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干细胞通常依靠来自利基市场的信号,在许多组织中,这些信号采用了精确的形态。仍然难以捉摸的是生态位的形成方式以及形态如何影响功能。为了解决这个问题,我们利用了果蝇性促性gonadal壁基,提供遗传性障碍和现场成像。我们先前已经显示了将小众细胞迁移到性腺中适当位置的机制,以及对小众功能的结果。在这里,我们表明,一旦定位,生态位细胞可牢固地极化丝状肌动蛋白(F-肌动蛋白)和非肌肉肌球蛋白II(MyOII),向相邻的生殖细胞。沿利基外围的肌动蛋白张力产生高度可重现的平滑轮廓。没有收缩性,壁ni是错误的,并且在调节生殖线干细胞行为的能力方面表现出缺陷。我们还表明生殖细胞有助于在小众细胞中偏振肌无力,并且外在输入是生态形态发生和功能所必需的。我们的工作揭示了一种反馈机制,其中干细胞塑造了指导其行为的利基市场。关键词果蝇,干细胞,睾丸,利基,反馈,肌动蛋白收缩力,形态发生
以下成分(以下称为“组织”)在每只鱼时被解剖:大脑,尾骨,背部肌肉,胆囊,g丝,性腺,心脏,心脏,肠,肝脏,肝脏和胃衬里。仅采样白色肌肉组织;将背部肌肉在背鳍插入底部的孔和通风口前的后方采样,然后将尾肌放在脂肪鳍后的后方,并在尾部的前面。在分析之前,将皮肤,骨骼和软骨从白色肌肉组织中去除。性腺被整体取样,并不区分为睾丸或卵巢,因为柳叶鱼大于100 cm是同时的雌雄同体(Bañon等人。2022)。胃被清空,用Milli-Q水冲洗以清除所有内容物。解剖后,将所有组织用Milli-Q轻轻冲洗,以避免样品之间的污染,放置在预先投资的旋风中,并在干燥之前和之后称重以测量水分含量。组织在-80°C中冷冻,然后在旋转式中进行冷冻干燥和匀浆或使用电子磨坊(IKA管磨机100控制)。铣削容器和工具在样品之间用95%的乙醇清洁。
细胞培养系统已用于研究遗传分析,激素调节,细胞因子分泌,病毒滴定和药物敏感性,以代替活动物,因为培养的细胞模仿了实验中的整个生物体。因此,将来将增加细胞培养系统的有用性。特别是,在细胞毒性化合物的assray中,不需要动物的系统非常出色。是从大鼠,小鼠和人类等乳腺组织中建立了大量细胞系,因为它们已在实验室中被用于实验室。此外,精确地研究了许多生化反应。最近,不仅从科学的角度,而且还从社会观察者那里讨论了环境激素(内部灌木丛)或二恶英对生物体的影响。要评估这些影响,还应检查其他动物,因为它们直接暴露于环境污染物。因此,鱼是研究这些综合对生物体影响的最好动物之一(Babich和Borenfreund,1987)。此外,许多来自g,鳍,性腺,睾丸,肾脏等的鱼类细胞系。(Wolf and Mann,1980;
细胞培养系统已用于研究遗传分析,激素调节,细胞因子分泌,病毒滴定和药物敏感性,以代替活动物,因为培养的细胞模仿了实验中的整个生物体。因此,将来将增加细胞培养系统的有用性。特别是,在细胞毒性化合物的assray中,不需要动物的系统非常出色。是从大鼠,小鼠和人类等乳腺组织中建立了大量细胞系,因为它们已在实验室中被用于实验室。此外,精确地研究了许多生化反应。最近,不仅从科学的角度,而且还从社会观察者那里讨论了环境激素(内部灌木丛)或二恶英对生物体的影响。要评估这些影响,还应检查其他动物,因为它们直接暴露于环境污染物。因此,鱼是研究这些综合对生物体影响的最好动物之一(Babich和Borenfreund,1987)。此外,许多来自g,鳍,性腺,睾丸,肾脏等的鱼类细胞系。(Wolf and Mann,1980;
Gonad Development Week 1: Beginning of Development Week 2: Formation of the Bilaminar Embryo Embryonic Period (Weeks 3-8) Histology: Epithelia Cytoskeletal and Cell Surface Elements Vertebral Column Spinal Nerves Autonomic Nervous System Sympathetic Nervous System Parasympathetic Nervous System Chest Wall Lungs Heart Development of Heart Development of Atrial Septums Atrial Septal Defect Ventricular Septum Fetal Heart Abnormalities Fetal Circulation and Shunts Adult Heart Cardiac Conduction Mediastinum Abdominal Wall Inguinal Hernia Descent of Testis and Femoral Hernia Embryology of Gut Tube Foregut development Pancreas and Duodenum Development Development of the Spleen Peritoneum and Rotation of the Gut Histology of the GI Tract Intestinal Histology Histology of Salivary Glands, Pancreas, and Liver Arterial胃肠道静脉排水的血液供应尿液系统骨盆和腹部成像的尿道尿液系统胚胎学上肢上肢臂丛神经损伤和肩cuff肩cuff下肢腰椎腰椎肿瘤的下肢腰椎供应下肢和脑颈部的脑部和脑颈部脑部和脑颈部的脑部和脑颈部脑部的脑部和颈部脑部的脑部和颈部脑颈部的促进,并促进脑颈部的脑颈部和颈部脑颈部和颈部颈部的脑部和颈部脑颈部和颈部脑颈部的脑部和发展衍生物:外胚层自主神经系统:神经系统轴突转运的脊髓组织学的一般组织副交感神经和交感神经流出横截面
