诱导型 CRISPR/Cas9 可在 Synechocystis sp. PCC 6803 中进行多路复用和快速分离的单目标基因组编辑 Ivana Cengic a、Inés C. Cañadas b、Nigel P. Minton b、Elton P. Hudson a * a 瑞典皇家理工学院化学、生物技术和健康工程科学学院、生命科学实验室,斯德哥尔摩,瑞典 b BBSRC/EPSRC 合成生物学研究中心 (SBRC)、诺丁汉大学生命科学学院,诺丁汉,NG7 2RD,英国 * 通讯作者:huds@kth.se 摘要 建立各种合成生物学工具对于开发用于生物技术的蓝藻至关重要,尤其是那些允许以时间高效的方式进行精确和无标记基因组编辑的工具。这里我们描述了一个核糖开关诱导的 CRISPR/Cas9 系统,该系统包含在一个单一的复制载体上,用于模型蓝藻 Synechocystis sp. PCC 6803。茶碱反应性核糖开关可以严格控制 Cas9 表达,从而能够将 CRISPR/Cas9 载体可靠地转化为 Synechocystis 。CRISPR/Cas9 的诱导介导了各种类型的基因组编辑,特别是不同大小的删除和插入。编辑效率因目标和预期编辑而异;较小的编辑总体上表现更好,例如,将 FLAG 标签插入 rbcL 时达到 100%。重要的是,本文描述的单载体 CRISPR/Cas9 系统还被证明可以在 Synechocystis 中同时介导多达三个目标的多重编辑。所有单靶和几个双靶突变体在第一轮诱导后也完全分离,增加了该系统的实用性。此外,由镍单独诱导并包含在 CRISPR/Cas9 载体本身上的载体固化系统将固化效率提高了大约 4 倍,使最终的突变体真正成为无标记的。关键词:CRISPR、Cas9、蓝藻、可诱导、核糖开关、多重引言
最新进展 6 月 18 日:新泽西州李堡居民 Samuel Rahamin Topaz 因企图出国加入叙利亚 ISIS 并为该恐怖组织提供物质支持而被捕。Topaz 是 Munther Saleh 的朋友和同谋,后者于 6 月 13 日被捕。两人在网上观看了 ISIS 宣传视频,视频中描述了斩首场景,并讨论了通过过境不同国家前往叙利亚 ISIS 控制的领土与 ISIS 作战的计划。 6 月 17 日:Fareed Mumuni 因试图刺伤搜查他家的 FBI 特工而被捕,此举与 Munther Saleh 被捕事件有关的一项调查有关。当局认为穆穆尼与萨利赫合谋制造压力锅炸弹,类似于 2013 年波士顿马拉松爆炸案中使用的炸弹。穆穆尼告诉联邦调查人员,他宣誓效忠 ISIS,计划前往 ISIS 控制地区加入该组织,如果他加入 ISIS 的努力受挫,他打算袭击执法人员。 6 月 16 日:阿卜杜勒马利克阿卜杜勒卡里姆因向埃尔顿辛普森和纳迪尔苏菲提供武器以用于 5 月 3 日在德克萨斯州加兰市发生的穆罕默德漫画袭击而被起诉。Kareem 还和辛普森和苏菲一起前往菲尼克斯附近一个偏远的沙漠地区练习射击。据称,Kareem 在多方面向联邦调查局撒谎,包括说辛普森和苏菲没有要求他参与。Kareem 被指控串谋、作出虚假陈述和跨州运输枪支意图犯下重罪。起诉书还暗示其他人可能也参与了此次袭击的策划,称这三名男子“以及大陪审团已知和未知的其他人”策划了此次袭击。 6 月 13 日 :20 岁的大学生 Munther Omar Saleh 和一名身份不明的同谋在纽约白石大桥附近冲向一辆便衣执法车后被捕。今年 3 月,一名港务局警察看到 Saleh 在新泽西州乔治华盛顿大桥附近行走,随后对他进行了审查。美国联邦调查局称,Saleh 代表 ISIS 在纽约大都会地区在线研究如何准备爆炸装置,包括研究压力锅炸弹和其他武器。Saleh 非常活跃于 Twitter,并在 2014 年发推表达了他对基地组织变得“过于温和”的担忧。他还在网上表达了对 ISIS 的同情,并支持法国的查理周刊大屠杀和德克萨斯州加兰市的枪击事件。 6 月 2 日:马萨诸塞州罗斯林代尔的 Ussamah Abdullah Rahim 最初计划在未来某个时间点斩首一个人,但他提前实施了这一计划,并将目标改为执法人员。Rahim 袭击了试图审问他的波士顿警察和联邦调查局特工,随后被制服。