评估了次氯酸钠对香蕉卫生的功效,并评估了从哥斯达黎加到美国的模拟出口运输过程中大肠杆菌对香蕉的生存。香蕉(Musa spp。,AAA组,Cavendish子组)被大肠杆菌ATCC 25922(7 log cfu/g)接种,然后将五分钟浸入次氯酸钠溶液中(0、50、50、100、100、150和200 ppm)在模拟的出口运输条件下(14±1°C;相对湿度为85–90%;聚集在聚乙烯袋和纸板箱中)的在模拟出口传输条件下(14±1°C; 85–90%的相对湿度)监测了在香蕉表面上的大肠杆菌群体。 大肠杆菌在储存的0、1、5、7、12和14天以35±2°C孵育24小时以0、1、5、7、12和14天的储存。试验一式三份进行。 次氯酸钠浓度为100 ppm或更高的大肠杆菌减少至少3型。 在100至200 ppm的消毒剂之间没有发现显着差异(P≥0.05)。 储存时间显着影响(p≤0.05)大肠杆菌种群。 大约3-log在模拟出口传输条件下(14±1°C; 85–90%的相对湿度)监测了在香蕉表面上的大肠杆菌群体。大肠杆菌在储存的0、1、5、7、12和14天以35±2°C孵育24小时以0、1、5、7、12和14天的储存。试验一式三份进行。次氯酸钠浓度为100 ppm或更高的大肠杆菌减少至少3型。在100至200 ppm的消毒剂之间没有发现显着差异(P≥0.05)。储存时间显着影响(p≤0.05)大肠杆菌种群。大约3-log
将每个细胞悬浮液添加到包含0.5 mM玻璃珠的2 mL管中(CAT#19-622)。然后以3、4和5的速度在Omni珠子破裂4(CAT#25-010)中均匀地均匀,持续45秒。加工后,将裂解物转移到清洁2毫升试管中,并以10,000 x g离心1分钟,以弥补任何细胞碎屑。使用Quick-DNA™真菌/细菌微型REIPREP试剂盒(Zymo,Cat#D6005)1 µL DNA洗脱器在纳米光谱表(Thermo Fisher)上量化1 µL DNA洗脱器,以确定DNA浓度和纯度。
pipericilin tazobactam(pit,100/10μg),Ce Fimime(CPM,30μg),CE固定(CFM,5μg),Ceotaxime(CTX,30μg),Ceftazidime(CazIme)(CAZ,30μg,30μg),ImipeNem(ImipeNem(ImipeNem(ImipeNem),ImipeNem(ImipeNem(ImipeNem))(imipnem(ipm,10μg)四环素(TE,3μg),cipro floproxatin(CIP,5μg),Nalidixic Acid(Na,30μg),氯霉素(C,30μg),红霉素(E,15μg),硝基氟烷素(Nitrofurantoin(Nit,300μG) (COT,25μg,1.25/23.75μg)。用于质量控制,使用了ATCC 25922培养。在正常盐水中制备了对生物体的接种,并与0.5 MAC FARLAND标准相比。接种物被擦在MHA板上,并在放置抗生素盘之前干燥5分钟。对于90毫米板,接种了五种不同的抗生素。将板孵育18小时,并用尺度测量抑制区。将抑制区与标准值进行比较。根据临床实验室标准指南(CLSI 2020)测试了抗生素。
摘要:苯乙烯是一种重要的工业化学化学物质。尽管有几项研究报告了微生物苯乙烯的产生,但可以增加批量培养物中产生的苯乙烯量。在这项研究中,使用基因设计的大肠杆菌产生了苯乙烯。首先,我们评估了拟南芥(Atpal)(Atpal)和Brachypodium distachyon(BDPAL)的五种类型的苯丙氨酸氨裂解酶(PAL),以产生反式甲酸(CIN),一种苯乙烯前体。ATPAL2-表达大肠杆菌的CIN大约700 mg/L,我们发现BDPAL可以将CIN转换为苯乙烯。为评估苯乙烯的产生,我们构建了一个大肠杆菌菌株,该菌株从酿酒酵母中表达ATPAL2和阿魏酸脱羧酶。在含油醇的双相培养后,葡萄糖的苯乙烯产生和产量分别为3.1 g/L和26.7%(mol/mol),据我们所知,这是分批种植中获得的最高价值。因此,该菌株可以应用于苯乙烯的大型工业生产。
