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当前提高 CRISPR 敲入效率的策略
摘要：自 2012 年发现以来，成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 系统为开发新型、高精度的基于基因组编辑的基因治疗 (GT) 替代方案提供了广阔的前景，从而克服了与经典 GT 相关的挑战。经典 GT 旨在通过慢病毒 (LV) 或腺相关病毒 (AAV) 将转基因随机整合到基因组中或以游离形式持续进入细胞核，从而将转基因递送到细胞中。尽管使用 LV 或 AAV 可以实现高转基因表达效率，但它们的性质可能会对人类产生严重的副作用。例如，基于 LV（NCT03852498）和 AAV9（NCT05514249）的 GT 临床试验分别表明，用于治疗 X 连锁肾上腺脑白质营养不良症和杜氏肌营养不良症的 GT 出现了骨髓增生异常综合征和患者死亡。与经典 GT 相比，基于 CRISPR/Cas9 的基因组编辑需要细胞的同源直接修复 (HDR) 机制才能将转基因插入基因组的特定区域。这种复杂且受良好调控的过程在哺乳动物细胞的细胞周期中受到限制，而非同源末端连接 (NHEJ) 则占主导地位。因此，寻找提高 HDR 效率的方法，使其优于 NHEJ，至关重要。本文全面回顾了当前用于改进基于 CRISPR/Cas9 的 GT 的 HDR 的替代方案。
通过基因打靶和随后的单链退火介导的标记基因切除，在植物中对 miRNA 靶位进行精确的基因组编辑
基因打靶 (GT) 能够使用供体 DNA 作为模板进行精确的基因组修饰（例如，引入碱基替换）。结合用于选择 GT 细胞的选择标记的干净切除，GT 有望成为一种标准的、普遍适用的碱基编辑系统。之前，我们展示了通过 piggyBac 转座子从水稻中 GT 修饰的位点进行标记切除。然而，piggyBac 介导的标记切除的局限性在于它只能识别 TTAA 序列。最近，我们提出了一种新颖的通用精确基因组编辑系统，该系统由 GT 和随后的单链退火 (SSA) 介导的标记切除组成，原则上不受靶序列的限制。在本研究中，我们将碱基替换引入了 OsCly1 基因的 microRNA miR172 靶位点，OsCly1 基因是参与闭花授粉开花的大麦 Cleistogamy1 基因的直系同源物。为确保有效的 SSA，GT 载体在选择标记的两端都含有 1.2 kb 的重叠序列。使用带有重叠序列的载体进行正负选择介导的 GT 的频率与使用不带重叠序列的 piggyBac 介导的标记切除载体的频率相当，在 T 0 代中，SSA 介导的标记切除频率计算为 ∼ 40%。这个频率被认为足以产生无标记细胞，尽管它低于使用 piggyBac 介导的标记切除的频率（接近 100%）。到目前为止，使用碱基编辑器和基于 CRISPR/Cas9 的 prime 编辑系统在目标基因的不连续多个碱基中引入精确替换已经相当困难。在这里，利用 GT 和我们的 SSA 介导的标记切除系统，我们成功地在 OsCly1 基因的 miR172 靶位点上不仅实现了单个碱基的精确替换，而且还实现了人工不连续的多个碱基的精确替换。
研究生手册
A. 简介 本手册旨在让所有进入材料科学与工程学院的研究生了解相关要求和程序。佐治亚理工学院 (GT) 所有研究生的一般规则和规定都包含在佐治亚理工学院总目录中。所有 MSE 研究生必须仔细阅读并熟悉佐治亚理工学院目录和 MSE 研究生手册。MSE 手册应被视为 GT 目录中材料的补充。虽然 GT 目录中的某些部分材料将在此处重复，但本手册不能替代 GT 目录 (http://www.catalog.gatech.edu/) 或 GT 研究生教育毕业生指南：(https://grad.gatech.edu/new-students#grad-guide)。研究生应咨询其顾问或 MSE 研究生办公室以获取有关课程、研究领域和其他与项目相关事项的更多信息。还应咨询 MSE 研究生办公室，了解关于经济援助、助学金、奖学金、学费减免等事宜。处理申请攻读博士学位、博士辅修表格、论文批准证书、入学豁免等事宜所需的表格可在网上获取，网址为 http://www.grad.gatech.edu/theses-dissertations-forms。MSE 研究生的其他一般信息来源包括：
