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必需REC114 – MEI4三聚体界面的结构和DNA桥接活性
启动减数分裂重组的DNA双链断裂（DSB）由包括Rec114和Mei4（RM）在内的进化套件形成，这些因素在空间和时间上调节了DSB形成。在体内，这些蛋白质形成了与高阶铬合成某些结构的大型免疫染色灶。在体外，它们形成了一个2：1的异三聚体配合物，该复合物与DNA结合以形成大型动态冷凝物。然而，缺乏对RM复合物的原子结构和动态DNA结合特性的理解。在这里，我们报告了由MEI4的N末端的Rec114的c末端的异三聚体复合物的结构模型，并由核磁共振实验支持。这种最小的复合物缺乏预测的Rec114内固有无序区域，足以结合DNA并形成浓度。单分子实验表明，最小的复合物可以桥接两个或多个DNA双链体，并可以通过远距离相互作用产生力来凝结DNA。alphafold2预测了不同分类单元的RM直系同源物的相似结构模型，尽管它们的序列相似程度较低。这些发现提供了对蛋白质和蛋白质 - 蛋白质 - DNA相互作用的保守网络的洞察力，这些网络可以形成冷凝水并促进减数分裂DSB的形成。
国家康复委员会主席的信息
DSB的工作人员向消费者提供了有关工作机票的信息，以及与全州受益的辅导员的联系信息，以便消费者可以了解工作激励措施以及工作对他们的利益的影响。NC大会为DSB分配了社区工作激励顾问（CWIC）的新全职职位。这个全职职位将为获得社会保障福利的受益人提供工作激励计划和帮助。CWIC负责咨询和教育受益人有关就业如何影响其当前福利（可能包括公共和私人健康保险，联邦，州和/或本地福利），以便个人可以为就业和自给自足做出明智的选择。这个立场在招聘过程中。
使用 CRISPR/... 的有针对性的、可调节的 DNA 损伤工具
一种使用 CRISPR/Cas9 的靶向和可调节 DNA 损伤工具。Ioannis Emmanouilidis 1、Natalia Fili 2、Alexander W. Cook 2、Yukti Hari-Gupta 1 $、Ália dos Santos 2、Lin Wang 3、Marisa Martin-Fernandez 3、Peter JI Ellis 1* 和 Christopher P. Toseland 2 * 1 肯特大学生物科学学院，坎特伯雷，CT2 7NJ，英国。2 谢菲尔德大学肿瘤和代谢系，谢菲尔德，S10 2RX，英国。3 中央激光设施，哈威尔研究中心，科学和技术设施委员会，卢瑟福阿普尔顿实验室，哈威尔，迪德科特，牛津，OX11 0QX，英国。$ 当前位置：MRC LMCB，伦敦大学学院，伦敦，WC1E 6BT，英国。 * 通讯地址：pjiellis@kent.ac.uk 和 c.toseland@sheffield.ac.uk 关键词：DNA 损伤、Cas9、双链断裂、DNA 修复 摘要 哺乳动物细胞不断遭受各种 DNA 损伤事件，从而导致 DNA 修复途径的激活。了解 DNA 损伤反应的分子机制有助于开发针对这些途径元素的治疗方法。双链断裂 (DSB) 对细胞活力和基因组稳定性特别有害。通常，DSB 修复是使用 DNA 损伤剂（例如电离辐射或基因毒性药物）来研究的。这些会在非预测性基因组位点诱发随机损伤，而这些位点的损伤剂量难以控制。此类干预措施不适合研究不同 DNA 损伤识别和修复途径如何根据局部染色质状态在特定 DSB 位点被调用。 RNA 引导的 Cas9 (CRISPR 相关蛋白 9) 核酸内切酶是介导靶向基因组改变的有力工具。基于 Cas9 的基因组干预是通过在感兴趣的基因组区域形成 DSB 实现的。在这里，我们利用基于计算机预测的定制设计的混杂引导 RNA，在整个人类基因组中诱导特定数量和位置的 DSB 的能力。这是通过重组 Cas9-引导复合物的电穿孔实现的，该复合物提供了一种在细胞培养模型中诱导受控 DNA 损伤的通用、低成本和快速方法。引言生物体最关键的过程之一是使用 DNA 损伤监视和修复机制来维持基因组完整性。这些机制可阻止细胞通过细胞分裂进展，从而将有缺陷的基因组传播给子细胞 1。如果病变得不到修复，突变就会积累，导致细胞衰老和癌症等疾病的发作。在人类细胞中每个细胞周期大约会发生 10-50 次双链断裂 (DSB) 2,3 。
crispr cas9
NHEJ修复途径是最活跃的修复机制，经常导致核苷酸（Indels）的小插入或缺失到DSB位置。由NHEJ介导的DSB修复的随机性具有重要的实际意义，因为表达Cas9和ARNG的细胞群将导致广泛的突变。在大多数情况下，NHEJ在靶DNA中产生了小散析，从而导致氨基酸框架中的缺失，插入或突变导致靶向基因的开放式读数（ORF）中的过早终止密码子。理想的最终结果是突变，靶向基因的功能损失。但是，必须通过实验验证给定突变细胞的“敲除”表型的强度。
