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Cell-Vive™MSC无XENO生长媒体，GMP
图1。在37°C下以6,000个细胞/cm的密度为6,000个细胞的密度，在含有10％FBS或Cell-Vive™MSC无需Xeno Xeno无生长培养基（CAT＃420519）中，以6,000个细胞/cm的密度为6,000个细胞/cm的密度（CAT＃420519），将人骨骨髓衍生的间充质干细胞（BM-MSC）（BM-MSC）播种（BM-MSC）。在含有10％FBS（B）或Cell-Vive™MSC无XENO生长培养基中生长的（A）αMEM生长的粘附细胞的形态。细胞扩张（C）和细胞活力（D）在αMEM中包含10％FBS（白色条）或Cell-Vive™MSC无XENO-fime-Frent-Frention Media（CAT＃420519，黑色棒）中确定。使用PE Anti-Human CD105（克隆43A3，CAT＃323206），PE/CYANINE7 ANTI-INTI-HUMUNE CD90（CYN-HUMUNE CD90（CYAN）5E10，CLONE 73A3，CLONE 73A3，CLONE 73A3，CLONE 43A3，CAT902411281，CAT＃328181，，通过流式细胞仪（E）（CAT＃3281），通过流式细胞仪（E）（CAT＃323206），CAT-328181，通过流式细胞仪（E）（CAT＃323206），通过流式细胞仪（E）（CAT＃3281）收集和分析了第5天的代表性BM-MSC。抗人CD73（克隆AD2，CAT＃344044），FITC抗人CD45（克隆HI30，CAT＃304054）和APC抗人类CD34（克隆581，CAT＃343510）。细胞对CD105，CD90和CD73呈阳性，但缺乏CD45和CD34表达（蓝色衬里直方图）。同种型匹配的控件（黑色衬里直方图）。
Alexa Fluor® 594 抗鼠 CD4 抗体
APC抗小鼠CD4、生物素抗小鼠CD4、FITC抗小鼠CD4、PE抗小鼠CD4、PE/Cyanine5抗小鼠CD4、纯化抗小鼠CD4、PE/Cyanine7抗小鼠CD4、APC/Cyanine7抗小鼠CD4、Alexa Fluor® 647抗小鼠CD4、Alexa Fluor® 488抗小鼠CD4、Pacific Blue™抗小鼠CD4、Alexa Fluor® 700抗小鼠CD4、PerCP抗小鼠CD4、PerCP/Cyanine5.5抗小鼠CD4、Brilliant Violet 421™抗小鼠CD4、Ultra-LEAF™纯化抗小鼠CD4、Alexa Fluor® 594抗小鼠CD4、Brilliant Violet 711™抗小鼠CD4、Brilliant Violet 510™抗小鼠CD4、Brilliant Violet 605™抗小鼠CD4、Brilliant Violet 785™抗小鼠CD4、PE/Dazzle™ 594抗小鼠CD4、APC/Fire™ 750抗小鼠CD4、GoInVivo™纯化抗小鼠CD4、Brilliant Violet 750™抗小鼠CD4、Brilliant Violet 650™抗小鼠CD4、Spark Blue™ 550抗小鼠CD4、Spark NIR™ 685抗小鼠CD4、KIRAVIA Blue 520™抗小鼠CD4、PE/Fire™ 640抗小鼠CD4、APC/Fire™ 810抗小鼠CD4、PE/Fire™ 700抗小鼠CD4、Spark Violet™ 538抗
