在患有各种慢性健康疾病的患者中都观察到了疲劳和伴随的“脑雾”的衰弱症状。不幸的是,目前还没有一种有效且心理测量学上合理的工具来评估这些同时发生的症状。在这里,我们报告了疲劳和认知改变量表 (FAC) 的开发和初始心理测量特性,FAC 是衡量自我报告的中枢疲劳和脑雾的指标。由于研究团队的专业知识以及已建立的 TBI 与症状复合体之间的联系,因此选择创伤性脑损伤 (TBI) 来建模和开发 FAC。潜在项目由有治疗这些症状经验的研究人员和临床医生生成,他们借鉴了相关文献并回顾了患者对过去和当前 TBI 研究中测量的反应。FAC 的 20 个候选项目——各 10 个用于评估认知改变(即脑雾)和中枢疲劳——通过在线调查在电子视觉模拟反应量表 (eVAS) 上格式化。获得了人口统计信息和 TBI 病史。总共有 519 名参与者同意并提供了可用数据(平均年龄 = 40.23 岁;73% 为女性),其中 204 人自报有 TBI 病史(75% 报告有轻度 TBI)。计算了内部一致性和可靠性值。验证性因子分析 (CFA) 检查了 FAC 的假定双因子结构和单因子解决方案以进行比较。对有和无 TBI 的参与者的两个潜在结构(认知改变、疲劳)进行了测量不变性检验。所有项目均呈正态分布。Cronbach's alpha 系数表明两个因子均具有良好的内部一致性(α = .95)。Omega 可靠性值良好(α = .95)。CFA 支持假定的双因子模型和项目载荷,其表现优于单因子模型。测量不变性发现两组之间的双因子结构是一致的。讨论了这些发现的含义、研究的局限性以及 FAC 在临床研究和实践中的潜在用途。
图 S2。反式配对切口方法导致人类 HSPC 中的 HDR 效率低下。(A) 使用 CRISPR/Cas9、单切口或反式配对切口方法在 HEK293T 细胞中将 T2A-mCherry 插入人类 B2M 基因座的靶向策略。使用没有 (pDonor) 或有 2 个靶序列 (TS) (pDonor-Nick 2) 的供体质粒。靶向 B2M 的常见 sgRNA 以红色表示。使用所示方法靶向 B2M 基因座六天后,对 mCherry + HEK293T 细胞的百分比进行 FACS 分析。图表总结了通过 FACS 测量的 mCherry + (HDR) HEK293T 细胞的频率。(B) 使用 CRISPR/Cas9、单切口或反式配对切口方法在人类 HSPC 中将 T2A- mCherry 插入人类 B2M 基因座。使用单链 (ss) AAV 和不含 (scAAV) 或含 2 个 TS 的自互补 (sc) AAV (scAAV-Nick 2 ) 作为供体模板。FACS 分析显示靶向三天后 mCherry + HSPC 的频率。条形图显示 HDR (mCherry + ) 效率。数据显示为四次独立实验的平均值 ± SD。
•细胞培养:原发性和3D培养,增殖和细胞毒性测定,肠道细胞培养•免疫学技术:ELISA,ELISA,流式细胞仪,FACS,FACS,免疫组织化学•显微镜检查:共焦,明亮领域,2-光子共摄影显微镜•分析技术:分析技术:HPLC,FPLC,FPLC,FPLC,fpa,skta,rc,lc,lc,lc,akta,lc,lc rc,lc,lc rc,lc rc,lc,rc,lc,rc,rc,lc,rc,rc,rc,lc ta,lc ta,厌食症菌群培养,16S rRNA测序,荧光原位杂交•转录组学:单细胞RNA测序,空间转录组学(Merfish)出版物
注册现已在https://cosm.md/ AHNS 2024的AHNS认证声明上开放。美国头颈协会指定这项现场活动,最多为13.25 AMA PRA类别1 CROTCT(S)TM。医师应仅要求其参与活动的程度相称。abohns连续认证成功完成了该CME活动,其中包括参与评估组件,使参与者能够在美国耳鼻喉科委员会中获得其所需的年度II部分自我评估信用 - Head and Neck Surgery的持续认证计划(以前称为MOC)。为了认识参与的目的,将参与者完成信息提交参与者完成信息是CME活动提供商的责任。ABS连续认证成功完成此CME活动,其中包括参与评估部分,使学习者能够为美国外科委员会连续认证计划的CME要求获得信用。为了授予ABS信用,向ACCME提交学习者完成信息是CME活动提供者的责任。计划主席:帕特里克·哈(Patrick HA),医学博士,FACS,计划联合主席:妮可·施密特(Nicole Schmitt),医学博士,FACS和Sidharth Puram,医学博士,博士,FACS议程:**更多信息将宣布。暂定时间表 - 约2024年5月14日,星期二(预科课程)
