep™ PCR 抑制剂去除试剂盒（Zymo Research D6030） t. 2.0 mL 微量离心管，不含 DNase/RNase（USA Scientific 1620-2799 或同等产品） u. OneStep RT-PCR 试剂盒（Qiagen 210210 或 210212） v. Ambion Superase·In RNase 抑制剂（20 单位/µl）；Life Technologies AM2694 (2,500 U) 或 AM2696 (10,000 U) w. Eppendorf DNA LoBind Tubes 5.0 mL Fisher Scientific 0030108310 或同等产品 x. 15 ml 聚丙烯锥形管（Fisher Scientific 14-959-70C 或同等产品） y. 50 mM MgCl 2（BioRad 1708872 或同等产品）或 25 mM MgCl 2（ThermoFisher Scientific AB0359 或同等产品）z.内部对照 RNA（BioGX 目录号 750-0001 - 联系公司）aa. 所有 RTqPCR 检测的标准脱盐引物和 HPLC 探针（Integrated DNA Technologies 或同等公司）bb. RT-qPCR 阳性对照（甲型流感病毒的定量基因组 RNA
nuc-off核酸酶和DNA去除喷雾
图1。在去除RNase和dNase中，MP生物医学Nuc-Off核酸酶和DNA去除喷雾剂和竞争者T溶液的性能比较。A. RNase消除。在室温下孵育5分钟，将4μl的去除试剂和不同量的RNase（以1μl为单位）的混合物孵育；之后，加入1μlRNA，并在室温下进一步孵育15分钟，然后在含有甲醛的琼脂糖凝胶中变性和最终混合物的电泳。B. DNase消除。在室温下孵育4μl的去除试剂和不同量的DNase（以1μl）的混合物5分钟；之后，将1μl10X反应缓冲液和1μgDNA和无核酸酶的水加入总体积10μl，并在室温下进一步孵育15分钟，然后是最终混合物的琼脂糖凝胶电泳。C.去除试剂对DNA稳定性的影响。在室温下孵育15分钟，将4μl的去除试剂和1μl基因组DNA的混合物进行孵育，然后通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。D.去除试剂对RNA稳定性的影响。在室温下孵育4μl的去除试剂和1μlRNA的混合物，然后变性添加含有甲醛的琼脂糖凝胶电泳。此处显示的图仅供参考，它可能会根据不同的实验条件而有所不同。
产品说明
产品描述和预期用途 3M™ Petrifilm™ Staph Express (STX) 系统由 3M™ Petrifilm™ Staph Express Count (STX) 板和 3M™ Petrifilm™ Staph Express (STX) 盘组成，它们单独包装。3M Petrifilm STX 板是一种样本即用培养基系统，其中包含冷水可溶胶凝剂。板中的显色改良 Baird-Parker 培养基对金黄色葡萄球菌具有选择性和鉴别性，但也可能指示猪葡萄球菌 (S. hyicus) 或中间葡萄球菌 (S. intermedius)。3M Petrifilm STX 盘含有甲苯胺蓝-O，有助于可视化脱氧核糖核酸酶 (DNase) 反应。在 3M Petrifilm STX 板上检测到的 DNase 阳性生物包括金黄色葡萄球菌 (S. aureus)。 3M Petrifilm STX 测试片和 3M Petrifilm STX 盘用于食品和饮料行业中 DNase 阳性葡萄球菌种的计数。3M Petrifilm STX 测试片和 3M Petrifilm STX 盘组件经过净化处理，但未灭菌。
nuc-off核酸酶和DNA去除喷雾
图1。在去除RNase和dNase中，MP生物医学Nuc-Off核酸酶和DNA去除喷雾剂和竞争者T溶液的性能比较。A. RNase消除。在室温下孵育5分钟，将4μl的去除试剂和不同量的RNase（以1μl为单位）的混合物孵育；之后，加入1μlRNA，并在室温下进一步孵育15分钟，然后在含有甲醛的琼脂糖凝胶中变性和最终混合物的电泳。B. DNase消除。在室温下孵育4μl的去除试剂和不同量的DNase（以1μl）的混合物5分钟；之后，将1μl10X反应缓冲液和1μgDNA和无核酸酶的水加入总体积10μl，并在室温下进一步孵育15分钟，然后是最终混合物的琼脂糖凝胶电泳。C.去除试剂对DNA稳定性的影响。在室温下孵育15分钟，将4μl的去除试剂和1μl基因组DNA的混合物进行孵育，然后通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。D.去除试剂对RNA稳定性的影响。在室温下孵育4μl的去除试剂和1μlRNA的混合物，然后变性添加含有甲醛的琼脂糖凝胶电泳。此处显示的图仅供参考，它可能会根据不同的实验条件而有所不同。
