未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者(此版本于 2023 年 7 月 15 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.07.15.549169 doi:bioRxiv preprint
三维(3D)特定细胞种群,蛋白质表达模式或整个大脑水平的病理标记物的可视化代表了神经科学中的宝贵工具。光学投影断层扫描(OPT)和光板荧光显微镜(LSFM)是高分辨率的光学3D成像技术,可以在介质尺寸(MM-CM范围)透明标本中特异性标记的目标可视化(Sharpe等,2002; Dodt et al。,2007年)。因此,这些光学技术非常适合于体内整个啮齿动物脑成像,从而在完整大脑的细胞分辨率下提供信息(Alanentalo等,2007; Hansen等,2020)。与其他功能成像方式一致,OPT和LSFM对其目标表现出很高的灵敏度和特异性,但仅提供非常有限的解剖信息。考虑到大脑的高度分室解剖结构以及这些区域履行的特定作用,至关重要的是能够将OPT或LSFM获得的荧光信号映射到注释的大脑区域。在解剖学上绘制蛋白质表达谱并在这些图像上执行3D定量和统计的可能性将极大地使光学中学成像在神经科学中的应用有益。
和组织、蛋白质组学、药物开发和疾病诊断。在临床诊断中,基于荧光的传感被广泛用于荧光标记的形式,其能够快速、灵敏地定量检测目标分析物。此外,与其他检测方案相比,具有不同光谱特征的各种有机荧光染料的可用性使得能够对来自同一样本的几种分析物进行多路复用测量。荧光检测已经在许多临床诊断工具中实现,例如荧光免疫测定(例如,荧光链接免疫吸附测定(FLISA)、直接荧光抗体(DFA)测试和间接荧光抗体(IFA)测试)、荧光原位杂交(FISH)、蛋白质印迹(WB)、聚合酶链反应(PCR)和流式细胞术。然而,实验室测试程序可能很耗时,需要训练有素的人员和专门的设备,因此通常与较高的成本相关。即时诊断 (POCT) 领域发展迅速,它能够在需要立即做出临床决策或资源有限的环境下提供经济实惠且易于操作的诊断,从而有可能彻底改变临床护理。[1] 即时诊断设备的标准由世界卫生组织的 ASSURED 指南设定,其中理想的即时诊断系统应经济实惠(对于有感染风险的人)、灵敏(假阴性最少)、特异(假阳性最少)、用户友好(测试步骤最少)、快速而强大(周转时间短且无需冷藏)、无需设备(不需要复杂的设备)并可即时交付(交付给最终用户)。[2] 目前,大量研究工作致力于探索最适合即时诊断的可能检测方案。现有的例子包括但不限于电化学、磁性、表面等离子体共振 (SPR)、质谱、拉曼散射、比色和荧光生物传感器。为了缩小本综述的范围,本文我们将仅关注基于荧光的测试,因为其他技术已在其他地方进行了综述。[3–13]
尽管BBTD是NIR-II发射荧光团中的一个良好的受体,但仍然需要找到D – A – D化合物的替代电子接受部分。潜在的替代天然是噻硫代二唑(TTD),它是BBTD的一种类型的受体类型,但没有像一个小分子荧光团那样广泛研究,通常降级为有机电子领域。23,24尽管迄今为止其合成的可及性更为有利,但只有一个出版物已使用TTD作为受体部分,从而导致了NIR-II发射的D – A-D荧光团。25荧光菌的NIR-II发射特性是由延长的共轭长度产生的,因此是狭窄的Homo-Lumo间隙。25尽管共轭框架的延伸是将光学特性延伸到NIR-II中的有效方法,但它可以导致分子间相互作用增加,并减少生物成像目的的光物理表现。26先前,我们合并了一系列基于TTD的荧光团,这些荧光团利用芳基胺氨基甲唑作为供体单元,其发射最大为900 nm,发射带延伸到NIR-II。27我们利用电子顺磁共振光谱(EPR)来合理化量子屈服值的差异,并提供了基于TTD的基于TTD的小分子荧光团上的激进物种的证据。尽管拥有出色的受体和捐助者,但这些研究强调了集体,竞争过渡和有效的P-贡献对NIR -II荧光团设计和应用的影响。