反刍动物的排放量负责导致全球变暖的人为温室气体的很大一部分。牛的甲烷排放量是弥漫性的,难以治疗,但是,已经提出了几种溶液,可以降低从牛发出的低(v/v)甲烷流,最高约30%。Wageningen大学和研究国际基因工程机竞赛提出的新型Cattlelyst生物滤器旨在通过引擎盖系统和两个在三层安全机制下收集和转化从牛发出的甲烷和氨和氨。目标是将大肠杆菌施加到合适的合成甲烷肉芽菌中。在本文中,试图在合适的甲肉营养菌株SM1或C1SAUX中表达合成甲烷营养。所得的产物是一个PSEVA2610-SMMO质粒,其中包含SMMO的亚基,并在MMOX基因中复制。无法实现其他伴侣的质粒,并且未显示SM1和C1SAUX菌株的甲基营养生长。最后,该假设既没有得到证实或拒绝。生物过滤器的合成甲烷植物正在成为一种越来越相关的技术来解决低浓度的甲烷,因为本文中探讨了多种技术进步。预计生物滤器设计的改进,例如在引擎盖中浓缩甲烷,多孔填料材料以及具有工程性的特定培养物,可以使生物过滤器成为实现全球甲烷承诺的有用工具。
。Orlando Marques de Paiva博士,87,Paulo 05508-270,SP,巴西; andrepegororo21@gmail.p。 ); luzanolli@gmail。 ); Mattheus。 ); 。 ); M.C.D. ); silva2006@yahoo.br(abr.S。 ); vsotulio@yahoo.br(v.t.g。 ); vanochin@us(i.s ..... ); kaimarajo@gmail.com(K.A。) SANTIAS 13635-900,SP,巴西; av。 Paul 345教授,Sâ或Paulo 05459-900,SP,巴西; treanam@br。 br;电话。 : +55-011-3091-1377Orlando Marques de Paiva博士,87,Paulo 05508-270,SP,巴西; andrepegororo21@gmail.p。); luzanolli@gmail。); Mattheus。); 。); M.C.D.); silva2006@yahoo.br(abr.S。); vsotulio@yahoo.br(v.t.g。); vanochin@us(i.s .....); kaimarajo@gmail.com(K.A。)SANTIAS 13635-900,SP,巴西; av。Paul 345教授,Sâ或Paulo 05459-900,SP,巴西; treanam@br。 br;电话。 : +55-011-3091-1377Paul 345教授,Sâ或Paulo 05459-900,SP,巴西; treanam@br。 br;电话。: +55-011-3091-1377
简介:紫皮蛋白是一种由各种细菌产生的双座,众所周知,可以显示出广泛的药物特性。不幸的是,天然紫饼蛋白生产商的生产力低,导致了不一致的紫cile蛋白供应,从而限制了其作为未来治疗剂的应用。异源表达系统,例如大肠杆菌和Pichia Pastoris,提供了一种产生这些高价值的次级代谢物的替代方法。这项工作描述了大肠杆菌中紫质蛋白异源生产的遗传体系的发展。方法:紫c。violaceum,mth01的生产者是从马来西亚马来西亚大学的林理学基础上分离出来的。使用基因特异性底漆,整个7.3 Kb紫out基因簇从C. volaceum mth01 DNA成功扩增,克隆到PUC19矢量(PVIO19)中,然后分别为PET-3A和PET-3A和PET-11B,分为PVIO3A和PVIO3A和PVIO11B,分别为PET-3A和PET-11B。为异源表达,优化了碳源,温度,诱导剂(IPTG)和L-色氨酸的参数。使用TLC和FTIR分析了从紫色的大肠杆菌转化体中提取的violacein。结果:几天后,含有PVIO3A或PVIO11B的大肠杆菌转化体开发了紫色菌落,表明紫co菌菌素在大肠杆菌中成功表达。TLC分析显示,RF值可与脱氧维奥莱辛(紫氧化紫葡萄丝(Deoxyviolacein)(一种中介代谢物)中的脱氧葡萄蛋白相媲美,而FTIR光谱揭示了胺和羰基的存在,这两个都是吲哚的特征。结论:此处描述的大肠杆菌异源系统可以利用葡萄糖或甘油作为碳源。将L-色氨酸添加到生长培养基中对于成功表达紫col途径是必要的。
