XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemGFP
AccuTool™ sgRNA-(GFP) 合成 (dRGEN)
DNA 引导的 RNA 引导内切酶 (dRGEN) 是高效、经济且方便的基因组编辑实验工具。AccuTool™ dRGEN 可识别长度为 23 bp 并以两个鸟嘌呤 (GG) 结尾的目标序列。定制 sgRNA 表达质粒可与 Cas9 表达质粒（人类密码子优化，WT/Nickase/Sniper 形式可用）一起使用。质粒可以通过任何标准方法（如脂质转染、纳米颗粒或电穿孔）递送到您感兴趣的细胞中，以实现高效递送。sgRNA-GFP 表达质粒是通过将 GFP 构建体插入现有 sgRNA 质粒中构建的。sgRNA-GFP 表达质粒可让您通过荧光显微镜确认细胞中的活性水平。 AccuTool™ dRGEN 是一种定制设计的 sgRNA，以 sgRNA 表达质粒或 sgRNA-GFP 表达质粒的形式提供。应用
Cas9 核酸酶 GFP NLS 蛋白
产品描述 成簇的规则间隔短回文重复序列 (CRISPR)/Cas9 系统是基因组编辑中最新的 RNA 引导核酸内切酶工具，可实现非常具体的基因组破坏和替换。Cas9 核酸酶 NLS 与 GFP 的融合可实现转染的视觉确认以及随后的 Cas9 从细胞中清除的验证。Cas9 核酸酶-GFP 也可用于 FACS 应用和筛选。Cas9 核酸酶-GFP NLS 在蛋白质的 C 端包含 SV40 T 抗原核定位序列 (NLS)。
GFP转基因恒河猴的克隆和碱基编辑...
我们报告了通过体细胞核移植 (SCNT) 和胚胎碱基编辑克隆了一只 12 岁的转基因绿色荧光蛋白 (GFP) 猴，同时对腺嘌呤碱基编辑器 (ABE) 进行了安全性评估。我们首先展示了 ABEmax 通过在 293T 细胞中对 GFP 序列进行 A 到 G 编辑来沉默 GFP 的能力。随后，使用表达 GFP 的猴子的供体细胞，我们成功生成了 207 个 ABEmax 编辑 (SCNT-ABE) 和 87 个野生型 (SCNT) 胚胎，用于胚胎移植、基因分型以及基因组和转录组分析。使用一种名为 OA-SCNT 的新方法，对 SCNT-ABE 和 SCNT 胚胎进行比较以进行脱靶分析，而无需遗传变异的干扰。在编辑的猴胚胎中，ABEmax 不会诱导明显的脱靶 DNA 突变，但会诱导广泛的脱靶 RNA 突变，其中 35% 是外显子。研究结果为ABE的临床应用提供了重要参考。
Cav-1 :: GFP在C. exkemans中的内源表达和定位
小窝蛋白是负责形成口洞的整体膜蛋白，与各种疾病状态相关的质膜的内陷（Parton等人2020）。在秀丽隐杆线虫中，有两个小窝蛋白Cav-1和cav-2。CAV-1基因与所有三个哺乳动物小窝蛋白基因共享同源性（Tang等人1997）。 秀丽隐杆线虫Cav-1蛋白似乎并不形成小窝，但是Cav-1和Cav-2的双敲击突变体会影响产卵，而Cav-1的敲低会影响动态突变体背景中的运动（Parker等人 。 2007，Kirkham等。 2008，Sato等。 2008）。 基于外源表达，Cav-1 :: GFP众所周知，众所周知，卵形颗粒和质膜中的质膜和早期胚胎，在后来的胚胎中，质膜，以及幼虫和成人蠕虫中的神经肌肉系统（Sato等）（Sato等。 2006，Bembenek等。 2007，Parker等。 2007）。1997）。秀丽隐杆线虫Cav-1蛋白似乎并不形成小窝，但是Cav-1和Cav-2的双敲击突变体会影响产卵，而Cav-1的敲低会影响动态突变体背景中的运动（Parker等人。2007，Kirkham等。 2008，Sato等。 2008）。 基于外源表达，Cav-1 :: GFP众所周知，众所周知，卵形颗粒和质膜中的质膜和早期胚胎，在后来的胚胎中，质膜，以及幼虫和成人蠕虫中的神经肌肉系统（Sato等）（Sato等。 