消费者数据权利战略评论2024年7月
2019年的立法，澳大利亚政府通过了2018/19/19的国库法修正案（Righter Data Right），以创建CDR。CDR主要是通过《 2010年竞争与消费者法》和《 1988年隐私法》的修正案建立的。此修正案：▪阐明澳大利亚竞争和消费者委员会（ACCC），澳大利亚信息专员办公室（OAIC）（OAIC）办公室（DSB）（DSB）的角色，功能和权力▪概述了为消费者提供最属性的自由数据的总体目标和原理，以确保最小的消费者数据，以实现新的消费者数据，以实现新的Secter formitive formantive frestimate fraise formantive fraise formantive。保护措施是基于ACCC规则
嵌合RNA：DNA TracrRNA提高同源性
摘要 近 90% 的人类致病突变是由微小的基因变异引起的，有效纠正这些错误的方法至关重要。进行微小 DNA 改变的一种方法是提供单链寡脱氧核苷酸 (ssODN)，该单链寡脱氧核苷酸包含一个改变，并在基因组的目标位点处与靶向双链断裂 (DSB) 相结合。将 ssODN 供体与 CRISPR-Cas9 介导的 DSB 结合是引入微小改变的最简化方法之一。然而，在许多系统中，这种方法效率低下，并且会在基因连接处引入不精确的修复。我们在此报告一种使用 ssODN 和 CRISPR-Cas9 的时空定位来改进基因改变的技术。我们表明，通过将 ssODN 模板与反式激活 RNA (tracrRNA) 融合，我们可以恢复精确的基因改变，并且在体外和体内的整合度和精确度都有所提高。最后，我们表明该技术可用于与其他基因编辑工具（如转录激活因子如效应核酸酶）一起增强基因转换。
CRISPR指南RNA设计指南...
1.1通过CRISPR/CAS9通过特定地点的双链断裂（DSB）靶向DNA的基因组编辑（DSB）体现了现代生物技术的基石。随着新工具的发现和开发（例如工程核酸酶），对目标位点的挑战不断降低，随着时间的流逝，挑战[1]。 CRISPR/CAS9系统及其两个组件设置以及简单的目标程序构成可用工具箱中当前的金标准。 在该系统中，CAS9核酸酶的复合物和引导RNA（GRNA）介导了选定的目标位点的DSB诱导。 GRNA具有主要相关性，一方面介导靶DNA接收和结合，另一方面是Cas9的靶DNA裂解[2]。 GRNA的可变区域（指南）确定目标DNA结合的位点，并可以调整为感兴趣的序列。 采用该系统，诸如单一和多重编辑，表观遗传和转录调控，基因组基因局的可视化以及基础编辑的应用在大量生物中是可行的（有关详细信息，请参见评论[3-6]）。 目标选择仅需要挑战[1]。CRISPR/CAS9系统及其两个组件设置以及简单的目标程序构成可用工具箱中当前的金标准。在该系统中，CAS9核酸酶的复合物和引导RNA（GRNA）介导了选定的目标位点的DSB诱导。GRNA具有主要相关性，一方面介导靶DNA接收和结合，另一方面是Cas9的靶DNA裂解[2]。GRNA的可变区域（指南）确定目标DNA结合的位点，并可以调整为感兴趣的序列。采用该系统，诸如单一和多重编辑，表观遗传和转录调控，基因组基因局的可视化以及基础编辑的应用在大量生物中是可行的（有关详细信息，请参见评论[3-6]）。目标选择仅需要
同源修复模板 DNA 链间交联增强人类细胞中的基因编辑
CRISPR–Cas9 通过产生 DNA 双链断裂 (DSB) 并随后激活细胞 DNA 修复途径实现基因编辑。根据所参与的修复途径，结果可能包括目标基因的破坏或用恢复或引入功能的新序列替换 1 。后一种基因替换事件需要传递编码新序列的模板 DNA，其水平应支持基因替换，但不会对细胞活力产生不利影响。在转化应用中，模板分子通常由病毒载体递送。虽然有效，但病毒工作流程成本高昂、难以扩大规模且对细胞有潜在毒性。因此，使用非病毒模板 DNA 是一种有吸引力的替代方案，但非病毒模板的效率和急性毒性可能不如病毒递送 2 。改进的非病毒基因编辑将成为揭示 DNA 修复机制的有力方法、有用的实验室技术和治疗多种疾病的有前途的策略 3 。一种高效的非病毒基因编辑策略是传递核糖核蛋白（RNP）制剂，包括靶向核酸酶Cas9、单向导RNA（sgRNA）和模板分子，该模板分子包含与被编辑区域以及要修改或插入的序列的同源性4。这些RNP在基因组的目标区域引入DSB，然后通过易错末端连接（EJ）过程修复断裂末端，或通过同源性定向修复（HDR）过程修复DSB，该过程使用单独模板分子1中编码的序列解决DSB（扩展数据图1a）。使用HDR将新的DNA序列引入目标位置可以实现令人兴奋的功能获得应用5。因此，增加HDR频率的策略可能会改善结果并降低实验室和生物医学工作流程的成本。