• 8 联管(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0264)或其他无核酸酶、PCR 级联管(固定在 PCR 架中)或 96 孔板(已验证可与您的 FACS 仪器配合使用) • 微孔板膜(USA Scientific,目录号 2920-0010),用于在分选前密封管/板 • 铝制单片箔密封(USA Scientific,目录号 2938-4100)或盖条(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0784/AB0850),用于在分选后密封管/板 • 用于 96 孔板或联管的低速台式离心机 • 适合容器中的干冰,用于快速冷冻细胞 • (可选)BD FACS 预分选缓冲液(BD Biosciences,目录号 563503) • (可选)SMART-Seq HT Kit 裂解组分(Takara Bio,目录号 634439)或 10X 裂解缓冲液(Takara Bio,目录号 635013)用于对额外的板进行分类
• 8 联管(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0264)或其他无核酸酶、PCR 级联管(固定在 PCR 架中)或 96 孔板(已验证可与您的 FACS 仪器配合使用) • 微孔板膜(USA Scientific,目录号 2920-0010),用于在分选前密封管/板 • 铝制单片箔密封(USA Scientific,目录号 2938-4100)或盖条(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0784/AB0850),用于在分选后密封管/板 • 用于 96 孔板或联管的低速台式离心机 • 适合容器中的干冰,用于快速冷冻细胞 • (可选)BD FACS 预分选缓冲液(BD Biosciences,目录号 563503) • (可选)SMART-Seq HT Kit 裂解组分(货号 634439)或 10X 裂解缓冲液(Takara Bio,货号 635013)用于对额外的板进行分类
用于样品制备•8管条(Thermo Fisher Scientific,Cat。编号ab0264)或其他不含核酸酶的PCR级管条,固定在PCR架中,或已验证的96孔板,这些板已验证以与您的FACS仪器一起使用•Microplate Film(USA Scientific,Cat。编号2920-0010)用于分类之前的密封管/板•铝单选项卡箔封封(美国科学,猫。编号2938-4100)或帽条(Thermo Fisher Scientific,Cat。编号ab0784/ab0850)•用于96孔板或管条的低速台式离心机•合适的容器中的干冰,用于闪光灯冷冻电池•(可选的)BD FACS PRACES PRACES PRACES PRES pre-SORT SORT SORT BUFFER(BD BISCIENCES,BD BISCIENCES,CAT。编号563503)•(可选)智能seq ht套件裂解组件(cat。编号634439)或10x裂解缓冲液(Takara Bio,Cat。编号635013)用于排序额外的板
图 1:动态 BH3 分析可预测不同 RMS 细胞系的化疗敏感性。(A)CW9019 细胞与治疗剂孵育 36 小时后 DBP 测定的结果。以 ∆% priming 表示的结果表示与对照细胞相比引发的增加。(B)CW9019 细胞与化疗剂孵育 96 小时后 Annexin V 和碘化丙啶/DAPI 染色和 FACS 分析导致细胞死亡。(C)RD 和 RH4 细胞与治疗剂孵育 36 小时后 DBP 测定的结果。以 ∆% priming 表示的结果表示与对照细胞相比引发的增加。(D)RD 和 RH4 细胞与化疗剂孵育 96 小时后 Annexin V 和碘化丙啶/DAPI 染色和 FACS 分析导致细胞死亡。 (E) 左图显示 36 小时时 ∆% 启动和 96 小时时 % 细胞死亡之间的相关性。右侧显示接收者操作特征曲线分析。值表示至少三次独立实验的平均值 ± SEM。** p<0.01 和 * p<0.05。
照片:(第2页)Amanda Doud,高级临床医生,BSN,RN,5 West,变革型领导,护士领导者,年度护士; (第3页,左)Stacy Nilsen,PhD,RN,CNS,ACNS-BC,世代健康。Diane Wintz,医学博士,FACS,创伤服务。凯利·赖特(Kelly Wright),MSN,MBA,RN,OCN,CHPN,AIM/Generational Health。