简单促进Cas9和cas12a表达通过多合一策略改善基因靶向
基因靶向（GT）是精确操纵基因组序列的有前途的工具，但是，种子植物中的GT仍然是一项艰巨的任务。通过同源指导修复（HDR）提高GT效率的简单而直接的方法是增加植物目标部位的双链断裂（DSB）的频率。在这里，我们通过结合CAS表达的转录和翻译增强子来报告拟南芥中GT的一种多合一方法。我们发现，通过使用增强剂来促进Cas9和cas12a变体的表达可以改善拟南芥基因组中的DSB和随后的敲门效率。这些结果表明，在特定时机（卵细胞和早期胚胎）下，简单地增加CAS蛋白表达可以改善可遗传的GTS的建立。这种简单的方法允许在植物中进行常规的基因组工程。
（IJACSA）《国际先进计算机科学与应用杂志》，第 12 卷，第 3 期，2021 年人工智能：机器翻译在法语-印尼语烹饪文本翻译中的准确性
Asriani Abbas 4 哈桑努丁大学 印尼文学研究项目 文化科学系，望加锡，印尼 摘要——机器翻译作为人工智能 (AI) 的使用不断增加，世界上最受欢迎的翻译工具是谷歌翻译 (GT)。该工具不仅用于通过翻译学习和获取外语信息，而且还被用作医院、机场和购物中心互动和交流的媒介。本文旨在探讨机器翻译在翻译法语-印尼语烹饪文本 (食谱) 中的准确性。烹饪文本样本取自互联网。研究结果表明，GT 中机器翻译的符号模型是通过强调源语言和目标语言的概念 (所指) 的等价性，从源语言的能指 (形式) 翻译成目标语言的能指 (形式)。GT 有助于通过单词、短语和句子翻译现有的法语-印尼语烹饪文本概念。烹饪文本机器翻译中遇到的一个问题是文化等值。GT 机器翻译无法准确识别源语言和目标语言的文化背景，因此结果是直译的形式。但是，可以通过从一种语言到另一种语言的单词、短语和句子细化文化等价物的翻译来提高 GT 的准确性。
了解2023 IMO GHG策略
从“井”到“唤醒”。从燃料生产，运输和存储中的3温室气体排放，从“井”到“油箱”。 从“储罐”到“唤醒”的燃料上使用燃料的4温室气体排放。 5耗能基础。 6全球目前的年度新建交付每年约为6000万GT。从燃料生产，运输和存储中的3温室气体排放，从“井”到“油箱”。从“储罐”到“唤醒”的燃料上使用燃料的4温室气体排放。5耗能基础。6全球目前的年度新建交付每年约为6000万GT。6全球目前的年度新建交付每年约为6000万GT。
Jean-Pascal Tricoire 的“加速” - 施耐德电气
来源：施耐德电气™ 可持续发展研究所 (*) 能源相关和工业过程排放。10-15 Gt：基于对大约的评估。北美、欧洲、中国和亚洲经合组织国家在建筑、交通、工业和发电领域的能源相关二氧化碳排放量为 30 Gt
Jean-Pascal Tricoire 的“加速” - 施耐德电气
来源：施耐德电气™ 可持续发展研究所 (*) 能源相关和工业过程排放。10-15 Gt：基于对北美、欧洲、中国和亚洲经合组织国家建筑、交通、工业和发电部门约 30 Gt 能源相关二氧化碳排放量的评估
通过 VLRS 支持循环经济
循环经济是“一种经济体系，其中产品及其所含原材料的价值在其使用阶段结束时得到最佳保存”。这包括“原材料的回收、使用阶段的延长以及基于共享和租赁的循环商业模式的建立”。循环经济“为当前的线性系统提供了一种替代方案，在当前的线性系统中，产品基本上是生产、使用，最后是处置”。- 联合国基于问题的欧洲和中亚环境与气候变化联盟 ( UN IBC, 2023 )。根据 2023 年循环差距报告，由于材料开采和使用的增加，全球经济循环率仅为 7.2%，并且趋势更糟 ( 循环经济, 2023 )。从绝对值来看，这意味着从地球开采并用作材料投入的约 93 Gt 材料中，只有 7 Gt 会重新回到经济中再利用，35 Gt 作为废物消失，15 Gt 作为排放消失，其余则锁定在基础设施、车辆、机械和家电的库存中（占总材料投入的 38%）。