摘要 蛋白质是细胞中的关键分子,其丰度不仅在基因表达水平而且在转录后水平受到广泛调控。在这里,我们描述了一种酵母基因筛选方法,该方法能够系统地表征蛋白质丰度调控在基因组中的编码方式。该筛选方法结合了 CRISPR/Cas9 碱基编辑器来引入点突变,并对内源性蛋白质进行荧光标记以方便流式细胞仪读数。我们首先使用单个 gRNA 以及正向和负向选择筛选对酵母中的碱基编辑器性能进行了基准测试。然后,我们研究了 16,452 种基因扰动对代表各种细胞功能的 11 种蛋白质丰度的影响。我们发现了数百种调控关系,包括 GAPDH 同工酶 Tdh1/2/3 与 Ras/PKA 通路之间的新联系。许多已识别的调节因子特定于这 11 种蛋白质中的一种,但我们还发现了一些基因,这些基因在受到扰动时会影响大多数测试蛋白质的丰度。虽然更具体的调控因子通常作用于转录,但广泛的调控因子往往在蛋白质翻译中发挥作用。总的来说,我们的新筛选方法为蛋白质调控网络的组成部分、规模和连通性提供了前所未有的见解。
限制脉冲潜在产量的主要限制因素包括除了社会经济因素以外的脉冲生长区域中普遍存在的生物和非生物应力。在生物胁迫中,与根腐病配合物相结合的镰刀菌可能是最广泛的疾病,除了干根腐烂和锁骨腐烂外,还会造成鹰嘴豆的巨大损失。虽然镰刀菌,无菌性摩西和植物疫病会导致鸽子,黄色马赛克,尾虫叶斑,粉状霉菌和叶片皱纹和叶片造成大量损失,并在Vigna作物(Mungbean和Urdbean)中造成了相当大的损害。在鹰嘴豆和鸽子中的革兰氏荚虫(Helicoverpa Armigera)中,岩豆和鸽子中的革兰氏pod虫,木豆中的豆荚在乌尔德比恩和蒙比e造成严重损害各自的作物的豆荚,粉丝,粉丝,jassids和thrips。bruchids是储存的脉冲晶粒中最严重的害虫,在管理中需要最高优先级。杂草也会大大损失脉冲。最近,线虫已成为许多地区成功种植脉冲的潜在威胁。
直接对人类胚胎进行基因改造是否会影响未来人的福祉?斯帕罗回答这个问题的方法违背了生物伦理学的一个核心目标:产生能够在研究、临床环境或公共政策中产生实际影响的观点。斯帕罗没有参与提供以经验为基础的人类身份描述的研究,而是不加批判地采用了帕菲特众所周知的两种基因干预类型的区分:“影响个人”和“影响身份”。这种区别对斯帕罗 (2022) 来说至关重要。鉴于对未来人的预期福利的合理关注,它允许他决定干预者是否对结果负有道德责任。影响个人的干预就是这种情况,因为只有在这种情况下,未来的人才会从干预中受益或遭受伤害。相比之下,目前通过 CRISPR 实现的体细胞或生殖细胞编辑通常涉及某种形式的选择——通过体外受精、体外胚胎核移植或植入前遗传学诊断——在植入妊娠母亲子宫之前选择“最佳孩子”。选择会影响身份,因为它会改变受孕时间,从而
文章标题:评论:真菌细胞中的CRISPR/CAS12介导的基因组编辑:植物 - 真菌病理学中的进步,机制和未来方向作者:Chiti Agarwal [1],Vishnutej Ellur [1]附属机构[1]附属机构:华盛顿州立大学[1] ORCID IDS:0000-000-000-0003-41125-25-25-8880 [1] chiti.agarwal@gmail.com许可证信息:这项工作已在Creative Commons Attribution许可证下发布开放访问http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/,只要适当引用任何原始工作,该工作就允许在任何媒介中进行无限制的使用,分发,分发和复制。可以在https://www.scienceopen.com/上找到条件,使用条款和发布政策。预印度语句:本文是预印本,未经同行评审,正在考虑,并提交给ScienceOpen的预印本进行开放的同行评审。doi:10.14293/pr2199.000129.v1预印本在线发布:2023年5月14日关键字:CRISPR,CRISPR/CAS12,真菌病原体,植物病原体
少数寄生虫Mansonella Ozzardi和Mansonella Perstans,Mansonellelisois的病因,感染了全球数亿人,但仍然是人类官方病原体中最受研究所研究的人之一。M. Ozzardi在拉丁美洲国家和加勒比海群岛高度普遍,而M. Perstans主要在撒哈拉以南非洲以及南美的一些地区发现。除了其地理分布的差异外,这两个寄生虫还通过不同的昆虫载体传播,并且在其对常用的驱虫药物的反应上表现出差异。缺乏基因组信息阻碍了对Mansonella寄生虫的生物学和进化的研究,并了解物种之间临床差异的分子基础。在当前的研究中,报道了喀麦隆的两个独立临床分离株的高质量基因组和两个来自巴西的ozzardi分离株,另一个是委内瑞拉的。基因组的大小约为76 MB,每个基因编码约10,000个基因,并且基于BUSCO评分约为90%,与其他完整的基因组相似。