2006，Bembenek等。 2007，Parker等。 2007）。2007，Kirkham等。2008，Sato等。 2008）。 基于外源表达，Cav-1 :: GFP众所周知，众所周知，卵形颗粒和质膜中的质膜和早期胚胎，在后来的胚胎中，质膜，以及幼虫和成人蠕虫中的神经肌肉系统（Sato等）（Sato等。 2006，Bembenek等。 2007，Parker等。 2007）。2008，Sato等。2008）。 基于外源表达，Cav-1 :: GFP众所周知，众所周知，卵形颗粒和质膜中的质膜和早期胚胎，在后来的胚胎中，质膜，以及幼虫和成人蠕虫中的神经肌肉系统（Sato等）（Sato等。 2006，Bembenek等。 2007，Parker等。 2007）。2008）。基于外源表达，Cav-1 :: GFP众所周知，众所周知，卵形颗粒和质膜中的质膜和早期胚胎，在后来的胚胎中，质膜，以及幼虫和成人蠕虫中的神经肌肉系统（Sato等）（Sato等。2006，Bembenek等。 2007，Parker等。 2007）。2006，Bembenek等。2007，Parker等。 2007）。2007，Parker等。2007）。2007）。
一种快速对基因进行 GFP 标记并富集编辑细胞的方法
图 1. 供体 DNA 模板设计。TrueTag 供体 DNA 试剂盒提供用于 (A) N 端标记或 (B) C 端标记目标基因的 PCR 模板。具有短同源臂 (HA) 序列的位点特异性引物用于 PCR 扩增以生成供体 DNA 分子。通过 CRISPR-Cas9 或 TALEN ™ 系统切割目标位点后，供体 DNA 在 HDR 过程中整合到基因组中。2A 自切割肽 (2A) 允许选择标记 (嘌呤霉素或杀稻瘟素) 和标记基因从内源启动子表达。每个模板的通用引发序列 (Uni) 允许轻松设计 PCR 引物。
通过恢复 GFP 活性来优化水稻、花生、鹰嘴豆和豇豆原生质体中的 Prime Editing
摘要：植物基因组的精确编辑一直是功能基因组研究和作物育种的迫切需要。Prime 编辑是一种新开发的基于 CRISPR-Cas9 的精确编辑技术，它使用工程逆转录酶 (RT)、催化受损的 Cas9 内切酶 (nCas9) 和 Prime 编辑向导 RNA (pegRNA)。此外，Prime 编辑比碱基编辑具有更广泛的编辑类型，可以产生几乎所有类型的编辑。虽然 Prime 编辑最早是在人类细胞中建立的，但它最近才被应用于植物。作为一种相对较新的技术，需要进行优化以提高不同作物的编辑效率。在本研究中，我们成功地编辑了水稻、花生、鹰嘴豆和豇豆原生质体中的突变体 GFP。在水稻中，双 pegRNA 的编辑效率比单 pegRNA 载体高出 16 倍。用双 pegRNA 载体转化花生、鹰嘴豆和豇豆后，也获得了编辑突变的 GFP 原生质体，尽管编辑效率比水稻低得多，范围从 0.2% 到 0.5%。这些初步结果有望加快在豆科植物育种计划中应用主要编辑，以加速作物改良。
使用GFP -GAN -IJRPR
该项目探讨了深度学习对视频修复中面部增强的潜力。我们利用了GFP-GAN模型的力量，利用其完善面部细节并提高视觉质量的能力。通过整合预处理技术并可能利用CUDA进行GPU加速，我们旨在实现有效的视频恢复，重点是面部增强。该项目的成功实施为进一步的探索铺平了道路。我们可以调查面部识别模型的整合，以进行后处理分析，或者更深入地研究针对特定视频恢复需求的定制GFP-GAN模型。随着深度学习的不断发展，增强和恢复视频的可能性对各种应用具有巨大的潜力。
探索人工智能对 GFP 阿曼学生激励教学策略的影响
