图6。测量药物对ML算法和手动评分测量的FST行为的影响。在药物治疗后手动和ML算法评分之间的比较。将ML算法与手动评分进行比较时,对于在FST中评估的任何行为(固定性:F(1,42)= 0.31 = 0.31,P = 0.579;游泳:F(1,42)= 1.5,P = 0.227; p = 0.227; climbing; cligbbing:f(1,42)= 0.642)= 0.642)= 0.642 = 0.642 = 0.642 = 0.642 = 1.642 = 0.642)。 与FST中FLX(n = 8)和DMI(n = 8)的影响一致的文献一致,这两种方法都成功识别出:(a)与抗抑郁药相比,与车辆组相比,与抗抑郁剂相比,固定时间的减少(f(2,42)= 19.42,p <0.0001)与抗抑郁剂(Man flys flys:Man vsse vs. vsse:P <0. 000)。 0.0003 ml:车辆与DMI,p = 0.007;车辆与FLX,p = 0.003)(b)SSRI FLX优先增加游泳行为(F(2,42)= 13.34,p <0.0001。 手册:车辆与FLX,P = 0.002。 ml:车辆与FLX,p = 0.018); (c)TCA DMI优先提高攀岩行为(F(2,42)= 13.02,p <0.0001。 手册:车辆与DMI,p = 0.0003。 ml:车辆与DMI,p = 0.008)。 双向方差分析,然后使用Dunnett的多次比较测试。 数据表示为平均值±S.E.M. *p <0.05,** p <0.01,*** p <0.001,**** p <0.0001与车辆处理。。与FST中FLX(n = 8)和DMI(n = 8)的影响一致的文献一致,这两种方法都成功识别出:(a)与抗抑郁药相比,与车辆组相比,与抗抑郁剂相比,固定时间的减少(f(2,42)= 19.42,p <0.0001)与抗抑郁剂(Man flys flys:Man vsse vs. vsse:P <0. 000)。 0.0003ml:车辆与DMI,p = 0.007;车辆与FLX,p = 0.003)(b)SSRI FLX优先增加游泳行为(F(2,42)= 13.34,p <0.0001。手册:车辆与FLX,P = 0.002。ml:车辆与FLX,p = 0.018); (c)TCA DMI优先提高攀岩行为(F(2,42)= 13.02,p <0.0001。手册:车辆与DMI,p = 0.0003。ml:车辆与DMI,p = 0.008)。双向方差分析,然后使用Dunnett的多次比较测试。数据表示为平均值±S.E.M.*p <0.05,** p <0.01,*** p <0.001,**** p <0.0001与车辆处理。
图 5. AB801 与奥沙利铂 (OXA) 和抗 PD-1 (PD-1) 联合使用可显著降低肿瘤体积,与双药 OXA + PD-1 相比,可提高存活率。C57BL/6 小鼠皮下注射 1x10 6 MC38 细胞。当肿瘤达到 ~100 mm 3 时开始治疗,每组 n=10 只小鼠。OXA 以 10 mg/kg Q7DX4 腹腔注射给药,抗 PD-1 或同种型对照以 10 mg/kg Q5D 腹腔注射给药,AB801 以 30 mg/kg BID 口服给药。A) 各治疗组的总肿瘤体积。单药 AB801 治疗未观察到肿瘤生长的显著差异。使用混合效应模型和 Dunnett 多重比较检验计算统计学显着性。三联体 vs. OXA + PD-1 的 p = 0.0118。点代表平均值 ± SEM。B) 存活率,肿瘤大于 2000 mm 3 的动物被视为已达到临床终点。显著性通过 Mantel-Cox 检验确定。三联体 vs. OXA + PD-1 的 p = 0.0419。C) 蜘蛛图显示每只动物的肿瘤体积和每次治疗的完全消退 (CR) 次数。虚线表示治疗结束。
