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治疗性酶作为心血管疾病的非传统靶点：综合综述
完整作者列表：Kumar, Gaurav；德里大学 - 南校区，生物化学 Saini, Manisha；德里大学 - 南校区，生物化学 Kundu, Suman；德里大学 - 南校区，生物化学
利用连续定向进化改良用于植物的酶
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可下可用（未经同行评审认证）是作者/资助者，他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2021 年 8 月 28 日发布。；https://doi.org/10.1101/2021.08.26.457776 doi：bioRxiv 预印本
找到优化用于分子测定开发的高质量OEM酶
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肽介导的 CRISPR 酶递送可有效编辑原代人类淋巴细胞
CRISPR 介导的原代人类淋巴细胞基因组编辑通常通过电穿孔进行，这可能具有细胞毒性、繁琐且成本高昂。本文我们展示了通过递送与筛选确定的两亲肽混合的 CRISPR 核糖核蛋白可以大幅提高编辑后的原代人类淋巴细胞的产量。我们通过递送 Cas9 或 Cas12a 核糖核蛋白或腺嘌呤碱基编辑器敲除 T 细胞、B 细胞和自然杀伤细胞中的基因来评估这种简单递送方法的性能。我们还展示了肽介导的核糖核蛋白递送与腺相关病毒介导的同源定向修复模板配对可以在 T 细胞受体 α 恒定位点引入嵌合抗原受体基因，并且工程细胞在小鼠中表现出抗肿瘤效力。该方法干扰最小，不需要专用硬件，并且与通过顺序递送的多重编辑兼容，从而最大限度地降低了基因毒性的风险。肽介导的核糖核蛋白细胞内递送可能有助于制造工程化 T 细胞。
音调酸通过调节碳水化合物的肝钥匙酶来减轻高血糖
背景：背景：糖尿病是一种复杂的代谢疾病，其特征是由于胰岛素产生，胰岛素作用或两者兼而有之导致高血糖症。与糖尿病相关的持续性高血糖会导致患有严重健康问题的风险增加。这项研究检查了生物活性酚类化合物酸（SA）是否会减轻链蛋白酶诱导的糖尿病大鼠的高血糖。材料和方法：材料和方法：调查中总共使用了30个雄性Sprague-Dawley大鼠，它们分为五组：正常（N），正常+肌酸（N+SA），糖尿病对照（DC），糖尿病患者，糖尿病+肌酸（D+SA）和糖尿病+糖尿病+糖尿病+Glimepiride（diabetic+Glimepiride（D+GM）。使用单剂量的链蛋白酶（40 mg/kg）注射的腹膜内注射糖尿病。色调酸（SA）每天口服一次，持续60天，剂量为50 mg/kg体重。检查了血浆胰岛素，葡萄糖，糖化血红蛋白的水平和碳水化合物代谢酶的活性。结果与标准药物玻璃液螺旋体（0.1 mg/kg）的糖尿病大鼠进行了比较。结果：结果：在糖尿病大鼠中以50 mg/kg体重给药时，在糖尿病大鼠中，音调酸治疗大大降低了高血糖，增强的胰岛素水平和HBA 1C的降低。此外，音序酸具有大大降低果糖1,6-双磷酸酶和葡萄糖-6磷酸酶的活性，同时显着增加了丙酮酸激酶和己糖苷酶等糖酵解酶的活性。结论：结论：这些结果表明，音调酸可能通过调节碳水化合物代谢，潜在地减弱链蛋白酶诱导的糖尿病大鼠的高血糖症。
招募内源性和外源性ADAR酶进行位点特异性RNA编辑的方法
作用于 RNA 的腺苷脱氨酶 (ADAR) 可以重新用于实现位点特异性的 A-to-I RNA 编辑，方法是通过 ADAR 招募向导 RNA (adRNA) 将它们招募到感兴趣的靶标上。在本章中，我们详细介绍了通过两种正交策略实现此目的的实验方法：一是通过招募内源性 ADAR（即已经在细胞中天然表达的 ADAR）；二是通过招募外源性 ADAR（即将 ADAR 递送到细胞中）。对于前者，我们描述了使用环状 adRNA 将内源性 ADAR 招募到所需的 mRNA 靶标上。这可在体外和体内实现稳健、持久且高度转录特异性的编辑。对于后者，我们描述了使用 split-ADAR2 系统，该系统允许过度表达 ADAR2 变体，可用于以高特异性编辑腺苷，包括难以编辑非优选基序中的腺苷，例如 5′ 鸟苷两侧的腺苷。我们预计所述方法应促进研究和生物技术环境中的 RNA 编辑应用。
将连续定向进化用于种植酶的潜力：探索性研究