海洋酸化会显着影响牡蛎等海洋钙化剂,保证研究分子机制(如DNA甲基化),这些机制响应环境变化而导致自适应可塑性。然而,在海洋无脊椎动物中,甲基化模块基因表达和可塑性的程度尚未达成共识。在这项研究中,我们研究了PCO 2对基因表达和DNA甲基化的影响,在牡蛎crassostrea virginica中。暴露于30天的对照(572 ppm)或升高的PCO 2(2,827 ppm)后,由成年雌性性腺组织和雄性精子样本产生了整个基因组Bisulfite测序(WGB)和RNA-SEQ数据。尽管在女性(89)和雄性(2,916)中鉴定出差异化甲基化的基因座(DML),但没有差异表达的基因,并且在女性中只有一个差异表达的转录本。然而,基因体甲基化影响了精子中其他形式的基因活性,例如每个基因表达的最大转录本数以及表达的主要转录本的变化。升高的PCO 2暴露增加了男性基因表达变异性(转录噪声),但女性的噪声降低,表明甲基化在基因表达调节中的性别特异性作用。对转录级表达变化或含有DML的基因的功能注释显示,有几个富集的生物学过程可能参与了升高的PCO 2响应,包括凋亡途径和信号转导,以及生殖功能。综上所述,这些结果表明,DNA甲基化可能调节基因表达变异性,以维持升高的PCO 2条件下的稳态,并且可能在海洋无脊椎动物的环境弹性中发挥关键作用。
细菌免疫。Science。337 : 816-821, 2012。6)Gaj T, Gersbach CA, Barbas CF.: 基于ZFN、TALEN 和CRISPR/Cas 的基因组工程方法。Trends. Biotechnol. 31 : 397-405, 2013。7)Doudna JA, Charpentier E.: 基因组编辑。利用CRISPR-Cas9 进行基因组工程的新前沿。Science。346 : 1258096, 2014。8)Strecker J, Ladha A, Gardner Z 等:利用CRISPR 相关转座酶进行RNA 引导的DNA 插入。Science。 365 :48-53,2019。9)Klompe SE,Vo PLH,Halpin-Healy TS 等:转座子编码的 CRISPR-Cas 系统直接介导 RNA 引导的 DNA 整合。Nature。571 :219-225,2019。10)Jacobi AM,Rettig GR,Turk R 等:用于高效基因组编辑的简化 CRISPR 工具及其向哺乳动物细胞和小鼠受精卵中的精简协议。方法。121-122 :16-28,2017。11)Lino CA,Harper JC,Carney JP 等:CRISPR 的递送:挑战和方法综述。药物递送。 12)Kaneko T.:用于产生和维持有价值动物品系的生殖技术。J. Reprod. Dev. 64:209-215,2018。 13)Mizuno N,Mizutani E,Sato H等:通过腺相关病毒载体通过CRISPR/Cas9介导的基因组编辑实现胚胎内基因盒敲入。iScience。9:286-297,2018。 14)Yoon Y,Wang D,Tai PWL等:利用重组腺相关病毒在小鼠胚胎中精简体外和体内基因组编辑。Nat. Commun. 9 : 412, 2018。15)Takahashi G, Gurumurthy CB, Wada K, 等:GONAD:通过输卵管核酸递送系统进行基因组编辑:一种新型的小鼠微注射独立基因组工程方法。Sci. Rep. 5 : 11406, 2015。16)Sato M, Ohtsuka M, Nakamura S.:输卵管内滴注溶液作为在体内操纵植入前哺乳动物胚胎的有效途径。New Insights into Theriogenology, InTechOpen, London, 2018, pp 135-150。 17)Sato M,Takabayashi S,Akasaka E 等:基因组编辑试剂在小鼠生殖细胞、胚胎和胎儿体内靶向递送的最新进展和未来展望。Cells。9:799,2020。18)Alapati D,Zacharias WJ,Hartman HA 等:宫内基因编辑治疗单基因肺疾病。Sci. Transl. Med。11:eaav8375,2019。19)Nakamura S,Ishihara M,Ando N 等:基因组编辑成分经胎盘递送导致中期妊娠小鼠胎儿胚胎心肌细胞突变。IUBMB life。 20)Sato T, Sakuma T, Yokonishi T 等:利用 TALEN 和双切口 CRISPR/Cas9 在小鼠精原干细胞系中进行基因组编辑。Stem Cell Reports。5:75-82,2015。21)Wu Y, Zhou H, Fan X 等:通过 CRISPR-Cas9 介导的基因编辑纠正小鼠精原干细胞中的一种遗传疾病