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使用双荧光分析法筛选巨噬细胞中的炎症诱导报告基因载体
北卡罗来纳州立大学，教堂山，27599，北卡罗来纳州，美国 8 9 *通讯地址 10 Christopher E. Nelson，博士 11 生物医学工程系 12 120 John A. White Jr. 工程大厅 13 阿肯色大学 14 费耶特维尔，阿肯色州 72701 15 479-575-2615 16 nelsonc@uark.edu 17 18 摘要 19 巨噬细胞是再生医学和癌症免疫疗法等各种应用治疗的有希望的目标。由于其可塑性，巨噬细胞可以在最小的环境变化下从非活化状态转变为活化状态。为了使巨噬细胞在各自的应用中有效，有必要筛选表型变化以阐明细胞对不同运载工具、疫苗、小分子和其他刺激的反应。我们基于 NF- κ B 的激活创建了一种灵敏且动态的高通量巨噬细胞筛选方法。对于该报告基因，我们将 mCherry 荧光基因置于炎症启动子的控制之下，该启动子会募集 NF- κ B 反应元件来促进巨噬细胞炎症反应期间的表达。我们根据巨噬细胞炎症反应的关键标志物（包括 TNF- α 细胞因子释放和炎症和非炎症细胞表面标志物的免疫染色）来表征炎症报告基因。利用炎症报告基因，我们还能够创建 LPS 剂量曲线来确定报告基因的动态范围，并通过对刺激与非刺激处理的报告细胞进行时间点分析来确定报告基因对刺激的敏感性。然后，我们使用报告细胞系来确定递送效率和对不同病毒和非病毒基因递送载体的炎症反应。这里开发的筛选技术 34 提供了一种动态、高通量筛选技术，用于确定 35 小鼠巨噬细胞对特定刺激的炎症反应，并深入了解小鼠 36 巨噬细胞对不同病毒和非病毒基因传递方法的炎症反应。 37 38 简介 39 巨噬细胞是吞噬细胞，负责防御外来入侵者并维持 40 所有器官和组织 1-3 的体内平衡。根据微环境，巨噬细胞会改变功能 41 以响应局部需要。巨噬细胞的可塑性导致形成异质性 42 巨噬细胞表型群以应对情况，无论是防御、维持还是在 43 激活状态之间转换。巨噬细胞作为肿瘤相关巨噬细胞 (TAMS) 在肿瘤和 44 体内再生过程发挥作用。对于许多癌症来说，巨噬细胞在肿瘤 45 微环境中丰富，TAMS 负责促进转移、免疫抑制和 46 促进侵袭和血管生成 4 。巨噬细胞还负责维持从最初的炎症到清除外来入侵者的愈合过程，募集必要的免疫细胞，以及在再生的最后阶段解决愈合过程 5–9 。 49 50 巨噬细胞由于其在活化 51 状态之间切换的能力，可以参与各种各样的活动。对巨噬细胞极化状态的理解在不断发展，在最基本的层面上 52 要么是经典的激活/炎症状态，要么是激活/抗炎状态。这些 53 状态也被描述为 M0（静息）、M1（炎症）和 M2（抗炎）。由于 54 它们的实用性，巨噬细胞已被用于许多不同的应用，从肿瘤学的细胞疗法到再生中局部环境的重新编程 10–16 。虽然巨噬细胞提供了 56
使用无重原子敏化剂的电荷转移态荧光作为自参考来确定上转换量子产率
推荐引用 推荐引用 Kiseleva, N., Busko, D., Richards, BS, Filatov, MA, Turshatov (2020). 使用无重原子敏化剂的电荷转移态荧光作为自参考来确定上转换量子产率。《物理化学快报》11,XXX.，第 6560–6566 页。doi:10.1021/acs.jpclett.0c01902
化学传感器的荧光成像的艺术
摘要：通过光学传感器手段的成像方法应用于医学研究和诊断，空气动力学，环境分析或海洋研究等不同科学领域。在对该领域的一般介绍之后，本评论重点介绍了20122年至2022年之间发表的作品。涵盖的主题包括平面传感器（Optrodes），纳米探针和敏感涂料。高级传感器材料与成像技术相结合，可以可视化参数，这些参数没有固有的颜色或荧光，例如氧，pH，CO 2，H 2 O 2，Ca 2+或温度。在开发多个传感器和用于引用信号的方法的进展中，也强调了使用实验室中的模型系统的设备设计和应用程序格式的最新进展，或者在该领域的测量方法中的进度也是如此。
细胞活力测定套件，绿色/红色荧光
细胞活力测定试剂盒，绿色/红色荧光提供了一种方便而健壮的方法，可以通过使用两种荧光染料，钙调钙钙钙钙蛋白盐AM和碘化丙啶，从而确定细胞活力，从而可以同时检测和区分可行的和不可行的细胞。作为荧光染料，钙软糖AM最初是非荧光的。被动地进入细胞后，仅存在于活细胞中的细胞内酯酶，将小钙蛋白AM水解为钙调钙蛋白（Bratosin等人）。绿色荧光的强度与酯酶活性量成正比，因此可以与活细胞的数量相关。碘化丙啶是第二种氟化染料；但是，与钙软糖不同，它只能越过死亡细胞的受损膜。进入死细胞后，碘化丙啶在与DNA结合时会产生红色。该试剂盒中的染料非常适合与荧光显微镜或荧光微孔板读取器一起使用，该板板读取器能够在FITC（适用于钙调蛋白）和TRITC（用于碘化丙啶）通道中检测。该测定法可以检测和量化粘附或悬浮培养物中的细胞增殖，或将其纳入体外细胞毒性测定法。