摘要：植物进化产生的酶可能不是最大程度地提高当今农业环境和植物生物技术应用的最佳产量和质量。通过提高酶的性能，应减轻动力学特性或酶不稳定当前对产量和质量的约束。酶，这需要在体外突变靶基因，并筛选或选择突变的基因产物为所需的特征。连续定向进化是一个更有效，更可扩展的版本，它通过靶基因的易于发达的复制以及宿主细胞的生长速率与靶基因功能的偶联来完成诱变和选择步骤。但是，已发布的连续系统需要自定义的质粒组件，并且不可用的多功能平台。我们讨论了两个适合于酿酒酵母中的酶连续进化的系统，在大肠杆菌中的葡萄糖和evolvr，以及我们的试点效应，以适应每个系统，以用于高通用植物酶工程。为了测试我们的修改系统，我们使用了硫胺素合成酶Thi4，该酶先前鉴定为改进的主要候选者。我们适应的矫正系统显示出对有效植物酶工程的希望。
评论文章适应酶以改善其在植物中的功能：为什么和如何
合成生物学创建了新的代谢过程，并使用工程或天然酶改善了现有生物学。这些酶通常来自与目标植物器官不同的细胞，例如氧化还原电位，效应子水平或蛋白质的机制。因此，即使在其新植物的情况下（“植入”），非本地酶也可能需要适应其在其新植物环境中正常工作（即使其特定的细胞和动力学在体外都足够。因此，有两种不同的方式可以在植物中使用以用于植物的酶：在催化特性中，例如底物和产品植物，K CAT和K M；并且通常与表达酶的细胞环境兼容。连续的定向进化系统可以提供两种类型的改进，并且迄今为止是交付第二种类型的最广泛有效的方法。因此，在本综述中，我们提供了连续演化方法的简短说明，并强调了酵母菌系统，因为它适合植物应用。然后，我们涵盖了始终且日益紧迫的问题，这些酶和酶特性在理论上可以改善或不能改善这些酶，而实际上哪个是最适合作物改善的目标，即实际上可以改进且重要的那些足以保证部署连续的定向进化。，我们以园艺作物为例，因为它们提供的机会并提高了重点。
案例研究：蛋白水解酶对三阴性乳腺癌后乳腺切除术后的影响
酶疗法在疾病治疗中变得越来越普遍。消化酶用于消化食物，代谢酶参与了人体的每个过程，并有助于建立结构并重塑新细胞。治疗酶（消化和代谢）可以在医学上用作分离株或与其他疗法的治疗，用于治疗各种疾病，例如癌症，囊性纤维化，皮肤溃疡，炎症，消化疾病等。酶作为直接药品发现了许多应用，并且癌症研究领域有一些很好的酶使用酶疗法的例子。治疗酶被用作溶瘤，抗凝剂，溶栓，抗炎药，纤维蛋白溶液，粘液溶液，粘液溶液，抗菌剂，并且在细胞水平上已显示出对宿主存活的信号机制的积极影响。具有许多健康益处的蛋白水解酶的一个例子是溴烯。为了详细阐明抗癌作用的潜在机制，在许多研究中都对溴链蛋白酶进行了广泛的研究。在动物模型中的“体内”和“体外”中都评估了溴甘氨酸抗癌作用，作为对胃肠道，结直肠，乳腺癌，间皮瘤，肺，肝，胰腺，胰腺，表皮类似物和黑色素瘤等多种癌细胞的潜在药物。Bromelain，例如MDA-MBA231乳腺腺癌，MCF-7乳腺腺癌，4T1乳腺腺癌和GI-101A乳腺癌和乳房腺瘤瘤，从而显示出增加的氧化毒性，减少抗蛋白毒性，减少抗蛋白毒性，减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少抗蛋白毒性，并减少了抗蛋白毒素，并且会增加抗蛋白毒性，并增加了抗蛋白毒素，并增加了抗蛋白毒素，并增加了抗蛋白毒性症，并增加了抗蛋白毒素。细胞活力。在此案例研究中，我们采用高剂量的蛋白水解混合物，从转化酶公司的粉末形式称为Professional Protoction™蛋白酶，以诊断出具有三阴性乳腺癌左侧的61岁女性左侧，该女性选择了带有前哨乳头乳液脱离左乳腺肿块切除术，x2节点。
真核 RNA 引导的核酸内切酶是从一类独特的细菌酶进化而来的
1 加州大学伯克利分校分子与细胞生物学系；美国加利福尼亚州伯克利市；2 加州大学创新基因组学研究所；3 加州大学伯克利分校加州定量生物科学研究所 (QB3)；4 加州大学伯克利分校霍华德休斯医学研究所；美国加利福尼亚州伯克利市；5 加州大学伯克利分校地球与行星科学系；6 加州大学洛杉矶分校分子、细胞和发育生物学系；7 加州大学伯克利分校计算生物学中心；8 加州大学洛杉矶分校霍华德休斯医学研究所；9 格拉德斯通研究所；美国加利福尼亚州旧金山市；10 格拉德斯通-加州大学旧金山分校基因组免疫学研究所； 11 劳伦斯伯克利国家实验室分子生物物理和综合生物成像部；美国加利福尼亚州伯克利市；12 加利福尼亚大学伯克利分校化学系；美国加利福尼亚州伯克利市；