转铁蛋白受体 1 靶向
(◀图 4) B. 与 pHrodo 染料结合的双环和转铁蛋白与细胞一起孵育 18 小时，并在 Incucyte 上进行分析。C. 和 D. 将 HT1080 细胞接种过夜。将细胞在无血清培养基中孵育 60 分钟，温度为 37 °C。对于 D. 细胞在 37 °C 下用载体 (0.1% DMSO) 或 Dyngo 4a (30 µM) 预处理 30 分钟。然后将细胞与结合的双环 (1.0 µM；红色) 在 4 °C 下孵育 1 小时。然后将细胞转移到 37 °C 下 1.5 分钟以进行内吞。洗涤后，在 -20 °C 下用 80% 丙酮固定和透化细胞 10 分钟。然后将细胞在 10% 山羊血清中封闭 1 小时，并用一抗 (指示) 标记。然后用二抗（绿色）和 Hoechst（蓝色）清洗细胞并标记。三重培养孔的代表性图像。放大 40 倍。（▲ 图 5）A. 和 B. 新鲜分离的人类近端曲小管细胞接种在 transwell 插入物中，Bicycles 测试浓度为 10μM。通过质谱法测量极化细胞的跨上皮吸收和分泌通量。结果标准化为基线 FITC 标记的转铁蛋白摄取（AB 和 BA）。测量单层完整性（80-120 Ω.cm 2 跨上皮电阻）作为质量控制。
Alexa Fluor® 647 抗人 CD69 抗体
纯化抗人 CD69、FITC 抗人 CD69、PE 抗人 CD69、PE/Cyanine5 抗人 CD69、APC 抗人 CD69、APC/Cyanine7 抗人 CD69、PE/Cyanine7 抗人 CD69、Alexa Fluor® 488 抗人 CD69、Alexa Fluor® 647 抗人 CD69、Pacific Blue™ 抗人 CD69、Alexa Fluor® 700 抗人 CD69、Biotin 抗人 CD69、PerCP/Cyanine5.5 抗人 CD69、PerCP 抗人 CD69、Brilliant Violet 421™ 抗人 CD69、Brilliant Violet 785™ 抗人 CD69、Brilliant Violet 650™ 抗人 CD69、Brilliant Violet 510™ 抗人 CD69、 Brilliant Violet 605™ 抗人 CD69、纯化抗人 CD69（Maxpar® Ready）、PE/Dazzle™ 594 抗人 CD69、Brilliant Violet 711™ 抗人 CD69、APC/Fire™ 750 抗人 CD69、TotalSeq™-A0146 抗人 CD69、TotalSeq™-B0146 抗人 CD69、TotalSeq™-C0146 抗人 CD69、Brilliant Violet 750™ 抗人 CD69、KIRAVIA Blue 520™ 抗人 CD69、Spark NIR™ 685 抗人 CD69 抗体、PE/Fire™ 640 抗人 CD69、Spark YG™ 581 抗人 CD69、TotalSeq™-D0146 抗人 CD69、Spark Blue™ 550抗人 CD69、Spark Red™ 718 抗人 CD69、GMP PE 抗人 CD69、PE/Fire™ 810 抗人 CD69、PE/Fire™ 744 抗人 CD69、Spark PLUS UV395™ 抗人 CD69、Spark Blue™ 574 抗人 CD69 (Flexi-Fluor™)
玛卡酰胺 B 抑制肺癌进展...
