摘要目的美国牙髓医生协会建议在再生牙髓治疗中使用氢氧化钙(CA(OH)2)或三重抗生素糊(TAP)作为首选药物。尽管两种药物均表现出极好的抗菌特性,但当组合使用时,它们对人牙浆干细胞(HDPSC)的生存能力的影响仍然不确定。先前的研究表明,在某些浓度下,CA(OH)2和TAP都可能对细胞有害。因此,它的目的是评估CA(OH)2,TAP及其联合应用对HDPSC在本研究中的可行性的影响。材料和方法的原始培养的HDPSC达到80%的功能,并在第3至4次的通道中进行了24小时的饥饿。随后,将它们培养在补充Ca(OH)2的介质中,以0.1和1 mg/ml的浓度点击,Ca(OH)2的组合和同等浓度的TAP和Dulbecco的修改后的Eagle培养基组合,并以等效浓度为单位。使用定量3-(4,5-二甲基二唑-2-基)评估HDPSC的生存力和形态 - 2,5-二苯基溴化物溴化物分析和定性4',6-Diamidino-2-苯基吲哚构成。统计分析首先,通过单向方差分析分析数据,然后进行Bonferroni Post hoc,以比较组之间。所有测试均以95%的显着性水平进行(p <0.05)。在这项研究的结果中,在所有组中都观察到HDPSC的生存力的显着变化,在1 mg/ml的Ca(OH)2 tap的组合中记录的最低生存力(P <0.05)。结论CA(OH)2,TAP及其组合对HDPSC没有毒性,并且在CA(OH)2 tam the hdpscs的可行性中,其组合的使用优越(在0.1 mg/ml组中)。
脐带冷冻摘要(UCC)及其冻干形式(LUCC)包含许多生物学活性成分,包括生长因子,细胞因子和其他调节分子,可能对细胞产生抗凋亡作用。这项研究旨在确定这些样品是否可以降低健康细胞中的凋亡水平,这在化学治疗剂(例如阿霉素)可能诱导凋亡的情况下特别相关。评估脐带冷冻摘要的潜在保护作用,用阿霉素(已知的凋亡诱导剂)处理的L929细胞系被选为评估UCC和LUCC抗凋亡特性的模型。在实验中,通过添加阿霉素的含量在标准的Dulbecco改良的鹰培养基(DMEM)中培养L929细胞。实验结果表明,与单独用阿霉素治疗的组相比,与单独使用阿霉素治疗相比,L929细胞的胎牛血清(FBS),UCC和LUCC的添加显着降低了L929细胞的凋亡水平。在带有UCC和LUCC的样品中,凋亡水平与FBS组中的凋亡水平相当,表明两种形式的脐带冷冻摘要都具有潜在的支持性和抗凋亡作用。这些发现表明,冷冻摘要及其冻干形式都可以用作减少凋亡的有效药物,从而维持其活性成分的稳定性,甚至在脊椎动物后。结果支持脐带冷冻摘要在涉及阿霉素等化学疗法中的潜在使用,以减轻健康细胞中凋亡的凋亡并减少毒性副作用。需要进一步的研究来阐明这些提取物的作用机制并评估其在体内的功效,这可能为其在肿瘤治疗和其他医疗领域中的应用打开新的机会。
摘要:对骨再生的可生物降解支架的兴趣日益增加,需要研究适合脚手架形成的新材料。聚(乳酸)(PLA)是一种通常用于生物医学工程的聚合物,例如在组织工程中作为可生物降解的材料。但是,PLA沿其降解时间的机械行为仍未得到很好的探索。因此,需要研究在生理培养基中孵育的PLA支架的机械性能,以表明PLA的潜力被用作可生物降解的脚手架形成的材料。本研究的目的是确定孵育前后PLA支架的机械性能,并应用构造材料模型进行进一步的行为预测。由3D打印机“ Prusa I3 Mk3s”打印了两组PLA支架,并通过紫外线和乙醇溶液进行了灭菌。在DMEM(Dulbecco的改良Eagle培养基)中孵育第一套标本,为60、120和180天,以保持36.5°C的温度。在“ Mecmesin Multitest 2.5-I”测试架上进行压缩测试后,确定了支架的机械性能,并使用在两种不同的速度模式下施加的力。获得的数据曲线与超弹性材料模型拟合,用于模型适用性研究。将第二组样品在PBS(磷酸盐缓冲盐水)中孵育20周,并用于聚合物降解研究中。获得的结果表明,在预测的新骨组织形成周期中,PLA支架的机械性能在生理培养基中孵育过程中不会降低,尽管水解从一开始就开始并随时间增加。pla作为一种材料似乎适合在骨组织工程中使用,因为它允许具有高机械强度的生物相容性和可生物降解的支架,这是有效组织形成所需的。
先前已从皮肤活检中收获了原代真皮犬成纤维细胞。使用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT) 对真皮犬成纤维细胞进行永生化,以从每个供体 (PDK4 野生型或 wt/wt、PDK4 杂合子或 wt/del、PDK4 纯合子或 del/del) 中创建永生化细胞系。这些细胞将在含有 10% 胎牛血清和 1% 抗生素抗真菌剂的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基的 6 孔板中接种和培养。将使用 QuickExtractTM DNA 提取溶液提取 DNA。将使用 Thermo Scientific NanoDropTM 1000 分光光度计对 DNA 进行分光光度定量。提取 DNA 后,将对 PDK4wt/wt 和 PDK4del/del 细胞中的 PDK4 基因进行 PCR 扩增。扩增后,将使用 DNA Clean & Concentrator™-25 试剂盒纯化 PCR 产物以进行裸 DNA 切割反应。兽医学学生将测试一种名为 KKH 的新酶,它是 Cas9 变体,可在不同的 PAM 或识别位点切割 DNA。我们使用计算方法确定 KKH 将在 PDK4 基因中所需的切割位点切割,从而有效地为插入双链寡脱氧核苷酸 (dsODN) 探针腾出空间。该 DNA 片段将通过同源重组将缺失的 16 个碱基对添加到基因中。已经设计了两个 dsODN,它们包含“丢失的外显子”序列以及与 DCM1 相关的缺失的 16 个碱基对,并将通过核转染反应测试它们是否掺入细胞 DNA 中。dsODN1 由 DCM1 突变两侧的 300 个碱基组成,dsODN2 由突变两侧的 350 个碱基组成。正向和反向引物组将由 Integrated DNA Technologies(IDT,美国爱荷华州科勒尔维尔)合成。将对每个引物组进行 PCR 梯度,退火范围为 dsODN1 的 55°C 至 67°C 和 dsODN2 的 54°C 至 64°C。目标是将缺失的 PDK4 片段插入切割的 DNA 中,并将在体内缺失 16 个碱基对的成纤维细胞中使用核转染试验进行测试。此后,将从细胞中提取 DNA 并评估整合效果。