摘要：这项定性研究旨在调查人工智能 (AI) 作为教育意义的一部分对激励教学策略的影响，以提高苏哈尔大学 GFP 学生的学习积极性。抽样是有目的的和有经验的，包括苏哈尔大学 (普通基础课程) 的 15 名教师、15 名英语教师、5 名小学教师、5 名初中教师和 5 名中级教师。对这些教师进行了半结构化访谈，并通过定性语义分析对收集的数据进行了分析。研究结果表明，尽管 GFP 教师在制定激励教学策略方面发挥着非常有效的作用，但 GFP 学生仍然缺乏动力，尽管在重要的学习环境中使用智能有效的学习工具和提高积极性仍然是一项非常关键的任务，需要付出很多努力，因为学生的学习方式不同，他们有不同的心理问题阻碍了他们的积极性。该研究建议教师继续使用人工智能工具支持的激励教学策略，并调整学习含义以增强激励教学策略。
使用 TrueDesign 基因组编辑器中的长插入工作流程将 GFP 序列插入 TRAC 基因座
8. TrueDesign 基因组编辑器将显示优先设计为最接近预期编辑位置（最多 40 bp 距离）的 gRNA 和供体 DNA。gRNA 距离编辑位置越远，敲入效率越低。所有设计的供体 DNA 序列（现在包括同源臂）都将接受 GeneArt 基因合成制造可行性检查。如果供体 DNA 未通过检查，您将无法选择该 gRNA，并且该行将变灰。在这种情况下，请选择不同的 gRNA 或 TALEN 对（如果可用），或更改插入位置或同源臂长度。对于每个 CRISPR-Cas9 gRNA 和 TALEN 对，可以通过单击供体 DNA 列中的眼睛图标来查看供体 DNA 序列。要在您选择的克隆软件中查看和注释供体 DNA 序列，请单击供体 DNA 列中的下载图标下载 FASTA 文件。确保供体 DNA 位于框架内以实现 GFP 的最佳表达。
比较mRNA和质粒的有效性
摘要自适应CAR-T细胞疗法是一种创新的肿瘤学方法，它使用遗传修饰的T细胞作为打击癌症的治疗工具。与病毒向量相比，在体外（IVT）mRNA作为获得CAR-T淋巴细胞的载体的使用具有多个优点，例如：缺乏细胞基因组的修饰，高效率的转染效率，速度，速度，速度，速度的高效率和最终产物的潜在降低成本。使用模型DNA-肾脏（PMAXGFP）和IVT MRNK（MRNK-GFPP）（MRNK-GFPP）编造在外周血和远处培养细胞的单核细胞（人类肾脏的胚胎细胞，HEK293）的工作中研究了使用DNA-PlazMIDA模型（PMAXGFP）和IIVT MRNK（MRNK-GFPPPRERETION ENCODENTENT）， GFP）。 已经进行了最佳转染模式的选择。 表明，尽管MRNK-GFP给出了表达GFP，细胞活力的细胞数量可比数量，因此，当使用mRNA-GFP作为载体时，转染的有效性显着更高。 同时，用两种方法传递的细胞表达水平的比较表明，mRNA的使用给出了更均匀的指标，而当使用质粒载体时，表达水平的水平差异几个数量级。 比较了转染后7天内表达水平的变化。在外周血和远处培养细胞的单核细胞（人类肾脏的胚胎细胞，HEK293）的工作中研究了使用DNA-PlazMIDA模型（PMAXGFP）和IIVT MRNK（MRNK-GFPPPRERETION ENCODENTENT）， GFP）。已经进行了最佳转染模式的选择。表明，尽管MRNK-GFP给出了表达GFP，细胞活力的细胞数量可比数量，因此，当使用mRNA-GFP作为载体时，转染的有效性显着更高。同时，用两种方法传递的细胞表达水平的比较表明，mRNA的使用给出了更均匀的指标，而当使用质粒载体时，表达水平的水平差异几个数量级。比较了转染后7天内表达水平的变化。表明，GFP阳性细胞的份额随着时间的推移而降低，并且不取决于转染的方法，而对可行细胞的份额的评估表明，使用plasmida的转移会导致7天后可行细胞的份额降低至30％，而mRNA的使用实际上不会影响7天的使用情况（实际上与7天相差不同）。获得的结果表明，使用IVT mRNA可以是通过电穿孔生产CAR-T产品的更可取的工具。