Pen/Strep:青霉素/链霉素 RPMI 1640:Roswell Park Memorial Institute 培养基(Thermo Fisher,目录号 21875-034) DMEM/F-12:杜氏改良 Eagle 培养基/营养混合物 F-12(Thermo Fisher,目录号 31330-038) IMDM:Iscove 改良杜氏培养基(Thermo Fisher,目录号 21980-032) DMEM,高葡萄糖:杜氏改良 Eagle 培养基,高葡萄糖(Thermo Fisher,目录号 41965-039) DMEM,高葡萄糖,GlutaMAX TM:杜氏改良 Eagle 培养基,高葡萄糖(Thermo Fisher,目录号 61965-026)
米兰 - 意大利https://orcid.org/0000-0002-9297-3242 Scopus作者ID:36461188300工作经验2015年 - 人文学院临床研究所,药理学和脑病理学实验室,rozzano(MI),意大利。主管:Michela Matteoli教授。2023-欧洲委员会研究执行机构的专家评估员和审阅者。2023-2024访问者,分子肿瘤学和免疫学实验室,IFOM,意大利米兰。主管:Massimiliano Pagani教授。2013-2015,意大利帕多瓦大学帕多瓦大学人卫生研究所和生物医学科学系适应性豁免实验室研究员。主管:Antonella Viola教授。2007-2013 Dulbecco Telethon Institute&Mario Negri药物研究所,意大利米兰Dulbecco Telethon Institute&Mario Negri研究所。 主管:Valentina Bonetto博士。 2007年意大利巴里大学巴里大学研究生研究生。 主管:Francesco Giorgino教授。2007-2013 Dulbecco Telethon Institute&Mario Negri药物研究所,意大利米兰Dulbecco Telethon Institute&Mario Negri研究所。主管:Valentina Bonetto博士。2007年意大利巴里大学巴里大学研究生研究生。 主管:Francesco Giorgino教授。2007年意大利巴里大学巴里大学研究生研究生。主管:Francesco Giorgino教授。
Joanna Szczurkowska, 1,8 Seong-Il Lee, 1,8 Alan Guo, 1 Andrzej W. Cwetsch, 4,5 Tanvir Khan, 1 Sneha Rao, 1 Gerd Walz, 2 Tobias B. Huber, 3 Laura Cancedda, 4,6 Sophie Pautot, 7 and Maya Shelly 1,9, * 1 Department of Neurobiology and行为,Stony Brook大学,Stony Brook,纽约州11794-5230,美国2医学系,大学医学中心弗莱堡大学医学院,弗莱堡大学医学院,弗莱堡大学,弗莱堡IM BREISGAU,德国3 III。Department of Medicine, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany 4 Local Micro-environment and Brain Development Laboratory, Istituto Italiano di Tecnologia, Genova, Italy 5 Universita` degli Studi di Genova, Genova, Italy 6 Dulbecco Telethon Institute, Italy 7 ITAV-CNRS USR 3505, Toulouse 31106,法国8这些作者同等贡献9铅联系 *通信:maya.shelly@stonybrook.edu https://doi.org/10.1016/j.cellerep.2020.03.03.083
缩写 定义 3D 三维 ABS 丙烯腈-丁二烯-苯乙烯 AC 交流电 ALARA 尽可能低的合理值 AMF 增材制造设施 ARS 急性辐射综合症 BER 碱基切除修复 CME 日冕物质抛射 CNT 碳纳米管 CRS 慢性辐射综合症 DAP 剂量面积乘积 DAPI 4',6-二氨基-2-苯基吲哚 DC 直流电 DEP 介电泳 DMEM 杜氏改良鹰培养基 DNA 脱氧核糖核酸 DSB 双链断裂 EDTA 胰蛋白酶-乙二胺四乙酸 EMU 舱外机动装置 ESA 欧洲航天局 ESD 静电放电 EVA 舱外活动 GCR 银河宇宙辐射 Gy 格雷 HDBPE 高密度硼化聚乙烯 HDPE 高密度聚乙烯 HZE 高电荷 Z 和高能 ICRP 国际委员会放射防护 ICRU 国际辐射单位与测量委员会