他被 ISIS 极端主义所影响,数年来一直受到当局的监视。他的侄子大卫赖特与拉希姆合谋,最初因妨碍调查而被捕。第三名同伙、来自罗德岛州沃里克的尼古拉斯罗文斯基也与 ISIS 海外招募人员有联系,他于 6 月 11 日被捕并被指控为同谋。 5 月 3 日 :两名来自亚利桑那州的 ISIS 同情者埃尔顿辛普森和纳迪尔苏菲在德克萨斯州加兰袭击了一场穆罕默德漫画比赛,随后被警方制服。2011 年,辛普森因向联邦当局谎报他前往索马里进行圣战的计划而被判有罪。他通过推特与叙利亚的 ISIS 宣传员和黑客朱奈德侯赛因以及一名名为穆贾希德米斯基的 ISIS 招募人员互动,后者此前已知在索马里活动。 2015 年 3 月,辛普森在社交媒体上发布支持伊斯兰国的宣传后,美国联邦调查局重启了对他的调查。本土伊斯兰极端主义
第 2 节 — 人员、职务、服务、纪律等。1734.荣誉和奖励——摘自 4 月 3 日的“伦敦公报”增刊。1942.1735.荣誉和奖励——1942 年 4 月 7 日的“伦敦公报”增刊。1736.授予波兰海军官兵的奖励。1737.第四海务大臣顾问退休。1738.战功卓越——授予额外资历。1739.M/S、A/P 和 A/S 组织的指挥费和招待费——报告。1740.会计部门——从下层甲板晋升为永久委员会。1741.临时授权等级——Wardmaster 部门。1742.R.D.F.维护课程。1743.H.M.S.“ Saker II ”——美国的会计安排。 1744.不确定日期的会计人员余额核实。1745.宗教主持部长。1746.宗教主持部长。1747.补充修正案。1748.空气装配工 (L)——转为电气技工的选拔和考试。1749.自动莫尔斯电报操作员——新等级制度。1750.主机械舱电气设备的紧急维修。1751.由于旅行限制导致的套件缺陷。1752.临时晋升、徽章奖励等,无需服务证书。1753.民事权力定罪——逃兵和缺席者。1754.额外报酬(沿海船只)。1755.加拿大纳瓦!有权在公民投票中投票的人员。1756 年。南非海军——非机构。1757 年。海军救助金——分配。1758 年。W.R.N.S.——无薪假。1759 年。W.R.N.S.亨廷登郡埃尔顿霍尔疗养院。1760 年。敌方战俘——免费发放烟草。1761.食品配给——通信渠道。1762.退役海军军官协会——年度报告。1763.R.N.战争便利基金——捐赠。
区域 6 - 经济成长、发展和机构 João P. Romero – Cedeplar-UFMG Elton Freitas – Cedeplar-UFMG Fabrício Silveira – Cedeplar-UFMG Gustavo Britto – Cedeplar-UFMG Fernanda Cimini – Cedeplar-UFMG Frederico G. Jayme Jr. – Cedeplar-UFMG 摘要 本文使用巴西市镇的数据,为经济复杂性和区域发展方面的文献提供了三点贡献。首先,它报告了使用就业数据以及人均 GDP 和人均正式就业的对数计算的区域经济复杂性关系的计量经济学测试。这些测试受到 Hausmann 等人 (2014) 进行的测试的启发,将其结果转换到区域层面并进行扩展,以考虑经济复杂性和就业之间的关系。其次,本文提出了一种新方法,对区域发展政策所针对的有前途的活动进行排序,结合了不同的指标,如 Hausmann 等人 (2017) 所提议的那样,但使用通过主成分方法估计的权重。结果表明,与经济复杂性增加的地区相比,制定智能多元化战略的拟议规则表现非常好。以贝洛奥里藏特市为例说明了这种方法。利用经济复杂性、收入和就业之间关系的估计值,本文模拟了实施拟议的发展战略后可能获得的潜在收益。关键词:经济复杂性;经济增长;区域发展。JEL:O11;O47;R11。摘要本文介绍了巴西市政当局在经济复杂性和区域发展方面的重大贡献。第一,关于地区经济综合体关系的经济报告,计算人均经营规模、人均 PIB 和正式人均经营的对数。 Estes testes, inspirados nos testes realizados por Hausmann 等人。 (2014),传输区域内的结果,并考虑与企业的复杂关系。第二,我们将通过地区政治发展、不同指标的组合等方式,通过 Hausmann 等人提出的建议,推动区域经济活动的新进展。 (2017),使用原则上的方法来估计比值。我们的结果是,我们对多样化智能战略的制定提出了建议,将其与地区进行比较,以提高综合实力。一种使用贝洛奥里藏特城市范例的方法论。 Usando 作为对关系的估计,renda e emprego,然后,文章对实施所提出的发展战略所能获得的潜在收益进行了模拟。关键词:经济复杂性;经济增长;区域发展。杰尔:O11; O47; R11。