Quantaurus-Tau荧光寿命光谱仪C16361系列
从有机材料或荧光探针中获得的荧光光谱是控制和评估材料功能和特性的重要参数，例如峰值波长和荧光强度。但是，荧光光谱通常显示时间整合的信息，因此，当材料包含多种物质和反应性元素时，它们的荧光光谱只能作为集成信息获取。在这种情况下，一种有效的方法是通过使用时轴参数来观察光发射动力学。这通常称为荧光寿命测量，其中通过脉冲光激发的物质返回其基态所需的时间是在亚纳秒到毫秒到毫秒的区域中测量的。此测量允许获得更多信息，例如在相同的波长和材料中存在的百分比等多种不同的荧光寿命等。
回顾食品安全中有机化合物的荧光极化测定
在食品中观察到的有毒有机化合物的浓度升高对人类健康构成严重危险。天然和人工污染物都会引起食物污染。食品生产，包装，运输和存储的阶段也可能在很大程度上引起食品中不良物质的出现。摄入含有毒性污染物的食物的健康后果范围从轻度胃炎到功能失调的内部器官和神经系统综合症导致的死亡。世界卫生组织（WHO）为食品中这种化学物质的含量设定了建议，包括被认为是对人类消费安全的最低允许浓度。但是，必须控制化学污染物的食品。此外，需要快速，敏感和廉价的方法来在需求时检测它们。当前，免疫分析方法最广泛用于确定食物中的污染物。以竞争性格式开发荧光偏振免疫测定法（FPIA）方法是一种强大而现代的工具，用于检测各种矩阵中的有机分子，从而使FPIA方法对食品安全应用有用。由于可用于测量荧光偏振信号的便携式设备，因此可以在需要时使用FPIA方法。各种荧光标签和识别元素（受体，单克隆和多克隆抗体以及纳米体）允许荧光极化（FP）测定法检测有机物质的较低限制。FP分析是一种均匀，快速和定量的方法。开发各种FP测定格式使它们有望确定粮食污染物。本评论总结了2018 - 2023年在食品中检测有机污染物（农药，激素，毒素，抗生素和其他药物）的FP分析的出版物。此外，它证明了使用这种方法在需求点确定污染物的前景，并在食品安全检查期间检测高分子量物质，真菌和细菌感染的前景。
荧光寿命成像用于量化不同肿瘤微环境中的靶向药物输送
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可证下可用（未经同行评审认证）是作者/资助者，他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2024 年 1 月 15 日发布。；https://doi.org/10.1101/2024.01.12.575453 doi：bioRxiv 预印本
用于可编程荧光的可控寿命瞬态自组装材料
瞬态结构在生物系统中发挥着多种重要作用。与构成生物组织骨架的静态结构不同，瞬态结构仅出现在特定的空间和时间尺度上，以在生命周期中履行其职责。尽管人工分子自组装研究领域取得了重大进展，但构建功能性瞬态结构仍然具有挑战性。本文报道了通过不利于组装的主客体相互作用形成瞬态配位自组装结构及其荧光。发光配体和环糊精之间的主客体相互作用极大地改变了配位自组装的动力学，从而形成了瞬态结构。与典型的单体发射在紫外区域的静态平衡结构不同，瞬态自组装形成准分子，从而导致可见光发射。更有趣的是，瞬态结构的生命周期可以通过改变主客体比、配体金属比以及温度来轻松调节。这使得创建模拟植物在不同生命阶段生长的生命模式成为可能。因此，可以预见，瞬态分子自组装的创建将在具有动态功能先进材料的分子自组装领域开辟新范式。
等离子增强的NIR -II下调荧光超过1500 nm，距离核 - 壳 - 壳灯笼纳米颗粒
本文报告了NAGDF 4：YB，ER，CE@NAGDF 4：YB，ND@NAGDF 4 Core-Shell-Shell-Shell downversion纳米粒子（CSS-DCNPS）在近红外第二个生物窗口（NIR-II：1000-1700 nm）中的光（csss-dcnps）报道。Through a precisely controlled plasmonic metallic nanostructure, fluorescence from Yb 3 + induced 1000 nm emission, Nd 3 + induced 1060 nm emission, and Er 3 + induced 1527 nm emission are enhanced 1.6-fold, 1.7-fold, and 2.2-fold, respectively, under an 808 nm laser excitation for the CSS-DCNPs coupled with a gold在980 nm激光激发下，ER 3 +诱导的ER 3 +诱导的1527 nm发射的孔CAP纳米架（Au-HCNA）的增强量可提高6倍。为了深入了解增强机制，通过FDTD模拟和寿命测量结果研究了ER 3 +诱导的NIR-II在1550 nm下的ER 3 +诱导的NIR-II排放的调节，这表明观察到的散热增强可归因于增强的激发和增强的辐射式差异的组合。