摘要：玛卡酰胺是从玛卡中提取的一类具有生物活性的天然产物，据报道，它对癌症有抑制作用。然而，它们在肺癌中的作用目前尚不清楚。在本研究中，玛卡酰胺B被证明能抑制肺癌细胞的增殖和侵袭，这分别通过细胞计数试剂盒-8和Transwell测定确定。相反，玛卡酰胺B诱导细胞凋亡，经Annexin V-FITC测定确定。此外，玛卡酰胺B和聚（ADP-核糖）聚合酶抑制剂奥拉帕尼联合治疗进一步抑制了肺癌细胞的增殖。在分子水平上，经蛋白质印迹法测定，玛卡酰胺B显著增加了毛细血管扩张性共济失调突变（ATM）、RAD51、p53和裂解胱天蛋白酶-3的表达，而Bcl-2的表达水平降低。相反，当用小干扰RNA技术敲低ATM表达时，在用玛咖酰胺B处理的A549细胞中，ATM、RAD51、p53和cleaved caspase-3的表达水平降低，而Bcl-2的表达水平升高。一致地，ATM敲低部分挽救了细胞增殖和侵袭能力。总之，玛咖酰胺B通过抑制细胞增殖和侵袭，诱导细胞凋亡来抑制肺癌进展。此外，玛咖酰胺B可能参与调控ATM信号通路。本研究为治疗肺癌患者提供了一种潜在的新型天然药物。
SYK抑制剂减弱FcγRIIB
脾脏酪氨酸激酶（SYK）是一种重要的免疫信号传导枢纽，被活性狼疮中的几种信号激活，该信号可能受到SYK抑制剂的干扰，但仍未在与狼疮活性相关的先天免疫细胞中进行完全评估。因此，使用FC Gamma受体抑制剂（Fostamatinib; R788）使用FC Gamma受体偏见（FCγRIIB - / - ）小鼠和体外（巨噬细胞和中性粒细胞）在体内进行了测试。口服SYK抑制剂4周后，40周大的FCγRIIB - / - 小鼠（一种成熟的狼疮模型）表现出较不突出的狼疮参数（血清抗DSDNA，蛋白尿和肾小球肾炎），由全身性弹性弹药，由全身性弹药蛋白进行了血清弹药率（CITH3），肠道渗透性缺陷，如血清FITC右旋烷分析，血清脂多糖（LPS）和血清（1→3） - β-d-d-glucan（Bg），细胞外陷阱（ETS）和sple虫和免疫复数（sple和kidneys and splen and gyob coptim and groce and f uororsem g f coce）cock-d-d-glucan（bg）copects（bg）（bg）（bg）（bg）（bg）coctect and coppection（bg）。 fcγriib - / - 小鼠带安慰剂。由于血清中LPS和BG的自发升高，LPS Plus BG（LPS + BG）用于激活巨噬细胞和中性粒细胞。After LPS + BG stimulation, Fc γ RIIb − / − macrophages and neutrophils demonstrated predominant abundance of phosphorylated Syk (Western blotting), and the pro-in fl ammatory responses (CD86 fl ow cytometry analysis, supernatant cytokines, ETs immuno fl uorescent, and fl ow cytometry-based apoptosis).通过RNA测序分析和蛋白质印迹，SYK-P38MAPK-依赖性途径被认为是在LPS + BG激活的FCγRIIB - / - / - - / - < / div>中下调了几种频流途径
APC抗小鼠CD117（C-KIT）抗体
APC抗小鼠CD117（C-KIT），生物素抗小鼠CD117（C-KIT），FITC抗小鼠CD117（C-KKIT），PE抗小鼠CD117（C-KIT）（C-KIT），PE/CYANINE5 (c-Kit), Alexa Fluor® 488 anti-mouse CD117 (c-Kit), Alexa Fluor® 647 anti-mouse CD117 (c-Kit), Pacific Blue™ anti-mouse CD117 (c-Kit), PerCP/Cyanine5.5 anti- mouse CD117 (c-kit), PerCP anti-mouse CD117 (c-kit), APC/Cyanine7抗小鼠CD117（C-KIT），亮紫421™抗小鼠CD117（C-KIT），纯化的抗小鼠CD117（C-KIT）（C-KIT）（MAXPAR®就绪）（PE/DAZZLE™594 