图1:RBP4 CRE -HM3DQ和RBP4 CRE -HM4DI DREADD激活A,B,兴奋性(蓝色)和抑制性(绿色)DREADD受体和实验程序的电生理验证。补丁钳电生理记录是连续进行的。在恒定的ACSF应用下,在5和10分钟下进行了两次基线记录,然后进行CNO给药,并在申请后2、5和10分钟进行三个记录,然后进行冲洗步骤。在最后一步中,获得了不同时间点的控制记录。c,RBP4 CRE -HM3DQ膜电压响应的代表性示例。d,CNO给药前后的输入输出曲线,以响应当前应用的增加。灰色代表,CNO给药后的蓝色痕迹。在RBP4 CRE -HM3DQ脑切片中CNO给药之前和之后,记录的神经元的膜电阻。基线和CNO管理之间没有显着差异(左)。CNO给药前后记录的神经元的静止膜电位。在CNO给药后,膜被概念性去极化(右)。n = 7只小鼠,单向方差分析通过邓内特的多重比较测试。e,RBP4 CRE -HM4DI膜电压响应的代表性示例。
摘要 将生产基础转变为更可持续的农业是我们这个时代的重大挑战之一。东欧目前的冲突对农产品市场产生了重大影响,导致农业用肥料的准入受限,成本大幅上涨。这种情况引起了国际社会对粮食短缺的担忧,依赖肥料进口的国家需要找到机制和新的技术途径来减少对国际市场的依赖。使用与微生物结合的碎石(土壤再矿化剂)是一种重要的替代方案,可以降低成本、减少对环境的影响并减少对农业投入的外部依赖。这项研究的目的是评估不同类型的土壤施肥投入(碎石 - 再矿化剂、有机物质和常规 - NPK)的结果、藜麦种植(藜麦)的生产参数以及作物的营养成分。实验在温室中进行,对数据进行了方差分析、Dunnett 检验、复杂对比和多变量分析。结果表明,使用再矿化剂处理过的作物灌浆和藜麦产量、土壤肥力和地上部分养分含量均显著增加。含有再矿化剂和有机堆肥混合物的处理方法优于未添加这些投入的方法,表明这些来源之间存在正向相互作用。这种方法可能有助于采用新技术,尤其是在当前可溶性肥料供应不足的情况下。使用当地地质来源(碎石)可以减少对进口肥料的依赖,从而有助于提高各国的农业粮食主权,并在地方和全球层面遵守农业生态学原则。© 2022,国际数学地球科学协会。
图 1 CT26 细胞中白蛋白摄取的特征。(A)将细胞与 FITC 标记的白蛋白一起孵育。通过流式细胞术测定 FITC 阳性细胞(散点图,R2)和平均 FITC 荧光强度(条形图)(ex/em:488/530 nm,荧光强度标准化为自发荧光对照)。(B)通过流式细胞术测定内吞抑制剂 M b CD、CHP 和 EIPA(1 小时预处理)对 3 小时后 FITC 标记白蛋白摄取的影响。(A)和(B)中的值是三个独立实验的平均值 SD。通过单因素方差分析和 Dunnett 多重比较检验检验统计学显着性(* p < 0.05,** p < 0.01 和 *** p < 0.001)。 (C) 通过共聚焦显微镜验证了 FITC 标记白蛋白 (绿色) 的摄取和三种内吞抑制剂的影响。细胞核 (蓝色) 和膜 (红色) 分别用 DAPI 和 WGA 共染色。图像显示所有三个通道的叠加。 (D) 未经治疗的小鼠的 sc CT26 肿瘤中白蛋白含量的免疫组织化学分析 (用 20 和 63 物镜进行的显微镜检查)。细胞核和白蛋白分别用苏木精 (紫色) 和 3,3 0 -二氨基联苯胺 (棕色) 显影。 (E) 用 16.5 mg kg 1 荧光素标记的马来酰亚胺 (绿色) 治疗 CT26 小鼠。30 分钟和 5 小时后收获肿瘤,然后对细胞核 (DAPI,蓝色) 和血管 (内粘蛋白,红色) 进行免疫荧光染色。使用 40 倍物镜通过荧光显微镜进行评估。图像显示所有三个通道的叠加。使用 Definiens 软件计算每平方毫米的荧光强度(左图中的条形图)。荧光强度值以两个不同肿瘤样本的平均值 SD 表示。