这些序列代表了Mansonella寄生虫的第一个基因组,并实现了对Mansonella和其他细胞寄生虫之间相似性和差异的比较基因组分析。水平DNA转移(HDT)从线粒体(NUMTS)以及从内共生菌群沃尔巴氏菌(NUWT)转移到宿主核基因组的转移并进行了分析。序列比较抗合性药物的已知靶标二乙基钙化靶标(DEC),伊维沙素和梅本唑的序列发育分析表明,除GON-2基因编码的DEC靶标外,所有已知的靶基因均存在于GON-2基因中,而GON-2基因编码了GON-2基因,该基因在基因组中均来自M. ozzardi Inlecties。 这些新的参考基因组序列将为生物学,共生,进化和药物发现的进一步研究提供宝贵的资源。序列发育分析表明,除GON-2基因编码的DEC靶标外,所有已知的靶基因均存在于GON-2基因中,而GON-2基因编码了GON-2基因,该基因在基因组中均来自M. ozzardi Inlecties。这些新的参考基因组序列将为生物学,共生,进化和药物发现的进一步研究提供宝贵的资源。
环境变化和人口增长是农作物生产和整个粮食安全的主要问题。为了解决这个问题,研究人员一直致力于改良谷物和豆类,并在本世纪初取得了相当大的进展。然而,如果没有蔬菜和水果,谷物和豆类加在一起不足以满足人类生活的饮食和营养需求。生产优质的蔬菜和水果极具挑战性,因为它们易腐烂、保质期短,而且在收获前后会遇到非生物和生物压力。通过引入外来基因来生产转基因作物,可以生产出优质、延长保质期和抗逆性、改变开花和果实成熟的时间的转基因作物,这种方法非常成功。然而,一些生物安全问题,如转基因异交风险,限制了它们的生产、营销和消费。现代基因组编辑技术,如 CRISPR/Cas9 系统,在这种情况下提供了一个完美的解决方案,因为它可以生产无转基因的转基因植物。因此,这些基因编辑植物可以轻松满足农作物生产和消费的生物安全规范。本综述重点介绍了 CRISPR/Cas9 系统在成功产生非生物和生物胁迫抗性方面的潜力,从而提高了蔬菜和水果的质量、产量和整体生产力。
诱导的多能干细胞(IPSC)源自使用四个Yamanaka转录因子对成年体细胞的重编程。自发现以来,干细胞(SC)领域就达到了重要的里程碑,并在疾病建模,药物发现和再生医学领域开设了多个门户。同时,聚类的定期插入短的短质体重复序列(CRISPR) - 相关蛋白9(CRISPR-CAS9)彻底改变了基因组工程的范围,从而允许产生遗传上修改的细胞系,并实现精确的基因组重组或随机插入/插入/删除的应用程序,用于使用WIREDIRESS,WIREDIRESS。心血管疾病代表着不断增加的社会问题,对潜在的细胞和分子机制的了解有限。IPSC分化为多种细胞类型与CRISPR-CAS9技术相结合的能力可以实现对潜在疗法的病理生理机制或药物筛查的系统研究。此外,这些技术可以通过调节靶向蛋白的表达或抑制来提供心血管组织工程(TE)方法的细胞平台,从而为设计新的细胞系和/或精细仿生生物仿生支架提供了可能性。本综述将重点介绍IPSC,CRISPR-CAS9的应用以及其在心血管TE领域的结合。特别是,将讨论此类技术的临床转换性,从疾病建模到药物筛查和TE应用。
请引用本文:Toda and Okamoto,(2020)。通过将大分子直接递送到水稻卵细胞和受精卵中的基因表达和基因组编辑系统,Bio-protocol 10 (14): e3681。DOI:10.21769/BioProtoc.3681。
印度农业研究理事会 (ICAR) 下属的国家植物生物技术研究所 (ICAR-NIPB) 是印度农业研究理事会 (ICAR) 下属的一家顶级研究机构。该研究所成立于 1985 年,最初名为印度农业研究所 (IARI) 的“生物技术中心”,旨在设计和利用分子生物学工具和技术进行农业研究。对生物技术在农业中的作用的预见使该中心声名鹊起,并于 1993 年升格为国家植物生物技术研究中心,2019 年升格为国家植物生物技术研究所 (NIPB)。国家植物生物技术研究所负责开发新工具和技术,并在植物生物技术领域取得突破,以改良作物。NIPB 的职责之一是培养植物生物技术领域的人力资源。
在整个细胞发育中,DNA可能遭受威胁基因组完整性和细胞存活的损害。最有害的病变之一是双链DNA断裂(DSB),因为它可能导致基因组信息的丢失。DSB可能自然发生在细胞代谢期间,也可能是由外部因素触发的(Deriano; Roth,2013)。无论哪种方式,这些损坏都会通过细胞立即修复,主要是通过两种途径:非同源末端连接(NHEJ)或同源指导修复(HDR)。与通过NHEJ进行修复不同,NHEJ仅将裂解的DNA的末端连接起来(请参阅第2章),HDR途径需要存在相同或非常相似的模板,即完整的序列,以准确地修复病变的DNA(Heyer等人,2010年)。提供用于HDR中使用的模板的可能性代表了通过同源重组(HR)途径进行基因编辑的关键元素,该途径可能被利用为几种新的繁殖技术(NBT)之一。