XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemDroplet
使用液滴数字PCR
摘要：在人类诱导的多能干细胞（HIPSC）分化和增殖过程中发生的意外遗传修饰会导致肿瘤性。这是开发基于干细胞的疗法的关注点，以确保最终产品的安全性和功效。此外，常规的遗传稳定性测试方法受到低灵敏度的限制，这是一个尚未解决的问题。在这项研究中，我们使用各种测试方法（包括核分型，Cytoscanhd芯片分析，全异位测序和靶向测序）评估了HIPSC和HIPSC衍生的心肌细胞的遗传稳定性。在KMT2C和BCOR中的两个特定遗传突变是从通过全异常和靶向测序方法鉴定的17种基因变体中选择的，使用液滴数字PCR验证。根据国际协调委员会（ICH）指南，包括特异性，精度，鲁棒性和检测限制，该方法对基于干细胞的治疗产品的适用性进一步证明了相关的验证。我们的液滴数字PCR结果显示出高灵敏度和定量检测基因突变的准确性，而常规QPCR无法避免误报。总而言之，液滴数字PCR是一种高度敏感且精确的方法，用于评估具有致肿瘤潜力开发基于干细胞的疗法的突变的表达。
通过介电油中的水滴进行电滴来将基因递送到哺乳动物细胞中的机理研究div>
，我们基于通过介电油中的水滴进行了短路，开发了一种新的方法，用于传递可渗透细胞的分子。将细胞悬架液滴放在具有强烈直流电场的一对电极之间，液滴弹跳和液滴变形，这会导致瞬时短路，这取决于电场强度。我们已经证明了使用短路成功地转移了各种哺乳动物细胞。但是，分子机械主义仍有待阐明。在这项研究中，用Jurkat细胞进行流式细胞仪测定。用液滴弹跳或短路处理含有jurkat细胞的水滴和带有荧光蛋白的质粒。短路可导致24小时孵育后足够的细胞活力和荧光蛋白表达。在很重要的情况下，液滴弹跳并未导致成功转染基因转染。通过摄取可耐细胞荧光染料yo-pro-1和钙离子的涌入来研究瞬态膜孔的形成。结果，短路增加了Yo-Pro-1氟-1荧光强度和细胞内钙离子浓度，但液滴弹跳没有。我们还研究了内吞作用对转染的贡献。用内吞作用抑制剂对细胞的预处理以依赖性的方式降低了基因转染的效率。此外，使用pH敏感的染料偶联物表明在短路后内体中形成了酸性环境。内吞作用是细胞内递送外源性DNA的可能机制。
精子运动和液滴粘附：一种新颖的方法可以使居住的男性生育测试成为现实
“这样想：活跃的游泳精子可以帮助液滴放手，”机械和机电一体化工程学教授兼滑铁卢纳米技术研究所执行董事Sushanta Mitra博士说。“精子越活跃，液滴棒的越少。”
使用液滴数字PCR检测尿液循环肿瘤DNA，以预测肝细胞癌复发
1肝脏外科和移植系，肝癌研究所，中国福丹大学，上海200032，中国肝癌医院。 2癌变和癌症入侵的关键实验室（Fudan University），教育部，上海200032，中国。 3中国医学学院的肝癌复发和转移的肝癌复发和转移单元，中国北京100010。 4肝癌研究所，肝癌研究所，中山医院，福丹大学，上海200032，中国。 5林克西亚人民医院，林克斯市731100，普通外科部，中国。 6 Fudan University，Fudan University，上海200032，中国。 7基因工程的国家主要实验室，福丹大学，上海200032，中国。 8上海福丹大学中心医院重症监护室，200032年，中国。 ＃作者同样贡献。1肝脏外科和移植系，肝癌研究所，中国福丹大学，上海200032，中国肝癌医院。2癌变和癌症入侵的关键实验室（Fudan University），教育部，上海200032，中国。3中国医学学院的肝癌复发和转移的肝癌复发和转移单元，中国北京100010。4肝癌研究所，肝癌研究所，中山医院，福丹大学，上海200032，中国。 