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克隆，表征和表达的大肠杆菌中的CpG DNA甲基酶的基因中的大肠杆菌中的克隆，表征和表达。菌株MQ1（M SSSI）
摘要我们在这里描述了从螺旋体SP中编码DNA甲基化酶的基因大肠杆菌中的克隆，表征和表达。菌株MQ1（M * SSSI）。该酶完全和仅CPG序列（1）。使用其自身的启动子在E.盘管中转录螺旋质基因。整个消息的翻译需要使用蛋白石抑制器，这表明UGA三胞胎代码用于螺旋形的色氨酸代码。对基因的序列分析在1158 bp的长开放式阅读框架中揭示了几个UGA三胞胎。在M SSSI中揭示的推导的氨基酸序列所有共同结构域的特征是细菌胞嘧啶DNA甲基酶的特征。尽管具有共同的序列特异性，但M SSSI的推定序列识别域与小鼠DNA甲基化酶的相似性没有明显的相似性。克隆的甲基化酶在体内和体外均仅CpG序列。与主要是维持甲基酶的哺乳动物酶相比，MSSI显示了从头开始的甲基化酶活性，这是原核生物胞嘧啶DNA甲基化酶的特征。
在Escherichia col
一种理论模型，该模型试图考虑到革兰氏阴性细菌中的周质 / - 乳糖确定的青霉素抗性水平（22）。The relevant parameters are the kinetic characteristics (Ki,m Vmax, and amount of enzyme produced) of the /)-lactamase, a perme- ability parameter (C) for the diffusion of the antibiotic across the outer membrane, and the concentration of the ,8-lactam antibiotic in the periplasmic space (Sp), specifically the concen- tration, SP, necessary for lethal inhibition内膜中的位点（一个或多个青霉素结合蛋白[17]）。使用这种方法Zimmermann和Rosselet（22）成功地解释了TEM，B-乳糖果酶（在这种情况下，由R Plasmid RTEM编码）赋予Escherichia coli K-12的Ampicilin抗性，以及该enzyme diseme concememe conceporance conceporance的无能为力。对于阴茎lin g，该方法失败了。作者考虑了这样的解释，即在微型抑制浓度（MIC）检测过程中，外膜的屏障功能发生了变化（22）。但是，他们对SP的估计也可能是错误的。此处报告的实验为模型提供了不同的测试。通过使用对几种底物的亲和力改变的突变Fi-内酰胺酶，我们避免了估算SP的必要性，而是比较了由突变体直接确定的青霉素耐药性与由野生型酶确定的抗性。