ERK 磷酸化。接种细胞,第二天用 BBO-11818 处理。处理后两小时,通过 HTRF 评估 pERK 磷酸化。3D 活力。接种细胞,并在球体形成后 3 天用 BBO-11818 处理。处理后 4 天,通过 CTG 评估活力。长期 2D 克隆形成试验。接种细胞,第二天用 BBO-11818、BBO-10203(PI3K ⍺:RAS 破坏剂)和西妥昔单抗处理并孵育 14 或 15 天。每两周更换一次培养基和化合物。通过 Incucyte 活细胞分析系统每天两次测量汇合度。药代动力学 (PK) 和药效学 (PD)。单次口服 BBO-11818 后,在 GP2d 皮下肿瘤模型中进行剂量和时间反应 PK/PD 分析。收集血浆和肿瘤,使用 MSD 进行 PK 和 pERK 分析。体内疗效和生存研究。在具有 KRAS G12D 或 KRAS G12V 突变的细胞系衍生异种移植 (CDX) 或同源模型中,以所示剂量水平每日两次 (BID) 口服给药后评估 BBO-11818 疗效。BBO-10203 每日一次 (QD) 口服给药。抗 PD-1 或西妥昔单抗每周两次 (BIW) 通过腹膜内给药。计算肿瘤生长抑制 (TGI)、平均肿瘤消退 (REG) 和完全消退 (CR) 数。BrdU 掺入和裂解 caspase-3 测定。在采集肿瘤前 2 小时,在指定时间点,对 Capan-2 肿瘤小鼠进行单次口服指定治疗,并腹膜内注射 50 mg/kg BrdU。制备福尔马林固定的肿瘤并切片。对 BrdU 和裂解 caspase-3 进行免疫组织化学 (IHC),并对 BrdU 和裂解 caspase-3 的阳性染色进行定量,以分别测量肿瘤细胞增殖和凋亡的水平。统计分析:对克隆形成试验进行双向重复测量方差分析,随后进行事后 Tukey 多重比较检验,直至第 14 天或第 15 天。使用 Dunnett 检验对载体组或指定组进行 PD 和 IHC 研究的单向方差分析和对疗效研究进行双向重复测量方差分析。
在患有帕金森氏病的受试者中表明宿主疾病传播。自然医学,14(5),501–503。33。Kordower,J。H.,Chu,Y.,Hauser,R.A.,Freeman,T。B.,&Olanow,C。W.(2008)。 在帕金森氏病长期胚胎ni骨移植中的Lewy身体样病理学。 自然医学,14(5),504-506。 34。 Steiner,J。 A.,Quansah,E。和Brundin,P。(2018)。 α-突触核蛋白作为prion样蛋白的概念:十年后。 细胞和组织研究,373(1),161–173。 35。 Olanow,C。W.,Kordower,J。H.,Lang,A。E.和Obeso,J。 A. (2009)。 帕金森氏病的多巴胺能移植:当前的状态和未来前景。 神经病学年鉴,66(5),591–596。 36。 Galpern,W。R.,Corrigan-Curay,J.,Lang,A.E.,Kahn,J.,Tagle,D.,Barker,R.A. (2012)。 临床试验中的假神经外科手术疾病的神经外科疾病:科学和道德考虑。 柳叶刀神经病学,11(7),643–650。 37。 Smith,R.,Wu,K.,Hart,T.,Loane,C.,Brooks,D.J.,Björklund,A.,Odin,P.,Piccini,P。,&Politis,M。(2015年)。 苍白的血清素能功能在帕金森氏病障碍症中的作用:一项正电子发射断层扫描研究。 衰老的神经生物学,36(4),1736– 1742。 38。 胎儿细胞移植后的运动障碍:帕金森氏症:一项宠物研究。 39。Kordower,J。H.,Chu,Y.,Hauser,R.A.,Freeman,T。B.,&Olanow,C。W.(2008)。在帕金森氏病长期胚胎ni骨移植中的Lewy身体样病理学。自然医学,14(5),504-506。34。Steiner,J。A.,Quansah,E。和Brundin,P。(2018)。α-突触核蛋白作为prion样蛋白的概念:十年后。细胞和组织研究,373(1),161–173。35。Olanow,C。W.,Kordower,J。H.,Lang,A。E.和Obeso,J。 A. 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