图1通过整合侧向流条(RAA -LF)系统,重组酶 - AID放大测定法的特异性和灵敏度。(a)横向流条的说明。FITC-生物素标记的RAA扩增子首先与胶体金标记的抗FITC抗体结合。随着偶联的飞行,该建筑群被测试线上的链霉亲和蛋白捕获。其余的复合物继续向前扩散,并被控制线的抗FITC抗体抗体捕获。在测试和控制线上的视觉带表示正读数,而控制线处的单个频段仅表示负读数。(b,c)用底漆和探针集对MPXV和VACV DNA的RAA -LF检测,靶向D6R,E9L,N3R和N4R基因。控件不包括模板控件(模拟)。(d)使用MPXV DNA作为具有横向流量读数的模板的D6R,E9L,N3R和N4R引物的检测极限。MPXV DNA浓度作为基因组拷贝/μL表示。控件不包括模板对照(模拟)。(E)在手掌温度下放大N4R引物和探针设置的横向流量结果。在指定的时间消除了10μL反应产物的体积并用横向读数进行测试。所有实验重复了三次,显示了一个代表性结果。
和流式细胞仪用于通过RWA 264.7细胞研究H40-PEG NP和ASP8 [H40-PEG@(RBC-H)] NP的摄取来评估这种能力。如图1 K,与H40-PEG加载的FITC NPS组相比,CLSM检测到的ASP8 [H40-FITC@(RBC-H)] NP的荧光强度显着弱。此外,与H40-PEG负载FITC NP相比,如流式细胞仪所示,ASP8 [H40-FITC@(RBC-H)] NPS组的相对荧光强度降低了约10%(图。1 L),与CLSM分析的结果一致(附加文件1:图S3)。这些发现表明,含有一些特殊的膜蛋白(例如CD47)的RBC-H杂种膜将H40-PEG NP赋予具有免疫逃生能力的H40-PEG NP,以避免巨噬细胞吞噬作用。因此,ASP8 [H40-FITC@(RBC-H)] NP可以避免体内巨噬细胞吞噬作用。
图 1:CHO-K1 细胞在含有或不含有 2.5 mM 丙磺舒的条件下,在 37 °C 下与含有缓冲液的 PhenoVue Fluo-4 AM 一起孵育 45 分钟。添加 ATP,使用 FITC 滤光片组在刺激前(对照)和刺激后(ATP)获取图像。
纽曼博士拥有近四十年在区域和国际层面担任过各种行业的咨询和顾问的经验。她目前担任非洲私营部门峰会 (APSS) 的首席执行官,这是一个泛非洲、无党派、非营利组织,旨在通过营造有利的商业环境来解决在非洲经商的挑战。APSS 倡导私营部门权利法案,以支持成功实施和实现非洲大陆自由贸易区的目标。在加入 APSS 之前,纽曼博士曾在 FITC Nigeria 担任首席执行官十年,这是一家非营利性专业服务公司,为尼日利亚中央银行、尼日利亚存款保险公司和所有在尼日利亚注册的存款银行等成员提供服务,截至 2019 年,为尼日利亚和国际上的 1,570 个利益相关者网络提供服务。在加入 FITC 之前,她曾在普华永道 (PwC Nigeria) 的业务咨询绩效改进实践、四家尼日利亚银行和一家国有发展金融机构 (DFI) 从事咨询工作。
转染后 48 小时收获细胞。胰蛋白酶消化后,进行 FITC-膜联蛋白 V 和碘化丙啶 (PI) 染色。使用流式细胞术用膜联蛋白 V-FITC 和 PI 的死细胞凋亡试剂盒 (Invitrogen,目录号:V13242) 分离凋亡细胞 (早期)。单克隆抗体使用与绿色荧光 FITC 染料结合的重组膜联蛋白 V 检测凋亡细胞中磷脂酰丝氨酸的外化,使用 PI 检测死细胞,其中 PI 将坏死细胞染成红色荧光。用两种探针处理后,凋亡细胞显示绿色荧光,死细胞显示红色和绿色荧光,活细胞几乎不显示荧光。Navios
该测试基于测量吞噬 FITC 标记大肠杆菌的细胞的荧光。将肝素化血液样本与荧光大肠杆菌混合,并在 37 °C 下孵育。使用不含大肠杆菌的阴性对照来设置吞噬细胞和非吞噬细胞之间的鉴别边界。通过反复清洗去除未吞噬的细菌。使用台盼蓝(一种不会穿透细胞膜的活体染料)淬灭任何剩余的细胞外或表面结合细菌。裂解红细胞,固定细胞,并用碘化丙啶染色 DNA,以区分有核细胞和细菌碎片或团块。测试中使用的大肠杆菌用人 AB 血浆调理,确保结果不主要取决于测试血液样本的调理活性。