5林克西亚人民医院，林克斯市731100，普通外科部，中国。 6 Fudan University，Fudan University，上海200032，中国。 7基因工程的国家主要实验室，福丹大学，上海200032，中国。 8上海福丹大学中心医院重症监护室，200032年，中国。 ＃作者同样贡献。4肝癌研究所，肝癌研究所，中山医院，福丹大学，上海200032，中国。5林克西亚人民医院，林克斯市731100，普通外科部，中国。 6 Fudan University，Fudan University，上海200032，中国。 7基因工程的国家主要实验室，福丹大学，上海200032，中国。 8上海福丹大学中心医院重症监护室，200032年，中国。 ＃作者同样贡献。5林克西亚人民医院，林克斯市731100，普通外科部，中国。6 Fudan University，Fudan University，上海200032，中国。 7基因工程的国家主要实验室，福丹大学，上海200032，中国。 8上海福丹大学中心医院重症监护室，200032年，中国。 ＃作者同样贡献。6 Fudan University，Fudan University，上海200032，中国。7基因工程的国家主要实验室，福丹大学，上海200032，中国。8上海福丹大学中心医院重症监护室，200032年，中国。 ＃作者同样贡献。8上海福丹大学中心医院重症监护室，200032年，中国。＃作者同样贡献。
使用液滴数字聚合酶链反应
重组腺相关病毒（RAAV）是通常用于基因治疗的病毒载体。残留的宿主细胞DNA是一种与感染和致癌性风险有关的杂质。因此，需要对其进行监控以进行质量控制。我们旨在开发针对18S核糖体RNA（RRNA）基因的液滴数字聚合酶链反应（DDPCR）方法，以定量残留宿主细胞DNA。使用两组共享C-末端的启动对确定18S rRNA基因的拷贝数。对于将18S rRNA基因的拷贝数转化为基因组DNA的质量浓度，HEK293基因组DNA中18S rRNA基因的准确拷贝数通过与三个参考基因的拷贝数（EIF5B，DCK和HBB的拷贝数进行比较）确定。结果表明，回收了88.6–97.9.9％的HEK293基因组DNA，被回收到RAAV制剂中。将基于DDPCR的分析应用于RAAV制剂，以定量残留的宿主细胞DNA作为杂质。我们的发现表明该测定可用于RAAV产品中残留宿主细胞DNA的定量和尺寸分布。
在Pyro -photovoltaic Fe型Linbo3平台
朝着工业和学术的角度实现强大的潜在应用。表面上操纵缓冲液和有机溶剂对于许多生物，医学和/或化学操作都是基础。[1-9]用于迅速现场诊断和治疗，临床诊断，基于细胞的应用以及检测或感测的护理点应用是使用情况的例子。[10]大量精力集中在微型化和自动化上，也可以将它们视为远程医疗应用的可能路线，提高效率并减少所涉及的材料总量。例如，在进行诊断测试的情况下，涉及微流体芯片涉及的生物材料和化学试剂的减少可以对比化学成本，增加总加工测试的数量，加快时间的加快时间，并且在自动化的情况下，还可以降低交叉污染和维持的风险。基于智能表面的不同解决方案已被提出，用于控制液滴运动并开放两相油 - 水分离，生物技术，自我清洁和抗质应用，只是为了引用很少的。[11-14]在平面表面上，可以使用多种开发的方法来控制液滴的运动，例如表面声波，磁对照表面，热毛细血管，介电粒细胞感和电trowetting-n-eilectric芯片。[25,26][15–21]在后一种情况下，电极的像素尺寸限制了可以操纵的最小液滴尺寸，以克服该问题，已经提出了轻图案的电解图，以在开放的，毫无曲线的，特征和光导能的表面上进行液滴操纵。[22]创建液体操作表面梯度的替代方法包括对外部刺激的响应改变表面电荷密度和质地的改变（例如，磁/电场）以及表面富集，具有化学功能基团的表面群体，以动态地控制表面的性能，[23,24]越来越需要创建平坦的模式，或者在平坦的范围内屈曲，或者是柔韧性的，或者是柔韧性的。