View the Amplification Plots 197 View data for a single data point 197 Select a fluorescence data type 198 Specify the use of smoothing 198 Adjust the graph properties 199 Adjust the baseline correction settings 199 Adjust the crosstalk correction settings 201 Select the scale (linear or log) of the Y-axis 206 Manually adjust threshold fluorescence values 207 Adjust threshold fluorescence values by altering the algorithm settings 209 Lock or unlock the阈值荧光值210
1外科部,莱顿大学医学中心,荷兰2333 ZA LEIDEN; f.a.vuijk@lumc.nl(F.A.V. ); j.a.stibbe@lumc.nl(J.A.S. ); r.d.houvast@lumc.nl(R.D.H. ); b.a.bonsing@lumc.nl(B.A.B. ); c.f.m.sier@lumc.nl(c.f.m.s. ); p.j.k.kuppen@lumc.nl(P.J.K.K. ); kb@chdr.nl(J.B。); a.l.vahrmeijer@lumc.nl(A.L.V. ); j.s.d.mieog@lumc.nl(J.S.D.M.) 2尼德兰Za Leiden 2333 Za Leiden的莱顿大学医学中心医学肿瘤学系; S.A.C.Luelmo@lumc.nl 3病理学系,莱顿大学医学中心,荷兰2333 Za Leiden; A.S.L.P.Crobach@lumc.nl 4莱顿大学医学中心放射科,荷兰2333 Za Leiden; s.feshtali@lumc.nl 5 5号放射科,核医学科,莱顿大学医学中心,荷兰2333 ZA LEIDEN; l.f.de_geus-oei@lumc.nl 6生物医学光子成像小组,Twente大学,7522 NB NB ENSCHEDE,荷兰7 Percuros B.V. R.J.Swijnenburg@amsterdamumc.nl 9放射科,核医学部,阿姆斯特丹UMC,位置VUMC,荷兰1081 HV阿姆斯特丹; ad.windhorst@amsterdamumc.nl 10人类药物研究中心,2333 CL LEIDEN,荷兰 *通信:m.a.van_dam@lumc.nl;电话。 : +31-71-529-84-201外科部,莱顿大学医学中心,荷兰2333 ZA LEIDEN; f.a.vuijk@lumc.nl(F.A.V.); j.a.stibbe@lumc.nl(J.A.S.); r.d.houvast@lumc.nl(R.D.H.); b.a.bonsing@lumc.nl(B.A.B.); c.f.m.sier@lumc.nl(c.f.m.s.); p.j.k.kuppen@lumc.nl(P.J.K.K.); kb@chdr.nl(J.B。); a.l.vahrmeijer@lumc.nl(A.L.V.); j.s.d.mieog@lumc.nl(J.S.D.M.)2尼德兰Za Leiden 2333 Za Leiden的莱顿大学医学中心医学肿瘤学系; S.A.C.Luelmo@lumc.nl 3病理学系,莱顿大学医学中心,荷兰2333 Za Leiden; A.S.L.P.Crobach@lumc.nl 4莱顿大学医学中心放射科,荷兰2333 Za Leiden; s.feshtali@lumc.nl 5 5号放射科,核医学科,莱顿大学医学中心,荷兰2333 ZA LEIDEN; l.f.de_geus-oei@lumc.nl 6生物医学光子成像小组,Twente大学,7522 NB NB ENSCHEDE,荷兰7 Percuros B.V. R.J.Swijnenburg@amsterdamumc.nl 9放射科,核医学部,阿姆斯特丹UMC,位置VUMC,荷兰1081 HV阿姆斯特丹; ad.windhorst@amsterdamumc.nl 10人类药物研究中心,2333 CL LEIDEN,荷兰 *通信:m.a.van_dam@lumc.nl;电话。: +31-71-529-84-20