Illana Gozes,Ph.D.教授是特拉维夫大学的教职员工。以前担任Lily和Avraham Gildor主席,以调查生长因素,现在指挥Diana博士和Zelma Elton Laboratory的分子神经内分泌学实验室。Gozes教授目前是欧洲神经化学学会主席和Exonavis Therapeutics Ltd.欧洲神经化学学会和药物开发副总裁。她的开创性研究始于1970年代末和1980年代初,当时她在单个神经元内发现了多种微管蛋白。她证明了这些形式随着脑发育的发展,在突触形成中起着至关重要的作用,并且可以使用单克隆小管蛋白抗体鉴定。在1980年代分子神经科学的最前沿,Gozes教授成为第一个克隆编码血管活性肠肽(VIP)的基因,这是大脑中的关键调节性神经肽。她的研究表明,在突触形成期间的VIP表达增加。在寻求通过VIP激活并促进神经胶质相互作用的蛋白质时,GOZES实验室发现并克隆了一种新型蛋白质:活性依赖性神经保护蛋白(ADNP)。随后的研究确立了ADNP在大脑形成和功能中的重要作用。通过一系列高度引用的文章,Gozes教授表明,ADNP以性别依赖性的方式调节了数千个基本基因,并将其与复杂的重要蛋白质相关联。此外,她在阿尔茨海默氏病中发现了ADNP和相关基因的体细胞突变,并平行于陶氏病。她发现了ADNP在自噬和精神分裂症中的关键作用,揭示了涉及ADNP与shank3和shank3和肌动蛋白关键结合的自闭症中的基本共同机制,并显示ADNP对微管动力学的调节和TAU相互作用,可防止Tauopathy。她在ADNP缺陷小鼠模型上的开创性工作预测了ADNP综合征,ADNP综合征是一种自闭症/智力障碍综合征,由ADNP中的从头突变驱动并呈现tauopathy。Gozes教授采取了一种还原主义的方法来发现ADNP的活跃地点,从而导致了研究性药物Davunetide(NAP)的发展。这种化合物在保护动物模型和临床试验中预防ADNP缺乏/突变方面已显示出希望。它已经在患有纯净的tauopathy的进行性核上麻痹(PSP)的妇女中进行了测试,并且在患有阿尔茨海默氏症前后病的个体中,以性别依赖性的方式表现出了影响。精神分裂症患者显示了进一步的承诺,这表明现实世界中的问题解决和任务绩效的改善。我们很荣幸Gozes教授同意与我们的读者分享她的人生旅程。
研究报告于 2019 年定稿,并于 2022 年更新,这要感谢以下人员的贡献和支持:Angelo Albergo(意大利海关)、Sara Alsuwaidi(阿联酋联邦海关局)、Ferdinand Amaumo(肯尼亚税务局)、Audrey André(比利时海关)、Blanca Luisa Barandiaran Asparrin(秘鲁海关)、Chahid Azarkan(荷兰海关)、Noga Balaban(Wave)、Kelly Belanger(加拿大边境服务局)、John Bescec(国际商会/微软)、Elton Carlos Busarello(巴西海关)、John Byrne(爱尔兰税务和海关)、Leonel Alberto Molina Cabrera(危地马拉海关)、Mi Jang Hongy Yuang Cho(韩国区域培训中心)、Wilson Chow(中国香港海关)、Woo Yong Chung(韩国海关)、Lore Cloots(比利时海关)、 Sandra Corcuera(美洲开发银行)、Emmanuel de Kerchove(欧盟税务和边境统一总司)、Pascale Dehon(加拿大边境服务署)、Liesbeth Deprez(比利时海关)、Maria-Luisa