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激化组是对细胞或组织裂解物中激酶信号传导的研究。激素学可以帮助阐明因治疗而改变的细胞信号传导途径(即药物或状况变化),或用于比较不同的表型(即增殖与非增生性)。我们的pamstation kinomic阵列平台测量了最多196个酪氨酸或144个丝氨酸/苏氨酸激酶底物的磷酸化,这些丝氨酸/苏氨酸激酶底物印在Pamchip微阵列上。动力学和稳态的单个肽磷酸化的变化是用FITC磷酸化抗体成像的,并且信号在Bionavigator中进行了定量。然后,将改变肽的改变的肽列表通过使用Kinexus phosphonet等工具,以及使用Genego Metacore的高级途径分析和网络建模来输出并分析可能的上游激酶。
亮紫421™抗小鼠TCR C/D,纯化的抗小鼠TCR C/D,生物素抗小鼠TCR C/D,FITC抗小鼠TCR C/D,PE抗小鼠TCR C/D,APC抗小鼠TCR C/D。 PERCP/CYANINE5.5 ANTI-MOUSE TCR C/D, PE/CYANINE7 ANTI-MOUSE TCR C/D, ALEXA FLUOR® 488 ANTI-MOUSE TCR C/D, Brilliant Violet 605 TCR C/D, ALEXA FLUOR® 647 ANTI-MOUSE TCR C/D, APC/Fire ™ 750 ANTI-MOUSE TCR C/D, Totalseq ™ -A0121 ANTI-MOUSE TCR C/D, Ultra-Leaf ™ Purified Anti-Mamouse TCR C/D, D, D, Totalseq ™ -C0121 Anti-Mouse TCR C/D, APC/Cyanine7 Anti-Mouse TCR C/D, Totalseq ™ -B0121 Anti-Mouse TCR C/D, Brilliant Violet 650 ™ Anti-Mouse TCR C/D, Brilliant Violet 711 ANTI-MOUSE TCR C/D,Spark Red™718抗小鼠TCR C/D(Flexi-Fluor™),Spark Blue™574反小鼠(Flexi-Fluor™)
浓度。DMEM培养基、0.25%胰蛋白酶(Gibco,美国)、胎牛血清(Every Green,中国)、青霉素和链霉素(Sigma-Aldrich,美国)、FITC Annexin V 凋亡检测试剂盒和 7-AAD(BD Biosciences,美国)、CCK-8(Dojindo,日本)、DAPI(Beyotime,中国)、TRIzol 试剂(Invitrogen,美国)、First Stand cDNA Synthesis Kit(Thermo Fisher Scientific,美国)和 UltraSYBR One-Step RT-qPCR Kit(Cwbio,中国)。所有引物均购自GeneScript(中国)。一抗p27(sc-71813)、CDK2(sc-53219)、Cyclin D1(sc-56302)、p53(sc-71819)、Bax(sc-20067)、Bcl-2(sc-56015)、cleaved PARP(sc-56196)和β-actin均购自Santa Cruz Biotechnology(美国),cleaved caspase-3[9661]和cleaved caspase-9(9505和9509)购自Cell signaling Technology(美国)。p53抑制剂(PFT-α,s2929)购自Selleck Chemicals(美国)。