人类多能干细胞中的复发遗传异常：靶向液滴数字PCR中培养上清液中的定义和常规检测
人多能干细胞（HPSC）的基因组完整性对于研究和临床应用至关重要。然而，在HPSC产生和常规培养物以及基因编辑后，遗传差异可能会积累。应定期监测它们的发生，但是评估HPSC基因组完整性的当前测定法不完全适合这种常规筛查。为了解决这个问题，我们首先对100多个出版物和鉴定的738例复发遗传异常（即至少在至少有5个不同的不同科学出版物中发现的重叠异常重叠）进行了大规模荟萃分析。然后，我们基于液滴数字PCR技术开发了一项测试，该测试可能可能检测到从培养上清液样品中提取的DNA中，这些HPSC复发遗传异常的90％以上。该测试可用于常规筛选HPSC中的基因组完整性。
引用：Baiou Shi.，等人。“纳米悬浮液滴动态扩散的毛细管力计算”。Medicon Engineering Themes 8.2（2025 年）：
图 1：t = 0 时初始模拟配置的正面和顶视图（Pb 原子为灰色；Cu 原子为黄色）。该图为 R 0 = 42 nm 液滴，其中两个 Cu 粒子与 Cu (001) 表面接触，扩散方向沿 x 轴，自由表面法线沿 z 轴，液滴和粒子的圆柱轴均沿 y 轴对齐。模拟单元的周期性重复长度设置为 L x = 300 nm 和 L y = 5 nm。
诊所环境中感染控制指南
适用于已知或怀疑会通过液滴途径传播的病原体感染的患者。液滴预防措施可防止大液滴颗粒（尺寸> 5微米）传播的生物体的扩散。这些液滴颗粒是在患者咳嗽，说话或打喷嚏时会产生的，不会长时间悬浮在空中，并且只能在与患者的短距离内（通常在1米以内）推进
液滴数字PCR允许在鼠异种移植模型或经过批准的CD19 CAR T细胞处理的患者
摘要背景：基因设计的嵌合抗原受体（CAR）T淋巴细胞是有希望的癌症治疗工具。目前批准了四种汽车T细胞药物，包括Tisagenlecleucel（Tisa-Cel）（Tisa-Cel）和Axibabtagene-Ciloleucel（AXI-CEL），所有靶标CD19都被批准用于治疗B细胞恶性肿瘤。流式细胞仪（FC）仍然是使用重组生物素化靶蛋白的单层CAR T细胞的标准。尽管如此，需要其他工具，而挑战是开发一种简单，相关，高度敏感，可重现和廉价的检测方法。分子工具可以满足这种需求，以特别监视长期持续的汽车T细胞。方法：基于2个实验性CAR T细胞构建体IL-1RAP和CS1，我们设计了2个定量数字液滴（DDPCR）PCR分析。通过针对4.1BB/CD3Z（28BBz）或28/CD3Z（28Z）结面积，我们证明PCR分析可以应用于经过批准的CD19 CAR T药物。28Z和28BBZ DDPCR分析允许确定每个单元格的平均矢量拷贝数（VCN）。我们确认VCN取决于感染的多样性，并证实了我们的实验性或GMP样IL-1RAP CAR T细胞的VCN是否满足了临床部门的要求（<5 VCN/细胞），类似于批准的AXI-CEL或TISA-CEL药物。结果：28BBz和28Z DDPCR测定法应用于2个肿瘤（急性髓样白血病（AML）或多发性骨髓瘤（MM）异种移植物人源化NSG小鼠模型，使我们能够量化早期膨胀（到注射后的T细胞30）。最后，循环汽车T有趣的是，在初始膨胀之后，当肿瘤挑战循环的CAR T细胞时，我们注意到了第二个膨胀阶段。对骨髓，脾脏和肺的研究表明，在先前注射白血病细胞系的小鼠中，在这些组织中散布更多的CAR T细胞。