Eichhorst(美国海关和边境保护局)、Jorge Eduardo de Schoucair Jambeiro Filho(巴西海关)、Marcelo Fiotto(阿根廷海关)、Muriel-Gabrielle Franchomme(欧盟税务和边境统一总司)、María Fernanda Giordano(阿根廷海关)、Benoit Gosselin(加拿大边境服务署)、Samuel Greene(美国海关和边境保护局)、Frank Heijmann(荷兰海关)、Ericka Mariela Barillas Herrera(危地马拉海关)、Theo Hesselink(荷兰财政部)、Juha Hintsa(跨境研究协会)、Alfa Ibrahim(尼日利亚海关)、Colm Leonard (IBM)、Edward Kafeero 博士(明斯特大学)、Inna Khorsheva(俄罗斯海关)、Georg Kotschy(欧盟,税务和海关总署)、André Lamoureux(加拿大边境服务署)、Sharon Lim(GeTS Asia Pte Ltd)、Dana Lorenze(Expeditors)、Cristina Martín Lorenzo(Usyncro)、Toni Männistö(跨境研究协会)、Matome Mathole(南非税务局)、Marco Mattiocco(意大利海关)、Ivy Milimo(赞比亚税务局)、Marcel Molenhuis(荷兰海关)、Jonathan Morten(新西兰海关)、Gustavo Antonio Romero Murga(秘鲁海关)、Chanda Mwenechanya(赞比亚税务局)、Chun-Wah Lawrence Ng(中国香港海关)、Shirley Ng(中国香港海关)、Maureen Ojowi(肯尼亚税务局)、Abraham Omonya (肯尼亚税务局)、Frank Orondo(肯尼亚税务局)、Jonathan Page(加拿大边境服务局)、Sangyong Park(韩国海关)、Marcus Vinicius Vidal Pontes(巴西海关)、Zahouani Saadaoui(欧盟 - 税务和海关总署)、Aliyu Galadima Saidu(尼日利亚海关)、Sara Sekimitsu(日本海关)、Latifa Al Shamsi 和 Moza Al Shamsi(阿联酋迪拜海关)、Weijian Shao(中国海关)、Micha Slegt(荷兰海关)、Adam Sulewski(美国海关与边境保护局)、Keith Tan(新加坡海关)、Raoul Tan(鹿特丹国际港口)、Andrea Tang(国际货运代理协会联合会,FIATA)、Taksachan Tangsuphoom(泰国海关)、Angie Teo(新加坡海关)、Lucelia Tinembart(国际货运代理协会联合会,FIATA)、Helen Tse(中国香港海关)、Samson Uridia(格鲁吉亚税务局)、Rafael Mallea Valdivia(秘鲁海关)、Alfredo Volpicelli(意大利海关)、Carol West(国际报关协会联合会,IFCBA)、Stella Wong(中国香港海关)、Yuri Yanai(日本海关)、Kay Ren Yuh(新加坡资讯通信媒体发展局)。
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1.7。教育研究生文凭(2个学期)Surname Given Name (s) Gender Admission Code 1 KIAPUT Agnes F EDU564 2 AIAS Hendry M EDU565 3 AIJAU Olivia F EDU566 4 AINGO Martin M EDU567 5 AKO Alex M EDU568 6 AKU Malo M EDU569 7 ALECK Sepion M EDU570 8 ALEX Charity F EDU571 9 ALEX Rose F EDU572 10 Alex Albert M Edu573 11 Aliwasa