3D器官建模的新兴领域遇到了几个成像问题,尤其与染色过程中抗原检索和样品丢失有关。由于其紧凑的形状,几种抗体无法穿透完整的类器官或球体。可以通过石蜡包含在5μm处进行Orga-NOID的组织学来接近生物疾病。然而,为了充分理解器官行为,包括细胞组织,细胞外基质结构及其对处理的反应,3D成像是必不可少的。在这里,我们提出了一个简单的工作流程,允许(1)通过较高的步骤进行免疫染色,(2)预先确定器官的完整形状,((3)样品固定在焦平面中,可用于高分辨率/短工作距离镜头,以及(4)最小化珍贵材料损失的风险。
提出了两个多弹性热激活的延迟荧光(MR-TADF)发射器,并显示了如何进一步的深蓝色MR-TADF Emitter(didobna-n)的blueShifts,blueshifts,并缩小产生新的近乎UV的MR-TADDF EMitter,MESB-DIDOBNA-N,MESB-DIDOBNA,MESB-DIDOBNA-N。didobna-n发出明亮的蓝光(𝚽 pl = 444 nm,fwhm = 64 nm,𝚽 pl = 81%,𝝉 d = 23 ms,tspo1中的1.5 wt%)。基于此扭曲的MR-TADF化合物的深蓝色有机发光二极管(OLED)显示,CIE Y的设备为0.073的设备的最大最大外部量子效率(EQE MAX)为15.3%。融合的平面MR-TADF发射极,MESB-DIDOBNA-N显示出近量的较小和窄带(𝝀 pl = 402 nm,fWHM = 19 nm,𝚽 pl = 74.7%,𝝉 d = 133 ms,TSPO1中的1.5 wt%)。掺有共同主持人的MESB-DIDOBNA-N最好的OLED显示出近紫外OLED的最高效率为16.2%。以0.049的CIE坐标为0.049,该设备还显示了迄今为止MR-TADF OLED的最蓝EL。
转化的生长因子-BETA(TGFβ)信号通路在建立免疫抑制性肿瘤微环境中起着至关重要的作用,使抗TGFβ剂成为癌症免疫疗法的重要领域。然而,针对上游细胞因子和受体的当前抗TGFβ药物的临床翻译仍然具有挑战性。因此,小分子抑制剂的发展特异性靶向TGFβ途径的下游主调节器SMAD4,将采取一种替代方法,具有明显的抗TGFβ信号传导的替代方法。在这项研究中,我们介绍了在超高通量筛选(UHTS)1536孔板格式中基于细胞裂解物的多路复用时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)测定。该测定法可以同时监测SMAD4和SMAD3之间的蛋白质 - 蛋白质相互作用,以及SMADS及其共识DNA结合基序之间的蛋白质-DNA相互作用。多路复用的TR-FRET分析表现出高灵敏度,从而使单氨基酸分辨率下的Smad4-Smad3-DNA复合物进行了动态分析。此外,多路复用的UHTS分析证明了筛选小分子抑制剂的鲁棒性。通过对FDA批准的生物活性化合物库进行试验筛选,我们将gambogic Acid和Gambogenic Acodic鉴定为潜在的HIT化合物。这些概念验证的发现强调了我们优化的多重TR-FRET平台的大规模筛选的实用性,以发现针对SMAD4-SMAD3 – DNA复合物作为新型抗TGFβ信号剂的小分子抑制剂。
摘要:荧光检测是目前世界范围内常用的技术之一。本文讨论了一种有趣的复合材料的制备和光学特性。结果表明,将溶胶-凝胶自燃法获得的钴尖晶石铁氧体 (CoFe 2 O 4 ) 封装到聚[二苯基-甲基 (H)]硅烷基质中,可得到具有有趣光学特性的氟磁性粒子 (PSCo)。透射电子显微镜结合能量色散 X 射线分析显示,500 nm 大的球形结构包含一个由磁性铁氧体颗粒组成的核心(直径约 400 nm),周围包裹着一层薄薄的半导体荧光聚合物。所获得的材料表现出亚铁磁性。FTIR 光谱证实聚硅烷的 Si-H 功能得以保留。紫外光谱结合分子建模研究表明,磁芯对 σ 共轭聚硅烷分子内电子跃迁特性有很强的影响。稳态荧光光谱的进一步分析表明,内部磁场大大增强了聚硅烷的发射。未来将进一步研究这一特性,以开发新的检测装置。