摘要。背景/目的:伊维菌素最初用作兽药,对各种寄生虫均有疗效。胰腺癌是目前最难治愈的疾病之一。本研究旨在证明重组蛋氨酸酶 (rMETase) 和伊维菌素的组合在体外消灭人胰腺癌细胞方面的协同作用。材料和方法:在添加了 10% 胎牛血清和 1 IU/ml 青霉素/链霉素的杜氏改良伊格尔培养基 (DMEM) 中培养 MiaPaCa-2 人胰腺癌细胞。使用 WST 试剂测定 rMETase 单独使用、伊维菌素单独使用及其组合对 MiaPaCa-2 细胞活力的降低。体外检查了四个实验组:未治疗的对照组;伊维菌素单独使用;rMETase 单独使用;伊维菌素与 rMETase 联合使用。结果:伊维菌素对MiaPaCa-2细胞的IC 50为5.9μM,rMETase对MiaPaCa-2细胞的IC 50为2.93U/ml,伊维菌素(5.9μM)加rMETase(2.93U/ml)可显著降低MiaPaCa-2细胞的存活率,
所有的努力都是为了最大程度地减少苦难,同时还最大程度地减少了使用的动物数量。60只动物接受了缺血/再灌注手术程序(如下所述)。大鼠分为六组。对照组(C组,n = 15)接受了手术程序,但没有接受任何治疗干预措施,因为它们被DMEM-F12(Dulbecco修饰的Eagle Medium/ Mudientrient Mediument/ Dutrient Medient Cimbure FIF-12)接种了无菌输注(Gibco™Invitrogen Corporation,USA,USA,USA)。此外,一组被用作对照,旨在研究NGAL作为IRI生物标志物的准确性的潜在使用。健康组(H组,n = 15)保持在相同的条件下,但未提交手术程序或接受任何治疗。在其余三组中,进行缺血/再灌注手术程序,以及辛伐他汀(操纵,Viaflora,butitiba,curitiba)和/或ADSC输注,口服Simvastatin(S,n = 15),ADSC Infusion(SC,n = 15),ADSC Infusion + 1 SCC + SC + SC + SC + SC + SSC + SC + SC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC,
Wnt3a,R-Spondin1和Noggin(WRN)调节培养基。15在简短的L-WRN(ATCC CRL-3276)细胞中,在10 cm板上培养了带有培养基(Dulbecco修改的Eagle的培养基[DMEM,Fisher],0.5 mg/ml G418(Thermofisher),0.5 mg/ml hygromycin b(Hygrofomycin B(Hygroforisher),1%的(生命),(life offermin),/strimies contrymin和1%(life ottercin),(thermofisher)的0.5 mg/mL G418(Thermofisher),/STRECTCILIN(LIFERCTIN),症状(Themerofisher),/症胎牛血清)。在10%的L-WRL细胞(ATCC,CRL-3276)中已在10 cm板中播种在培养基中(没有G418和Hygromycin B),将细胞孵育3-4天。当细胞为80%-90%汇合时,将培养基替换为10 mL新鲜培养基,并将细胞孵育24小时。收集培养基,以1000×g离心4分钟,通过0.22-PM无菌过滤器,并存储在-80°C下。将另外10毫升的新鲜培养基添加到板上并在24小时后收集,以使用相同的步骤使第二批条件培养基。在使用前将第一,第二和第三批条件介质混合在一起,以制备100%WRN条件介质。
摘要。背景/目标:Irinotecan(IRN),一种拓扑异构酶I抑制剂和SN-38的Pro-Drug,是对结肠癌的一线治疗,作为FOLFIRI和FOLFOXIRI组合化学疗法的一部分。但是,IRN会导致限制剂量的不良事件,例如中性粒细胞减少和腹泻。有时需要降低剂量,这会降低功效。重组蛋白酶(RMETASE)靶向癌症,蛋氨酸成瘾的基本基础,称为霍夫曼效应,并增强了许多化学疗法药物的功效。本研究确定了与IRN结合给药时RMETASE的功效。材料和方法:通过在Dulbecco改良的Eagle的培养基(DMEM)中以每孔1×10 3的细胞在96孔板中培养HCT-116人结直肠癌细胞系来评估细胞活力。随后,将HCT-116细胞用浓度增加的SN-38(IRN的活性形式)处理,范围从0.5 nm到32 nm,RMETASE范围为0.125至8 U/mL。在处理72小时后,仅针对HCT-116细胞单独使用SN-38的半Ximimal抑制浓度(IC 50)。使用IC 50浓度RMETASE,我们确定了SN-38的IC 50与RMETASE结合使用。用WST-8试剂用细胞计数kit-8确定细胞活力。 结果:仅HCT-116细胞的RMETASE的IC 50为0.55 U/ml,IRN>的IC 50用WST-8试剂用细胞计数kit-8确定细胞活力。结果:仅HCT-116细胞的RMETASE的IC 50为0.55 U/ml,IRN>的IC 50