594抗小鼠CD117（C-KIT），CD117（C-KIT），出色的紫罗兰711™Anti-Anti-Anti-Mouse CD117（c-CD117），CD174（c-CD117），594（C-KIT） （C-KIT），APC/FIRE™750反小鼠CD117（C-KIT），Brilliat Violet 510™抗小鼠CD117（C-KIT），Brillial Violet 785™抗小鼠CD117（C-KIT）（C-KIT），TotalSeq™-A0012 Anti-souse CD117（C-KIT）605™（C-KIT）CD115（C-KIT）CD115™（C-KIT），CD115™™™™™™™that AlexaFluor®700抗小鼠CD117（C-KIT），TotalSeq™-B0012抗小鼠CD117（C-KIT），TotalSeq™-C0012抗小鼠CD117（C-KIT），Spark Nir™685 Anti Mouse CD117（C-KIT），Prilliet CD117（C-kit），CD117（c-kit），CD117（CD117） 718抗小鼠CD117（C-KIT）（Flexi-Fluor™），Spark Blue™574抗小鼠CD117（c-kit）（flexi-fluor™），Spark Blue™550抗小鼠CD117（c-kit）（c-kit）（flexi-fluor™）
PE抗小鼠CD19抗体
APC抗小鼠CD19，生物素抗小鼠CD19，FITC抗小鼠CD19，PE抗小鼠CD19，PE/CYANINE5抗小鼠CD19，纯化的抗小鼠CD19，PE/CYANINE7，PE/CYANINE7抗小鼠CD19 Blue™抗小鼠CD19，AlexaFluor®700抗小鼠CD19，APC/Cyanine7抗小鼠CD19，PERCP抗小鼠CD19，PERCP/CYANINE5.5抗小鼠CD19，AlexaFluor®594Anti-anti tribial cd19 CD19，辉煌紫罗兰色605™反小鼠CD19，Brillial Violet 650™反小鼠CD19，Brillial Violet 785™抗小鼠CD19，Brillial Violet 510™抗小鼠CD19，纯化的抗小鼠CD19（MAXPAR®就绪）（MAXPAR®就绪），PE/PE/DAZZLE™594 ANTI MOUSE CD194 ANTI MOUTE CD1111111111111， APC/Fire™ 750 anti-mouse CD19, TotalSeq™-A0093 anti-mouse CD19, Brilliant Violet 750™ anti-mouse CD19, TotalSeq™-B0093 anti-mouse CD19, Spark Blue™ 550 anti-mouse CD19, Spark NIR™ 685 anti-mouse CD19, TotalSeq™- C0093 anti-mouse CD19, Ultra-LEAF™ Purified anti-mouse CD19, PE/Fire™ 640 anti-mouse CD19 Antibody, Spark YG™ 581 anti- mouse CD19, APC/Fire™ 810 anti-mouse CD19, Spark YG™ 570 anti-mouse CD19, Spark Blue™ 574 anti-mouse CD19 Antibody, Spark Blue™ 515 anti-mouse CD19, Spark UV™387抗小鼠CD19，Spark Red™718抗小鼠CD19（Flexi-Fluor™），Spark Plus UV395™抗小鼠CD19，Spark Violet™538反小鼠CD19
质子泵抑制剂（PPIS）的Jurkat T淋巴细胞凋亡诱导
