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EvaGreen® 荧光 DNA 染料
EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂的浓度为 100 µM。使用前请彻底旋涡 EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂。建议在最终测定中使用 1 - 1.5 µM 的 EvaGreen® 浓度。每次测定时，按照下表所示添加 EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂。请注意，在定量 PCR 反应中，预混液的制备可能至关重要，以减少移液误差。在检测仪器上选择 EvaGreen®、SYBR® GREEN 或 FAM 的光学设置。
Qiacuity®onestep AdvancedEvagreen®手册
使用Qiacuity Digital PCR的绝对定量使用终点PCR的过程，但将PCR反应分为数千个单个分区。分区后，某些分区将不包含目标分子的副本，一些分区将包含一个目标分子的一个副本，而其他分子将包含一个以上的目标分子副本。PCR循环后，通过测量跨反应分区的荧光检测到扩增的靶标。由于模板是随机分布的，因此可以使用泊松统计来计算每个有效的可分析分区的目标分子的平均量。通过将每个分区的平均目标DNA量乘以有效分区的数量，可以计算出井的所有分区目标总数。计算目标浓度是通过指代所有可分析分区中的体积（即填充有反应混合物的分区）确定的。 通过反应混合物本身中存在的荧光染料来识别填充分区的总数。 通过DPCR的绝对定量消除了标准曲线的需求，以确定给定样品中目标RNA或DNA的量。计算目标浓度是通过指代所有可分析分区中的体积（即填充有反应混合物的分区）确定的。通过反应混合物本身中存在的荧光染料来识别填充分区的总数。通过DPCR的绝对定量消除了标准曲线的需求，以确定给定样品中目标RNA或DNA的量。