ATP ATP腺苷-5'-三磷酸凸轮钙调蛋白CARQ CAQ+激活的Rho蛋白,带有嵌入的IQP Ceru ceru cerulean,相当于CFP CFP CFP CyAn荧光蛋白 Dulbecco's modified eagle medium FBS Fetal Bovine Serum FKBP12 12-kDa FK506 and rapamycin-binding protein FRB FKBP-rapamycin binding domain FRET Fluorescence resonance energy transfer GST Glutathione S-transferase His Polyhistidine-tag IRES Internal ribosomal entry site LB Luria Broth LOV Light-oxygen-voltage域,lov2域Lovs1K Lov2结构域与刺激1 c末端碎片MCS多个克隆位点MLCKP肌球蛋白轻链激酶激酶肽MRFP单体红色荧光蛋白相当于RFP,相当于RFP NES核出口NLS NLS NLS信号NLS信号NLS核定位PBS PBS PBS磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐酶磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐磷酸盐反应pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu pdbu PKC Protein kinase C pLyn Palmitoylation sequence of Lyn kinase RFP Red fluorescent protein, equivalent to mRFP SDS-PAGE Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis SH3 SRC Homology 3 Domain TEV Tobacco etch virus TEVp Tobacco etch virus protease TS Temperature-sensitive tsTEVp Temperature-sensitive tobacco蚀刻病毒蛋白酶tvmvp烟草静脉斑点病毒蛋白酶蛋白酶ven venus,相当于YFP YFP YFP黄色荧光蛋白,相当于Ven
材料。Fmoc-β-amino acids, including Fmoc- L -β-homoalanine, Fmoc- L -β-homoisoleucine, Fmoc- L -β-homoleucine, Fmoc- L -β-homophenylalanine, Fmoc-(1S,2S)-2-aminocyclopentane carboxylic acid, Nβ-Fmoc-Nω-Boc- L -β-homolysine, Fmoc-O-tert-butyl- L -β-homoserine, and Fmoc-α-amino acids, including Fmoc-glycine, Fmoc- L -alanine, Fmoc- L -isoleucine, Fmoc- L - leucine, Fmoc- L -phenylalanine, Fmoc-O-tert-butyl- L -serine, FMOC-L-β-双晶,FMOC-L-主要酸β-TERT-丁基酯,FMOC-L-谷氨酸γ-tert-叔丁基酯,Nα-FMOC-Nε-boc-l-赖氨酸是从Chem-impex International,Inc.(Wood Dale,Inc.,IL,USA,USA,USA)购买的。fmoc-l-脱毛氨酸是从热科学化学品购买的。FMOC-L-Norvaline购自Santa Cruz Biotechnology。hatu是从奥克伍德化学品获得的。Tentagel S RAM FMOC购自Advanced Chemtech(肯塔基州路易斯维尔)。Menadione,N,N-二异丙甲胺,Mueller Hinton肉汤和磷酸二氮的磷酸钠,是从Sigma-Aldrich(密苏里州圣路易斯)获得的。3-(n-甲磷脂)丙烷磺酸(MOPS)获自Fisher Scientific(宾夕法尼亚州匹兹堡)。2,3-双(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-2H-四唑-5-羧基(XTT)购自从Invitrogen购买。Gibco Brand RPMI 1640粉末(含有苯酚红和L-谷氨酰胺,没有碳酸氢钠或HEPES)和Dulbecco的磷酸盐缓冲盐水(DPB,无钙或镁)是从Thermo Fisher Scientific(MA)获得的。使用Millipore过滤系统纯化水(18.2MΩ)。细胞滴度GLO 2.0分析套件来自Promega(WI)。