凋亡（通常称为程序性细胞死亡）不断发生在人类中。随着癌细胞的酸度增加，诱发了凋亡。在健康细胞中，质子泵蛋白允许H +离子渗透到细胞膜，从而调节pH值。然而，质子泵抑制剂（PPI），例如奥美拉唑，防止质子运动，导致pH调节。在先前的研究中，奥美拉唑诱导了Jurkat T淋巴细胞的细胞死亡；但是，尚无证实细胞是通过细胞凋亡或通过坏死而死亡的，而细胞爆发。通过使用膜联蛋白-V染色，可以测量奥美拉唑，右氯唑唑和埃索美吡唑对凋亡诱导的影响。细胞死亡。右兰索拉唑和埃索美拉唑在18小时时均达到100％的凋亡，表明它们具有较早的凋亡激活点。为了测量细胞活力的程度，通过用小钙蛋白 - 乙酰氧基甲基（AM）染料染色细胞来测量胞质酯酶活性。Jurkat细胞暴露于Omeprazole，Dexlansoprazole和Esomeprazole六个小时，并监测30小时以测量生存能力。阿霉素是一种已知的化学治疗性，在测试凋亡诱导和生存力时也被用作阳性对照。使用荧光显微镜成像时，由于膜联蛋白V-FITC的结合而导致凋亡荧光的任何细胞以及由于PI的结合而导致的坏死细胞荧光。用钙软蛋白AM（如果细胞荧光，它们）被认为是可行的，而非荧光细胞被认为是坏死的。在30小时的标记下，右倾角唑的生存力最小（40.0±3.5％的细胞可行），其次是阿霉素（62.9±1.8％），埃索美普唑（66.2±1.6％）和欧洲普拉唑（69.29±2.01％）（69.29±2.01％），在比较（71％）中（71％）（71％）。右兰索拉唑的生存能力低，表明需要使用相同的PPI和暴露方法进行毒性研究，以确定最佳药物浓度。奥美拉唑和埃索美瑞唑的最佳浓度为1 µm，右兰索拉唑啉为0.5 µm。未来的研究包括使用膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶（PI）染料在确定浓度下测试细胞死亡方法。
一种新型的选择性脾脏酪氨酸激酶抑制剂SKI-O-703（Cevidoplenib）在鼠模型中改善狼疮肾炎和血清诱发的关节炎
抽象脾酪氨酸激酶（SYK）通过传输免疫受体触发的信号在B细胞和先天炎症细胞的激活中起关键作用。SYK的失调活性与抗体介导的自身免疫性疾病的发展有关，包括全身性红斑狼疮（SLE）和类风湿关节炎，但SYK抑制对此类疾病的影响仍尚未得到充分评估。我们开发了一种新型的选择性SYK抑制剂SKI-O-592及其口服生物可利用盐形式，Ski-O-703（Cevidoplenib）。检查了SKI-O-703对自身免疫性阶段的新西兰黑/白鼠SLE进展的功效，并用Ski-O-703口服了16周。IgG自身抗体，蛋白尿和肾小球肾炎的水平显着下降，这与通过生发中心的卵泡B细胞失活。 在血清转移关节炎的模型中，SKI-O-703显着改善了滑膜炎，中性粒细胞较少，巨噬细胞浸润到滑膜组织中。 通过TNF阻滞剂与次优剂量的SKI-O-703相结合，将其反应为抗TNF治疗的小鼠被概括为抗TNF治疗。 这些结果表明，新型的选择性SYK抑制剂SKI-O-703通过抑制自身抗体产生和自身抗体 - 敏感性细胞来减轻自身抗体介导的自身免疫性疾病的进展。IgG自身抗体，蛋白尿和肾小球肾炎的水平显着下降，这与通过生发中心的卵泡B细胞失活。在血清转移关节炎的模型中，SKI-O-703显着改善了滑膜炎，中性粒细胞较少，巨噬细胞浸润到滑膜组织中。通过TNF阻滞剂与次优剂量的SKI-O-703相结合，将其反应为抗TNF治疗的小鼠被概括为抗TNF治疗。这些结果表明，新型的选择性SYK抑制剂SKI-O-703通过抑制自身抗体产生和自身抗体 - 敏感性细胞来减轻自身抗体介导的自身免疫性疾病的进展。关键词：系统性红斑狼疮，脾脏酪氨酸激酶，Syk抑制剂SKI-O-703，自身免疫性疾病缩写：7-AAD：7-氨基氨基氨基霉素D； AB：抗体； APC：Allophycocyanin; AutoAB：自动抗体； BAFF：TNF家族的B细胞激活因子； BCR：B细胞受体； BM：骨髓； DSDNA：双链DNA； FITC：异硫氰酸荧光素； GC：生发中心； H＆E：苏木精和曙红； IG：免疫球蛋白； ITAM：基于免疫受体酪氨酸的活化基序； KSTA：K/BXN血清转移关节炎； LN：淋巴结； LPS：脂多糖； mAb：单克隆抗体； MPK：毫克每公斤体重；点头：非肥胖糖尿病； PAS：周期性酸 - chiff； PE：PhycoeryThrin; PERCP：Peridinin叶绿素； RA：类风湿关节炎； SLE：全身性红斑狼疮； Syk：脾酪氨酸激酶； TCR：T细胞受体； TFH：滤泡辅助辅助剂T; TLR：Toll样受体； TNF：肿瘤坏死因子。