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猪Verotoxigenic的种子特异性表达...
抽象疫苗可以通过预防猪中的特定感染性疾病来减少抗生素的使用。基于植物的可食用疫苗特别有吸引力，因为在饲料口服摄入后，它们可以引起局部免疫系统，以针对引起异物的生物体进行。这项研究的目的是设计两种不同的独立烟草植物系，以作为Edible疫苗的模型的VTEC免疫原性蛋白的种子特异性表达。对于每种抗原，五十个烟田Tabacum L. cv xanthi叶盘通过农业感染转化，用于Fimbrial Subunit FedF的f18和b-Subumunit的fimbrial Subunit FedF和VT2E基因的B-亚基的结构部分的表达。由密码子适应指数在烟草中表达优化的合成基因被插入β-甘氨酸启动子的控制下的表达盒中。再生的烟草植物（T0）的特征是分子和免疫酶技术有线。我们的结果表明，FedF和VT2EB基因都有效地整合到烟草基因组中（> 80％），并且它们也保持在第二代（T1）。Western印迹分析在阳性产生线上进行，显示了种子中组织特异性的表达，并且在中期成熟阶段的时间蛋白积累。酶联免疫吸附测定的种子表达水平为0.09至0.29％（从138至444 µg/g的种子）和0.21％至0.43％（从321至658 µg/g种子的种子）的总可溶性蛋白质的总蛋白质分别相应地分别为VT2EB和VT2EB抗原。这项研究证实了所选抗原在植物种子中的种子特异性表达。表达水平适用于基于种子的可食用疫苗接种系统，这可能代表了预防VTEC感染的一种成本效益的方法。我们的发现鼓励进一步的体内研究，重点是局部免疫反应的激活。
针对产肠毒素大肠杆菌菌毛的多价候选疫苗，可广泛预防猪断奶后腹泻
摘要 菌毛介导的初始粘附是产肠毒素大肠杆菌 (ETEC) 感染所需的初始和关键步骤。因此，已经开发出针对这些菌毛并诱导特异性抗菌毛抗体以阻断 ETEC 初始粘附的候选疫苗。虽然这种疫苗可以有效预防 ETEC 相关的断奶后腹泻 (PWD)，但由于这些抗原之间的免疫异质性，开发一种广泛有效的针对 ETEC 初始粘附的疫苗仍然是一个具有挑战性的问题。在这里，我们应用多表位融合抗原 (MEFA) 技术构建了 FaeG–FedF–FanC–FasA–Fim41a MEFA，使用主要菌毛 K88 和 F18 的粘附亚基作为骨架，它还整合了来自稀有菌毛 K99、987P 和 F41 的粘附亚基的表位；然后我们生成了一个 MEFA 计算模型并在免疫小鼠中测试了这种 MEFA 蛋白的免疫原性。接下来我们通过体外评估其抗菌毛、抗体导向的细菌粘附抑制作用，评估了针对菌毛的 MEFA 作为疫苗候选物有效预防 PWD 的潜力。计算模型表明，所有相关表位都暴露在 MEFA 表面，并且用 MEFA 蛋白皮下免疫的小鼠产生了针对所有五种菌毛的 IgG 抗体。此外，MEFA 蛋白诱导的抗菌毛抗体显著抑制了 K88 + 、F18 + 、K99 + 、987P + 和 F41 + ETEC 菌株对猪小肠 IPEC-1 和 IPEC-J2 细胞系的粘附。综合起来，这些结果表明 FaeG–FedF–FanC–FasA–Fim41a MEFA 蛋白诱导了针对五种目标菌毛的特异性抗菌毛中和抗体。至关重要的是，这些结果显示了菌毛靶向 MEFA 的潜力，并表明它们有望成为一种广泛有效的 PWD 疫苗。关键词：ETEC、PWD、菌毛、MEFA、疫苗