在过去的几十年中,人们对太空环境在微生物遗传和表型变化中的作用的研究兴趣日益浓厚。更具体地说,人们担心宇航员在执行月球及更远太空任务期间的健康会因许多条件的变化而受到损害。这些变化包括细菌生理学变化,这些变化会导致与人类健康直接相关的变化,例如毒性和抗生素耐药性,或生命支持系统的功能变化,例如供水或处理组件中生物膜形成的增加。十多年来,人们一直在研究太空条件对微生物的影响;然而,仍然需要确定微重力的生理效应不仅对细菌生长的影响,而且对可能有助于表型可塑性和微生物适应的不同毒力相关表型的影响。本研究重点是利用 2D 微重力模拟物来解释共生菌大肠杆菌 K12 在模拟微重力条件下生长后的表型变化。利用 2D 回转器,大肠杆菌生长长达 22 天,并用于测量通常与毒力相关的表型变化。测量的表型包括细胞群生长、生物膜发育以及对酸性 pH 和氧化应激的反应。我们的研究结果表明,在酸性条件下,生物膜形成有增强趋势,对氧化应激的抵抗力下降,并且更容易生长。这些结果表明,微重力调节大肠杆菌的适应性和表型可塑性,从而导致毒力发生变化。
IFSAC使用用于先前估计的相同方法得出了2021的估计值,并进行了一些修改。 原始方法可以追溯到2012年的估计值,在一份报告,同行审查的期刊文章和公开会议上描述了。 今年报告中的数据来自1998年至2021年发生的1,322次疾病,与1,322次饮食疾病暴发有关,每种疾病都被确认或怀疑涉及的食物被分配给单一食物类别。 该方法最依赖于爆发数据的最后五年(2017 - 2021年)。 食品是使用IFSAC计划对食品进行分类的,该计划将食品分为17个类别,与美国食品监管机构的分类需求紧密一致。 可以在附录中找到每个食物类别中包含的食物的例子。IFSAC使用用于先前估计的相同方法得出了2021的估计值,并进行了一些修改。原始方法可以追溯到2012年的估计值,在一份报告,同行审查的期刊文章和公开会议上描述了。今年报告中的数据来自1998年至2021年发生的1,322次疾病,与1,322次饮食疾病暴发有关,每种疾病都被确认或怀疑涉及的食物被分配给单一食物类别。该方法最依赖于爆发数据的最后五年(2017 - 2021年)。食品是使用IFSAC计划对食品进行分类的,该计划将食品分为17个类别,与美国食品监管机构的分类需求紧密一致。可以在附录中找到每个食物类别中包含的食物的例子。
摘要 大肠杆菌是印度尼西亚尿路感染 (UTI) 的主要原因,每年约有 180,000 例报告。UTI 病例越多,越需要使用准确、快速、简单且经济的 DNA 分离方法进行 PCR 诊断。然而,目前煮沸 DNA 分离法中没有从蛋白质和 RNA 污染物中纯化 DNA 的阶段。本研究旨在调查将蛋白酶 K 和 RNase 纳入煮沸 DNA 分离法对分离过程中大肠杆菌 DNA 纯度和浓度的影响。煮沸法涉及加热至 95 C – 100 C 导致细胞裂解并释放细胞成分,包括 DNA。尿液样本以不同的麦克法兰标准(0.25、0.5 和 1)人工污染大肠杆菌。然后进行煮沸 DNA 分离法,然后使用 NanoDrop 分光光度计分析纯度和浓度。本研究表明,煮沸 DNA 分离法中使用的蛋白酶 K 和 RNase 浓度与随后的 DNA 纯度和浓度增加之间存在正相关性。尽管与未添加蛋白酶 K 和 RNase 相比,DNA 纯度和浓度有所增加,但与未添加蛋白酶 K 和 RNase 相比,其统计学意义并不显著,DNA 纯度的 p 值为 0.245,DNA 浓度的 p 值为 0.353。建议进一步研究在煮沸 DNA 分离法中使用更高的蛋白酶 K 和 RNase 浓度,以提高大肠杆菌 DNA 的纯度和浓度。这种增强可以改善 PCR 扩增并有助于诊断大肠杆菌相关的尿路感染。关键词煮沸法、DNA 纯度、DNA 浓度、蛋白酶 K、RNase。