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本演讲包含我们打算遵守1995年《私人证券诉讼改革法》的安全港规定的前瞻性陈述。本演讲中包含的所有陈述除了历史事实的陈述外，构成了联邦证券法的含义内的前瞻性陈述。这些陈述可以通过诸如“可能”，“意志”，“意志”，“可能”，“应该”，“期望”，“预期”，“预期”，“预期”，“相信”，“估计”，“搜索”，“近似”，“预期”，“预期”，“预测”，“潜在”，“继续”，“临时”，“临时”，“焦点”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“求职”，“”，“”，“”，“求职”，“”，“求职”，“”，“”，“求职”，“”，“”，“概述”，“”，“”，“概述”，“”，“”，“这些术语的复数和否定，以及其他类似含义的词。这些前瞻性陈述包括但不限于所有涉及的陈述：DNase I技术平台，包括我们专注于推进专有技术平台，以解决多个高价值癌症指示以及旨在通过靶向中性粒细胞外粒细胞外陷阱（网）来改善免疫疗法的这种平台；我们相信DNase是一种创新的肿瘤学解决方案。我们认为DNase I提供了解决多重肿瘤学迹象的机会。我们相信DNase I有可能改善当前的癌症疗法；我们目前计划的第一阶段研究；我们最初针对胰腺癌的计划，并相信这种治疗方面有很大的未满足需求；我们期望我们将在胰腺癌方面取得成功，并相信我们对证明临床意义的障碍相对较低。我们相信，针对实体瘤为重大上涨提供了机会。关于我们与VolitionRX合作的所有陈述，包括对这种合作的期望，我们制定专有的收养细胞疗法的计划，可能针对多种可靠的癌症类型和对意志资助研究计划的良好癌症类型和期望，并分享了从那里产生的任何产品的商业化和许可。以及“创新肿瘤学管道”，“关键的即将到来的里程碑”和“投资摘要”部分下的所有陈述，包括与将技术平台推进1阶段研究的预期时机有关的陈述，并预计完成了多个关键的值驾驶里程碑。
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本演讲包含我们打算遵守1995年《私人证券诉讼改革法》的安全港规定的前瞻性陈述。本演讲中包含的所有陈述除了历史事实的陈述外，构成了联邦证券法的含义内的前瞻性陈述。这些陈述可以通过诸如“可能”，“意志”，“意志”，“可能”，“应该”，“期望”，“预期”，“预期”，“预期”，“相信”，“估计”，“搜索”，“近似”，“预期”，“预期”，“预测”，“潜在”，“继续”，“临时”，“临时”，“焦点”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“”，“求职”，“”，“”，“”，“求职”，“”，“求职”，“”，“”，“求职”，“”，“”，“概述”，“”，“”，“概述”，“”，“”，“这些术语的复数和否定，以及其他类似含义的词。这些前瞻性陈述包括但不限于所有涉及的陈述：DNase I技术平台，包括我们专注于推进专有技术平台，以解决多个高价值癌症指示以及旨在通过靶向中性粒细胞外粒细胞外陷阱（网）来改善免疫疗法的这种平台；我们相信DNase是一种创新的肿瘤学解决方案。我们认为DNase I提供了解决多重肿瘤学迹象的机会。我们相信DNase I有可能改善当前的癌症疗法；我们目前计划的第一阶段研究；我们最初针对胰腺癌的计划，并相信这种治疗方面有很大的未满足需求；我们期望我们将在胰腺癌方面取得成功，并相信我们对证明临床意义的障碍相对较低。我们相信，针对实体瘤为重大上涨提供了机会。关于我们与VolitionRX合作的所有陈述，包括对这种合作的期望，我们制定专有的收养细胞疗法的计划，可能针对多种可靠的癌症类型和对意志资助研究计划的良好癌症类型和期望，并分享了从那里产生的任何产品的商业化和许可。以及“创新肿瘤学管道”，“关键的即将到来的里程碑”和“投资摘要”部分下的所有陈述，包括与将技术平台推进1阶段研究的预期时机有关的陈述，并预计完成了多个密钥值驱动的里程碑。
一种新的土壤遗迹DNA去除方法
微生物在土壤中发挥着至关重要的生态作用，但先前微生物留下的残留 DNA 会导致对活体微生物功能和多样性的估计不准确。为了解决这个问题，我们提出了一种使用 Benzonase 核酸内切酶去除土壤中残留 DNA 的新方法，并将其与广泛应用于活体微生物组研究的叠氮丙啶 (PMA) 和 DNase I 进行了比较。与 PMA 不同，Benzonase 不需要光激活，适用于土壤等不透明介质。因此，其去除土壤残留 DNA 的效率 (40%−60%) 是 PMA (0−30%) 的两倍。此外，我们的结果表明，Benzonase 在大多数土壤中的表现优于 DNase I，这可能是因为与 DNase I 相比，它的操作条件范围更广。除了更高的残留 DNA 去除效率外，Benzonase 对土壤活体微生物群落的影响较弱。随后，利用 Benzonase 去除天然土壤中的残留 DNA，结果表明，残留 DNA 去除导致微生物多样性和丰富度平均降低约 10%。值得注意的是，它导致特定类群（如芽孢杆菌和鞘氨醇单胞菌）的相对丰度发生显著变化。这些发现揭示了土壤中总微生物组和活体微生物组之间的差异。我们的研究不仅为土壤残留 DNA 去除提供了一种可靠的方法，而且强调了残留 DNA 去除对活体土壤微生物组评估的必要性，为推进土壤微生物生态学研究奠定了方法论基础。
牛骨骼肌基因组DNA
牛骨骼肌基因组DNA是一种高度完整的高分子大小DNA。它是从单个供体的单个组织中提取的，并用无DNase RNase处理以去除污染物RNA。基因组DNA精确地通过纳米体（一种分光光度计技术）测量，并存储在-80oC中。
HPV-Quant-21®定量PCR检测套件...
处理并处理所有用于执行测定法的生物样品，试剂和材料，就好像它们能够传递感染剂一样。样品必须专门用于某些类型的分析。必须在层流罩下处理样品。。用于处理样品的移液器必须专门用于此特定目的。移液器必须为正配置类型，或与气溶胶过滤器尖端一起使用。所用的尖端必须是无菌的，没有DNASE和RNass，没有DNA和RNA。必须在层流罩下处理试剂。必须以一个可以在一次会话中使用的方式制备放大所需的试剂。用于处理试剂的移液器必须专门用于此特定目的。移液器必须为正配置类型，或与气溶胶过滤器尖端一起使用。所用的尖端必须是无菌的，没有DNASE和RNass，没有DNA和RNA。避免直接与用于进行测定的生物样品试剂和材料接触。戴无粉手术手套。穿防护服（工作服和个人