Nick M Edu574 12 Alop Elapa Elapa Jevethy M Edu575 13 Ambane Gabriel M Edu576 14 Ameta Natalie f edu577 15 EDU581 19 Andy Mole M Edu582 20 Angula Samson M Edu583 21 Anis Brenda F Edu584 22 AP Elizah M Edu585 23 Appa Francis M Edu586 24 Arick Moody M Edu587 25 Lei F EDU591 29 AULI Elton M EDU592 30 AZORE Eyale F EDU593 31 BAGME Zebbedee M EDU594 32 BAGME Zebbedee M EDU595 33 BAL Anthon M EDU596 34 BANGI Sam M EDU597 35 BANI Job M EDU598 36 BELDEN Skibry M EDU599 37 BELO David Kelive M EDU600 38 BENSON ISHMAEL M EDU601 39 BERNARD TOOH M EDU602 40 BIBIN MICAH M EDU603 41 BILIKU BERER M EDU604 42 BINGMALU ABAIJAH M EDU605 43 BOMA BAMA JAMIN M EDU606 MEDU606 MEDU606 44 BRIAN SIMNY SIMNEN MED607 45 45 45 HAHA 45 HAHA 45 HAHA 45 45 46 BUTLER Nicholas M EDU609 47 DAMAIA Josephine F EDU610 48 DANGA Joseph M EDU611 49 DANIEL Jacob M EDU612 50 DARIUS Nelson M EDU613 51 DAU Serah F EDU614 52 David Jopovo F EDU615 53 DAVIGE Anne Vanessa F EDU616 54 DEREK Gabriel M EDU617 55 Dunstan Samuel M EDU618 56 ELIUDA Sinimil F EDU619 57 Emmanuel Jim M EDU620 58 ERAONE Melisha F EDU621 59 EREMIAH Sharon F EDU622 60 ESSO Joseph M EDU623 61 EZICKS Meslyn F EDU624 62 FINAKA Judrah F EDU625 63 Foilee Kaisen M Edu626 64 Fr.Kaumu Aloisius M Edu627 65 Francis Penny M Edu628 66 Francis Albertana Fed edu629 67 Fredrick Posenu M Edu630 68 Fukatine Tonny M Edu631 69 Gabi Grace F edu632 70 Gai Belinda f edu633 71 Gaiwam Elijah M Edu634 72 Gamane Moses M Edu635 73 George Justin M Edu636 74 George Justin M Edu637 75 Gideon Elken M Edu638 76 Gilbert Mathias m Edu6 Gimore Tonny M Edu641 79 Goiye Paul m edu642 80 Gore Nixon Minaha M Edu643 81 Guagi Bently m Edu644 82 Gumbis Jessica F EDU645 83 HAMENA GRABNER M EDU646 84 HANA CAROLYN F EDU647 85 HERRY MOSES M EDU648 86 HESSINGGA TABITAH F EDU649 87 HITU MOVITIAL 650
